尿海藻糖酶的測定方法
一、酶活性的測定 1. 原理 利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。 2. 步驟 將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱，以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI。加上0.1mL 0.25mmol/L的海藻糖，混合后于37℃溫育120min。生成的葡萄糖用POD-GOD方法測定，以每小時每升尿液中釋放多少umol的葡萄糖量作為海藻糖酶的活性濃度。 3. 結果 IshiharaR等測定健康組尿海藻糖酶的活性是26.6±14”umol·h-1．gcreatinine-1。 二、酶含量的測定 1. 原理 利用抗海藻糖酶單克隆抗體的夾心ELISA方法檢測酶蛋白的含量。 2. 步驟 國外報導用重組海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制備出抗人海藻糖酶的單......閱讀全文
尿海藻糖酶的測定方法
一、酶活性的測定 1. 原理 利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。 2. 步驟 將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱，以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，將體積調整到1
尿海藻糖酶的酶含量的測定
1. 原理利用抗海藻糖酶單克隆抗體的夾心ELISA方法檢測酶蛋白的含量。2. 步驟國外報導用重組海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制備出抗人海藻糖酶的單克隆抗體，然后經過包被、封閉等步驟，用夾心ELISA方法測定出酶蛋白的濃度。3. 結果IshiharaR等用ELISA法測定健康組尿海藻糖酶蛋白的
尿海藻糖酶的酶活性的測定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱，以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI
尿海藻糖酶定量測定的技術要點
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備 國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法（HPLC）分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性（反相）和電荷（離子交換）方面的差別來實現樣
人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備
國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法（HPLC）分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性（反相）和電荷（離子交換）方面的差別來實現樣品的分離的。反相HPLC的優點是分辨率大。利用分子生物學方法
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一種胞外酶，位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣，國際酶學編號為EC3.2.1.28，屬于水解酶類，它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37，在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物，腎臟中提純，經SDS-PAGE電泳顯示
海藻糖酶的臨床應用
急、慢性腎小球疾病慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說，急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論：急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶的特性介紹
理化特性 海藻糖酶是一種胞外酶，位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣，國際酶學編號為EC3.2.1.28，屬于水解酶類，它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37，在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物，腎臟中提純，經SDS-
海藻糖酶的基本信息
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一種，對海藻糖有特異作用，水解后成為2個分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人，除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外，在血漿α2-球蛋白部分中，也可檢出其活性，特別是在腎臟中活性很強。
海藻糖酶的生物學特性
在腸道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作為能源被吸收利用，有報道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹瀉，而腎海藻糖酶的功能目前還不清楚。有報道說，尿海藻糖酶活性升高與近端腎小管損害和某些種類的腎疾病有關。