小膠質細胞原代培養
實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料 新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒 含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+0.04%的EDTA)儀器、耗材 37℃恒溫搖床實驗步驟 1按照培養少突膠質細胞的方法,待10d后細胞分層生長。顯微鏡下可見滿視野圓形、折光性強的小膠質細胞,附著在貼壁生長、緊密連接在一起、鋪滿培養瓶的星形膠質細胞層上面,甚至可見許多圓形小膠質細胞飄落在培養液中,此時可以開始純化。2.將培養瓶固定到37℃恒溫搖床上,80-200r/min,振搖2h左右。3收集振搖下來的小膠質細胞,種植到多聚賴氨酸包被的培養皿中,加入新的含10%胎牛血清的DMEM培養基繼續培養,每2-3d換液1次。4.小膠質細胞在體外較難進一步分裂增殖,但如果根......閱讀全文
小膠質細胞原代培養實驗
實驗方法原理利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+
小膠質細胞原代培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下
小膠質細胞原代培養
實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料 新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒 含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
少突膠質細胞原代培養
少突膠質細胞來源于1-2 天的大鼠。斷頭后大鼠大腦收集到Ham’s F-12培養液中,移除腦膜和血管。皮質用機械勻漿進行勻漿然后將細胞懸液依次通過230μm和104μm尼龍網進行過濾。細胞通過1000rpm 7分鐘離心進行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM進行重懸細胞。最后以2.0×1
星形膠質細胞(astrocyte)原代培養
星形膠質細胞來源于2天的大鼠。斷頭后的大鼠大腦收集在含有11mM 碳酸氫鈉,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除腦膜,血管和白質。大腦皮層用機械分裂法進行勻漿,然后將細胞懸液經230μm,104μm 和73.3μm孔的鐵絲網依次過濾。然后用700g 速度10分鐘離心收集細胞,
皮層星形膠質細胞的原代培養
實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的貼附力最強。用這種方法獲得的星形膠質細胞純度很高(95%以上),且細胞具有較好的增
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗——貼附差異法
皮層星形膠質細胞的原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)皮層星形膠質細胞功能研究。實驗方法原理利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的
小鼠原代小膠質細胞吞噬功能的分析
實驗概要本實驗主要介紹從小鼠大腦分離的神經膠質細胞的吞噬功能。實驗步驟為了檢測小膠質細胞的吞噬功能,利用凋亡的神經祖細胞作為目標,因為在體外環境下它能最模擬自然條件下小膠質細胞的吞噬目標。1. 將神經祖細胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中進行分離
小鼠原代小膠質細胞吞噬功能的分析
實驗概要本實驗主要介紹從小鼠大腦分離的神經膠質細胞的吞噬功能。實驗步驟為了檢測小膠質細胞的吞噬功能,利用凋亡的神經祖細胞作為目標,因為在體外環境下它能最模擬自然條件下小膠質細胞的吞噬目標。1. 將神經祖細胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中進行分離
正常大鼠小膠質細胞的培養
實驗材料:1.?新生大鼠或小鼠;2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.?培養用液:含10%的胎牛血清的MEM培養液,補加5μg/ml牛胰島素、2%葡萄糖及抗生素;4.?CFS-Ⅰ刺激因子:小膠質細胞在體外培養條件下一般不分裂,
正常小鼠原代腦星形膠質細胞培養
一、實驗試劑?1、培養基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞原代培養實驗
細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法胰酶消化法組織塊直接培養法實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合
超實用原代細胞培養小知識
很多老師在設計科研實驗的時候都會很迷茫,到底用什么細胞好? 越來越多的老師開始傾向于原代細胞的科研實驗,在設計實驗中,原代細胞和細胞株到底該怎么選擇呢?原代細胞的定義:原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有細胞的基
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血
細胞的原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入
細胞的原代培養實驗
原代培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理 細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件,將細胞從機體中取出,在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來,廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域,發展成一種重要生物技術,并取得顯著成就
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血
腫瘤細胞原代培養實驗
實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養。根據細胞種類不同選用
神經膠質細胞培養實驗
酶消化法 胰蛋白酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通
神經細胞原代培養實驗
實驗方法原理神經細胞的原代培養是盡 量 創造最適合于各類神經細胞生長的體外環境,獲得狀態良好,純度較高細胞的方法 。 腦部組織來源的各種神經細胞的培養具有相似的取材過程和部分通用的培養條件。實驗材料動物組織試劑、試劑盒消化液(0.25%胰蛋白酶+O.04%的EDTA)完全培養基(DMEM+10%胎牛
神經細胞原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 神經細胞的原代培養是盡 量 創造最適合于各類神經細胞生長的體外環境,獲得狀態良好,純度較高細胞的方法 。 腦部組織來源的各種神經細胞的培養具有相似的取材過程和部分通用的培養條件。
成骨細胞原代培養實驗
實驗方法原理采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養液培養。?實驗材料骨標本試劑、試劑盒Hams F12 培養液
成骨細胞原代培養實驗
成骨細胞原代培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時
小鼠肝細胞原代培養實驗
胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?