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圖2A：測量Rluc表達的發光模塊的設置。雙擊“Read options”對話框下“Measurement”標簽左側的“lumin label”圖2A：測量Rluc表 圖2B：EYFP表達的熒光模塊的設置，雙擊“Read options”對話框下“Measurement”標簽左側的“fluor label” 7. 在BRET試驗方案中已經使用了COS-1細胞。然而，可以在任何細胞類型中進行的BRET也可以進行轉染。各種轉染試劑和技術可以應用于轉染帶有cDNA結構的細胞。在我們的手中，使用Polyfect 轉染試劑（QIAGEN）可以獲得一直的結果。然而，使用的轉染試劑要隨著選擇的細胞類型而變化。 8. 在進行BRET試驗時，Rluc比EYFP融合蛋白表達的水平重要。不同數量的Rluc 和 EYFP融合cDNA被傳染和實驗來決定獲得最優化BRET信號的條件。融......閱讀全文
圖2A：測量Rluc表達的發光模塊的設置。雙擊“Read options”對話框下“Measurement”標簽左側的“lumin label”圖2A：測量Rluc表 圖2B：EYFP表達的熒光模塊的設置，雙擊“Read options”對話框下“Measurement”標簽左側的“fluor l
BRET融合結構的生產構成編碼BRET融合蛋白包括以下內容：1. 表達Rluc-EYFP融合蛋白的BRET融合結構的陽性對照（見注2）。2. BRET結構的陰性對照：如：單獨表達Rluc和EYFP的pRluc, pEYFP，GPCRs對照（非感興趣的GPCR）和其他融合了Rluc
簡介： BRET已經成功的應用于研究哺乳動物細胞中GPCR同源和異源二聚體以及涉及到受體脫敏作用和交易的受體/β-arrestin相互作用（綜述，1）。BRET的顯著優勢是可以在活細胞中，正確的的位置實時的監測蛋白質和蛋白質之間的相互作用。由于GPCR高度的疏水性和細胞本地化，測量蛋白質之間相互作用
技術內容 蛋白質并非孤立存在的生物分子，而是具有特定三維空間結構并與其他蛋白質相互作用，共同執行功能。因此，蛋白質的模塊及空間組織與其表達水平具有同樣的重要性。為了解析蛋白質組的組織結構單元而開發的基于質譜的蛋白質組學方法通常結合了質譜檢測與各種生化試驗。其中最經典的技術為1999[1]
技術內容蛋白質并非孤立存在的生物分子，而是具有特定三維空間結構并與其他蛋白質相互作用，共同執行功能。因此，蛋白質的模塊及空間組織與其表達水平具有同樣的重要性。為了解析蛋白質組的組織結構單元而開發的基于質譜的蛋白質組學方法通常結合了質譜檢測與各種生化試驗。其中最經典的技術為1999[1]首次報導的親和
概述酵母雙雜交系統由Fields和Song等首先在研究真核基因轉錄調控中建立。典型的真核生長轉錄因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二個不同的結構域: DNA結合結構域（DNA-binding domain）和轉錄激活結構域（transcription-activating domai
近日，來自美國奧古斯塔大學的研究人員發現一個叫做WASF3的基因在癌細胞中持續表達，但在健康細胞中處于靜默狀態，該基因或成為降低癌細胞轉移能力的重要靶向目標。 之前研究發現WASF3蛋白能夠促進癌細胞侵襲，最近科學家們通過藥物阻斷該蛋白與另外一個幫助其維持功能的蛋白的相互作用，發現能夠抑制具有
在生物化學中，涉及到蛋白質與配體（包括蛋白質結合小分子，酶催化底物和抑制劑結合等等）的相互作用時，有不少衡量相互作用的生化指標，其中包括 Ki值（抑制常數），Kd值（解離常數），Km值（米氏常數）1） Kd值：dissociation constant針對的是蛋白質與小分子（如LAC等），指的是解離
實驗材料CM-5 葡聚糖芯片（BIAcore）配體蛋白靶蛋白試劑、試劑盒PBS胺-偶聯試劑盒（詳見「其他」）儀器、耗材BIAcore SPR 設備BIA 評估軟件（point-and-click）實驗步驟1. 插入一個新的 BIAcore CM-5 葡聚糖芯片。2. 用 PBS 作為工作液以持續流動
布朗大學的生物學家發現了一連串包括從胰島素到肌肉中蛋白降解的復雜分子事件，這些事件能顯著減少果蠅的壽命。這項發表在11月7日Plos Genetics雜志上的新研究成果，可能適用于不同物種，表明了哺乳動物蛋白激活素是這個過程的主要罪魁禍首。 果蠅非常的短命，但是，對所有動物衰老生物學感