Science轉化醫學：基因治療再獲重要突破
哈佛醫學院和波士頓兒童醫院的研究人員通過基因治療，成功使遺傳性耳聾的小鼠恢復了聽力。這一成果發表在七月八日的Science Translational Medicine雜志上，為治療基因突變引起的聽力損失奠定了基礎。 “我們的基因治療還需要進一步優化，相信在不久的將來它就能用于臨床試驗，”哈佛醫學院的副教授Jeffrey Holt說。 大約有七十多種基因在突變時會導致耳聾，TMC1就是其中之一。Holt等人此前闡明了TMC1和TMC2在聽覺中起到的關鍵作用。他們發現，這兩種蛋白在毛細胞的微絨毛上形成通道，當聲波扶過微絨毛時這種通道就會打開。隨后鈣離子進入細胞生成電信號，電信號傳遞到大腦后形成聽覺。 為了對TMC1突變進行基因治療，研究人員構建了兩類小鼠模型。他們通過完全刪除TMC1基因，模擬了TMC1隱性突變的患者。兩個拷貝的TMC1突變，會使患者在很小的時候（通常兩歲左右）就出現嚴重的聽力損失。 研究人員還建立了顯......閱讀全文
基因治療“復活”小鼠聽力
來自邁阿密大學、哥倫比亞大學、加州大學舊金山研究所、巴斯德研究所、法國國家健康與醫學研究院、法國科學研究中心、法蘭西學院、巴黎大學和法國克萊蒙特?奧弗涅大學的科學家成功恢復了成年DFNB9耳聾小鼠模型的聽力。 DFNB9耳聾是一種常見的先天性遺傳性耳聾，因為缺乏編碼耳畸蛋白（otoferlin
PNAS：基因療法能夠治療小鼠先天性耳聾癥狀
與邁阿密，哥倫比亞和舊金山的大學合作，來自巴斯德研究所，Inserm，CNRS，法蘭西學院，索邦大學和Clermont Auvergne大學的科學家們成功恢復了DFNB9耳聾小鼠的聽力，這是最常見的先天性遺傳性耳聾病例之一。患有DFNB9耳聾的個體缺乏編碼otoferlin的基因，而otofer
新型基因治療遞送方式，恢復成年耳聾小鼠聽力
聽力損失（Hearing Loss）是最常見的感覺缺陷障礙之一，影響著全世界超過5%的人口（約4.66億人），其中3400萬是兒童。聽力損失還與社會孤立的增加以及患癡呆癥和抑郁癥的風險增加有關。 預計到2050年，每10個人中就有1個人會受到聽力損失的折磨，聽力損失造成了社會和情感上的缺失，并
基因技術治愈小鼠白內障遺傳疾病－基因治療提供新思路
中科院上海生物化學與細胞生物學研究所李勁松研究組在一項最新研究中，利用CRISPR- Cas9技術，治愈了小鼠的白內障遺傳疾病。專家認為，這項實驗為人類基因治療提供了一條新思路。12月5日，相關成果在線發表于《細胞—干細胞》雜志。同時，該成果被國際雜志《科學家》選擇進行同期新聞發布。
基因治療可以恢復全色盲小鼠模型的錐體視覺
? 根據5月21日的《自然醫學》（Nature Medicine 2007.）雜志上的一項報告，基因治療可恢復全色盲小鼠模型的錐體視覺。 佛羅里達大學醫學院的William W. Hauswirth博士及其同事研究了與全色盲相關的基因Gnat2腺伴隨病毒(AAV)傳送至Gnat2缺陷小鼠視網膜下間
基因治療使小鼠恢復聽力，遺傳性耳聾有望治愈
波士頓兒童醫院和哈佛醫學院的研究人員通過基因治療為“耳聾”小鼠模型恢復了聽力，其研究成果于7月8日在線發表在Science Translational Medicine雜志上，這將推動基因治療應用于遺傳性耳聾治療的進程。 波士頓兒童醫院的科學家Jeffrey Holt說：“我們的基因治療方法尚
轉基因小鼠制備實驗
實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 HCGPMSG透明質酸酶戊巴比妥鈉儀器、耗材 顯微鏡鑷子持卵針注射針實驗步驟 1. ?選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。?2. ?47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合
轉基因小鼠制備實驗
1、 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。?2、 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。?3、第二天上午9:00前觀察供體、受
轉基因小鼠制備實驗
轉基因小鼠制備實驗可應用于：（1）動物發育研究；（2）研究細胞功能調控機制。實驗方法原理遺傳的基本物質是DNA，基因是位于染色體上有遺傳效應的DNA片段，對于儲存在生物全套染色體中的全部遺傳信息，可稱其為基因組。不同種類、不同個體的生物基因組成是不同的，對動物個體來說，非自身的基因成分屬于外源基因，
轉基因小鼠制備實驗
實驗步驟 1. 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2. 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。3. 第二天上午9:00前觀察
新型轉基因小鼠或為開發治療人類疾病的新型療法提供思路
實驗室用鼠(Credit: ? anyaivanova / Fotolia) 目前，科學家們有望通過使用工程化的精子來改變個體后代的缺陷基因，近日，刊登在國際雜志FASEB Journal上的一篇研究論文中，來自英國皇家獸醫學院的研究者通過一種病毒載體，就可以成功將一種新型的遺傳物質引入到小鼠
人源抗體基因小鼠研發及其在治療疾病中的應用（二）
在人源化抗體研發技術成功的基礎上，90年代早期開始應用噬菌體展示技術研制全人源抗體。該技術是建立在構建重組肽和蛋白平臺，實現體外展示技術的基礎上。利用噬菌體包殼蛋白與外源多樣性組合抗體基因融合在一起，構建所需的抗體組合表達庫，而這些與噬菌體外殼蛋白融合的人源抗體基因，可共同展現于噬菌體表面，再借助特
人源抗體基因小鼠研發及其在治療疾病中的應用（三）
2014年，科學家們應用細菌人工染色體（BAC）和Cre/loxP重組技術，在體外ES細胞系上，將人源抗體重鏈（V-D-J）可變區和輕鏈（Vk-Jk)可變區分別插入到小鼠重鏈恒定區（Cμ ）和輕鏈恒定區（Ck) 的上游區域，在不影響小鼠抗恒定區的基礎上，成功構建了KyMouse小鼠模型。Ky
人源抗體基因小鼠研發及其在治療疾病中的應用（一）
19世紀末，應用動物來源的血清治療感染性疾病，成為抗體藥物研發的最早嘗試。1975年雜交瘤技術的成功建立，極大促進了治療性抗體的基礎研究發展。1986年第一個治療性鼠源抗體藥物批準臨床應用，更加速了生物醫藥企業研發以抗體為重要治療藥物的方向。?治療性抗體已成為目前治療腫瘤等人相關疾病的主導藥物。隨著
“鎮靜”基因治愈小鼠癲癇
英國研究人員說，通過向過度活躍的小鼠腦部細胞加入“鎮靜”基因，首次完全治愈了它們的癲癇。 研究人員認為，這種方法能對無法用藥物控制癲癇發作的人起到幫助作用。 研究人員用一種病毒將新的基因嵌入少量的神經細胞內。這一研究結果刊登在美國《科學轉化醫學》雜志上。 全球有大約5000萬癲
Fgf21基因敲除小鼠
背景信息FGF家族成員具有廣泛的促有絲分裂和細胞存活特性，并參與多種生物過程，包括胚胎發育、細胞生長、形態發生、組織修復、腫瘤生長和侵襲。成纖維細胞生長因子21（FGF21）是一種肝細胞因子——即由肝臟分泌的一種激素，通過下丘腦室旁核中的FGF21受體信號傳導調節糖攝入和對甜食的偏好，并與伏隔核內多
小鼠H2基因圖
? 小鼠的組織相容性抗原有幾十種以上，由常染色體H-1、H-2、H-3……、H-30等基因編碼（H表示組織相容性histocompatibility),此外，還受小鼠性染色體基因（雄性為XY，雌性為XX)控制。其中H-2抗原為小鼠主要組織相竄性抗原系統，而其他抗原均系次要組織相容性抗原系統。MHC在
基因工程小鼠命名規則
基因工程小鼠的命名規則有沒有發現，當你在查詢或看paper時，往往會蹦出幾個賊長的，還夾雜著數字、上標、符號的名稱，比如：129-Trp53tm1Holl/J、FVB-Tg(PomcCre)5Brn...... 看上去很復雜的樣子。這些其實是基因工程小鼠的全名。如果把這一長串字符解構一下，常見的基因
基因治療可以減少肥胖，逆轉小鼠的2型糖尿病
全球近5億人受到肥胖的影響，其中很多是兒童。與肥胖相關的疾病，包括心臟病、中風、2型糖尿病和癌癥，是可預防死亡的主要原因。肥胖是由遺傳因素和環境因素共同造成的，影響了有效的抗肥胖藥物的開發，這些藥物存在嚴重的脫靶效應。在近日發表于Genome Research的一項研究中，研究人員開發了一種基因
小鼠肝基因組DNA制備
原理DNA 以核蛋白形式存在于細胞核中，制備 DNA 的原則是既要將 DNA 與蛋白質、脂類和糖類等分離，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及鏈霉蛋白酶 E 的應用使這兩個原則得到了保證。蛋白酶K 或鏈霉蛋白酶 E 均為廣譜蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。
人類語言基因讓小鼠變“聰明”
美歐研究人員15日發表的一項新研究表明，如果給小鼠引入人類版本的語言基因Foxp2，那么小鼠的學習能力將得到提高。這一成果有助于研究人類語言的出現和進化。 Foxp2語言基因是十多年前在英國一個存在嚴重語言障礙的家族中首先發現的，缺乏這種基因的人普遍存在學習障礙和語言組織障礙。這種基因并非人類
轉基因小鼠制備實驗方法
實驗概要掌握轉基因小鼠制備基本實驗方法。實驗步驟1. 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。 2. 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結
轉基因食物或危害小鼠健康
法國卡昂大學的一個研究小組近日宣布，他們發現被終身喂食一種普通轉基因玉米的小鼠易患上腫瘤，并且肝臟和腎臟也受到嚴重損害。目前，法國政府已經啟動了對轉基因玉米安全性的調查。 雖然之前的安全實驗已經證實在食用90天之后，這種轉基因玉米對動物沒有不良影響，《每日郵報》相關報道稱，新的實驗被認為是首次對
基因變異小鼠引發“僵尸”ZL戰
像一只不斷向前踢的“僵尸”一樣，圍繞阿爾茨海默氏癥研究的變異小鼠的法律戰爭又一次發生了，此次法律事件距離上一輪相關法律訴訟剛過去4年。在最新的案件中，美國坦帕市南佛羅里達大學（USF）起訴美國國立衛生研究院（NIH）授權銷售該領域使用的一種特殊小鼠。首次審前聽證會已定于3月21日在聯邦法院開審。
小鼠肝基因組DNA制備
原理DNA 以核蛋白形式存在于細胞核中，制備 DNA 的原則是既要將 DNA 與蛋白質、脂類和糖類等分離，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及鏈霉蛋白酶 E 的應用使這兩個原則得到了保證。蛋白酶K 或鏈霉蛋白酶 E 均為廣譜蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。
小鼠βactin基因的克隆表達（4）
實驗步驟：（1）誘導靶蛋白表達分別挑取對照菌和重組菌1~2個菌落，接入5ml含Amp（30μg/ml）的LB培養液，37℃振蕩培養過夜。取5ml過夜培養物接入500ml含Amp（30μg/ml）的LB培養液，37℃振蕩培養2h以上，至對數中期（A550=0.5~1.0）。向誘導管中加入IPTG使其濃
小鼠βactin基因的克隆表達（1）
動物組織RNA的提取實驗目的：掌握由動物組織中提取總RNA的方法實驗原理：Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液，其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性，隨后加入氯仿，酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中，RNA
小鼠βactin基因的克隆表達（3）
（2）質粒的提取及酶切鑒定分析 ? 質粒的提取按照質粒提取試劑盒的操作步驟進行，然后進行雙酶切鑒定。 ? 管號 ① ② 質粒DNA
小鼠βactin基因的克隆表達（2）
實驗步驟： ? （1）目的基因與表達載體的連接反應： ①表達載體和目的片段的酶切 ? 管號 ① ② pGEX 4T-1
基因敲除小鼠的原理和方法
1.利用基因同源重組進行基因敲除。基因敲除是80年代后半期應用DNA同源重組原理發展起來的。80年代初，胚胎干細胞(ES細胞)分離和體外培養的順利奠定了基因敲除的技術基礎。1985年，首次證實的哺乳動物細胞中同源重組的存在奠定了基因敲除的理論基礎。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES