蛋白質組實驗全套流程方案1
蛋白質組實驗流程雙向電泳的樣品的制備樣品制備原則樣品制備是雙向電泳中最關鍵的一步,將直接影響2-DE結果好壞。目前并沒有一個通用的樣品制備方法,盡管處理方法多種多樣,但都遵循幾個基本的原則:1)盡可能的提高樣品蛋白的溶解度,抽提最大量的總蛋白,減少蛋白質的損失;2)減少對蛋白質的人為修飾;3)破壞蛋白質與其他生物大分子的相互作用,并使蛋白質處于完全變性狀態。根據這一原則,樣品制備需要四種主要的試劑:離液劑(chaotropes),主要包括尿素(Urea)和硫脲(thiourea);表面活性劑(sufactants),也稱去垢劑,如CHAPS與Zwittergent系列等雙性離子去垢劑;還原劑(reducing agents),最常用的是二硫蘇糖醇(DTT)和磷酸三丁酯(TBP)等。當然,也可以選擇性的加入Tris-base,蛋白酶抑制劑以及核酸酶。樣品的來源不同,其裂解的緩沖液也各不相同。通過不同試劑的合理組合,以達......閱讀全文
蛋白質組實驗全套流程方案-1
?蛋白質組實驗流程雙向電泳的樣品的制備樣品制備原則樣品制備是雙向電泳中最關鍵的一步,將直接影響2-DE結果好壞。目前并沒有一個通用的樣品制備方法,盡管處理方法多種多樣,但都遵循幾個基本的原則:1)盡可能的提高樣品蛋白的溶解度,抽提最大量的總蛋白,減少蛋白質的損失;2)減少對蛋白質的人為修飾;3)破壞
蛋白質組實驗全套流程方案-2
聚丙烯酰胺凝膠的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳分離膠所用溶液溶液成分不同體積(ml)凝膠液中各成分所需體積(ml)5101520253040506%?? 水2.65.37.910.613.215.921.226.5?? 30%丙烯酰胺溶液123456810?? 1.
北京胃癌蛋白質組全套檢測時間縮短至1天
胃癌是我國高發的惡性腫瘤之一,晚期胃癌患者五年生存率不足5%。臨床上治療胃癌的一線用藥多為廣譜抗癌藥,造成化療毒副作用大、療效不明顯。2013年,北京市科委在“生命科學領域前沿技術培育”專項中設立“基于蛋白質組學的胃癌個體化治療技術研究”課題,日前取得了重要進展,胃癌蛋白質組全套檢測時間縮短至1
年末機床全套保養方案
1.切斷電源 保養時,必須切斷電源,然后進行工作,以確保操作安全。 2.清理工作位置 清理工作區域,確保清潔過程中有整潔和足夠的空間 3.拆下并清洗機床各罩殼 保持內外清潔,無銹蝕,無油污。【金屬加工微信,內容不錯,值得關注】 4.刀架和滑板部分的保養
cDNA文庫組標準流程-1
一.Total RNA的提取 (一) 試劑配制 準備工作: 1.研缽、5ml/10ml/ 25ml移液管、100ml/250ml量筒、250ml /100ml容量瓶、藥匙、 試劑瓶等玻璃制品均用錫紙包裹口部,置于烤箱內,180℃,烤6小時。 2.50ml/1.5ml離心管
酶聯免疫吸附實驗(ELISA) 全套解決方案
基本原理 1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗
全套抗體標記工具-全套抗體和蛋白質標記試劑盒的使用-1
? ?? 用特定標簽標記抗體已成為生物科學和醫學研究中的重要且常規程序,標簽的范圍從視覺標記(例如熒光染料)到半抗原分子(例如生物素),標簽的作用有增強免疫復合物和蛋白質-蛋白質相互作用的可見性,以及用于蛋白質的分離和純化。?? ? ? ?在確定選擇哪種標簽類型時,應側重于抗體的下游應用。熒光標
方案1 蛋白質的過甲酸氧化實驗
實驗材料凍干的純化蛋白樣品試劑、試劑盒甲酸氫溴酸過氧化氫NaOH 固體儀器、耗材旋轉蒸發器小試管實驗步驟1.加入 100ul 過氧化氫到 900ul 甲酸中,在室溫下放置讓,將反應產生過甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷凍過甲酸至 0°C。3.在預冷的小試管中,將蛋白質溶解于 50ul 過甲酸中(
代謝組學全流程解決方案
賽默飛基于其超高分辨的靜電場軌道阱(Orbitrap)質譜平臺結合其功能強大的軟件平臺,提供代謝組學全流程解決方案。該方案不僅覆蓋從極性代謝物到非極性代謝物的全面檢測、峰提取與定量、統計學分析與可視化作圖、代謝產物的全面鑒定、代謝通路分析等全流程的要求,而且還整合了從非靶標生物標記物發現到靶標生物標
蛋白質組學鑒定技術流程
蛋白質組(Proteome)的概念,蕞早由澳大利亞Macquarie大學的Wilkins和Williams于1994年首先提出的,是指一個基因組(Genome),或一個細胞、組織表達的所有蛋白質。蛋白質組學(Proteomics)以細胞、組織或生物體全體蛋白質為研究對象,通過高通量的色譜質譜聯用技術