小膠質細胞原代培養實驗
實驗方法原理利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+0.04%的EDTA)儀器、耗材37℃恒溫搖床實驗步驟1按照培養少突膠質細胞的方法,待10d后細胞分層生長。顯微鏡下可見滿視野圓形、折光性強的小膠質細胞,附著在貼壁生長、緊密連接在一起、鋪滿培養瓶的星形膠質細胞層上面,甚至可見許多圓形小膠質細胞飄落在培養液中,此時可以開始純化。2.將培養瓶固定到37℃恒溫搖床上,80-200r/min,振搖2h左右。3收集振搖下來的小膠質細胞,種植到多聚賴氨酸包被的培養皿中,加入新的含10%胎牛血清的DMEM培養基繼續培養,每2-3d換液1次。4.小膠質細胞在體外較難進一步分裂增殖,但如果根據實驗需要......閱讀全文
小膠質細胞原代培養實驗
實驗方法原理利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+
小膠質細胞原代培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下
小膠質細胞原代培養
實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料 新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒 含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
星形膠質細胞(astrocyte)原代培養
星形膠質細胞來源于2天的大鼠。斷頭后的大鼠大腦收集在含有11mM 碳酸氫鈉,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除腦膜,血管和白質。大腦皮層用機械分裂法進行勻漿,然后將細胞懸液經230μm,104μm 和73.3μm孔的鐵絲網依次過濾。然后用700g 速度10分鐘離心收集細胞,
少突膠質細胞原代培養
少突膠質細胞來源于1-2 天的大鼠。斷頭后大鼠大腦收集到Ham’s F-12培養液中,移除腦膜和血管。皮質用機械勻漿進行勻漿然后將細胞懸液依次通過230μm和104μm尼龍網進行過濾。細胞通過1000rpm 7分鐘離心進行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM進行重懸細胞。最后以2.0×1
皮層星形膠質細胞的原代培養
實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的貼附力最強。用這種方法獲得的星形膠質細胞純度很高(95%以上),且細胞具有較好的增
小鼠原代小膠質細胞吞噬功能的分析
實驗概要本實驗主要介紹從小鼠大腦分離的神經膠質細胞的吞噬功能。實驗步驟為了檢測小膠質細胞的吞噬功能,利用凋亡的神經祖細胞作為目標,因為在體外環境下它能最模擬自然條件下小膠質細胞的吞噬目標。1. 將神經祖細胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中進行分離
小鼠原代小膠質細胞吞噬功能的分析
實驗概要本實驗主要介紹從小鼠大腦分離的神經膠質細胞的吞噬功能。實驗步驟為了檢測小膠質細胞的吞噬功能,利用凋亡的神經祖細胞作為目標,因為在體外環境下它能最模擬自然條件下小膠質細胞的吞噬目標。1. 將神經祖細胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中進行分離