PCR技術邁入第三代微滴式數字PCR
你說世界變化快不快，PCR已經邁入第三代!近日，一種稱為微滴式數字PCR(ddPCR?)的新技術出現在《Analytical Chemistry》雜志上，它能夠確定樣品中待測靶分子的絕對數目。 第一代PCR就是我們目前最常用的終點PCR技術，通過凝膠電泳獲得定性的結果。風靡全球的實時定量PCR技術為第二代，它利用熒光試劑監控擴增，來實現相對定量。在開展基因表達分析時，需要標準曲線或參考基因來協助定量。 微滴式數字PCR則為第三代PCR，它不再依賴Cq值或內參基因，即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的絕對數目。微滴技術讓數字PCR更低成本，且更實用。 文章的第一作者為Bio-Rad公司的Ben Hindson博士。Bio-Rad公司在不久前推出了QX100? 微滴式數字PCR系統，帶來了ddPCR技術。此系統能夠確定核酸分子的絕對數目，讓研究人員無比精確地研究生物學。Hindson博士表示，ddPCR ......閱讀全文
PCR技術邁入第三代－微滴式數字PCR
你說世界變化快不快，PCR已經邁入第三代!近日，一種稱為微滴式數字PCR(ddPCR?)的新技術出現在《Analytical Chemistry》雜志上，它能夠確定樣品中待測靶分子的絕對數目。 第一代PCR就是我們目前最常用的終點PCR技術，通過凝膠電泳獲得定性的結果。風靡全球的實時定
預防癌癥新手段：微滴式數字PCR(ddPCR)技術
“預防就是治療”--《眾病之王：癌癥傳》 戰勝癌癥，早期預防、早期發現是關鍵。癌癥患者如果在晚期被發現，90%的患者都會死亡，而腫瘤在早期發現，5年的存活率是90%。早期發現惡變細胞蹤跡，可以通過干預手段，提高自身免疫力，也可以完整切除，結合化療，治療疾病。 微滴式數字PCR（Droplet
百人杜文斌團隊成功研制第三代微滴數字PCR
數字PCR是一種用于絕對核酸定量檢測方法，具有前所未有的準確度和精確度，是繼實時熒光定量PCR技術之后的第三代核酸定量擴增檢測技術，在液體活檢、腫瘤伴隨診斷、無創產前篩查、病原載量監測等方面具有重要應用前景，是科研和臨床領域的平臺級新技術。數字PCR市場主流產品主要為歐美跨國公司的高端儀器，在科
您是否知道伯樂生命醫學DDPCR即微滴式數字PCR
伯樂生命醫學DDPCR即微滴式數字PCR的優點 PCR就是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱，是一種分子生物學技術，可以用來放大特定的DNA片段，可以看作是生物體外的特殊DNA復制。 伯樂生命醫學DDPCR即微滴式數字PCR的優點： 最精
NaicaTM－crystal－微滴芯片式數字PCR系統
?? 導語：數字PCR技術是基于PCR技術發展起來的核酸檢測和定量的最新技術，在眾多應用中，在精準醫療方面的應用尤為突出。法國Stilla Technologies公司專注于開發新一代核酸絕對定量技術，其旗下品牌Naica TM Crystal全自動微滴芯片數字PCR儀系統具有高靈敏度、高精
微滴芯片數字PCR技術在檢測新冠病毒的應用
國家衛健委發布了《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第五版）》，其中在實驗室檢測技術指南中明確提出，核酸檢測結果陰性不能排除新型冠狀病毒感染。3月4日，國家衛健委發布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》 中提到了以下兩點：對疑似病例要盡可能采取包括快速抗原檢測和多重PCR核酸檢測等方法對呼吸道病
液滴微流控：液滴制備系統
成功制備穩定、均一的液滴需同時具備三大關鍵要素：穩定的壓力輸出，精確的流量控制和合適的芯片設計。本文以十字型液滴芯片為例，介紹一種可靠的液滴制備系統，其示意圖見下。液滴制備系統概覽此液滴制備系統組成部分有：2個FLOW EZ壓力泵，2個儲液池，2個過濾器，2個流量傳感器，1個芯片夾具，1個十字型液滴
液滴微流控：液滴制備方法
基于液滴的微流控系統，因其提供了方便處理微流體(μL，pL)的混合、封裝、分選等多種操控的可行性，并適合高通量實驗，在近幾十年期間，得到高速發展。什么是液滴？液滴微流控有哪些應用？如何搭建液滴制備系統？有關液滴的諸多問題，將會是我們近期所要分享的內容。?什么是液滴？微流控里的液滴，可以理解為兩種互不
液滴微流控
加拿大液滴微流控和芯片實驗室研究會主席，滑鐵盧大學（University of Waterloo）機械與機電工程系教授Carolyn Ren博士，將在會議上發表關于一種高通量篩選分析使能技術——液滴微流控的主題演講。她將描述幾個運用納升尺寸液滴進行高通量篩選的應用案例。Ren博士的實驗室評估了氣-液
微滴培養的定義
中文名稱微滴培養英文名稱microdroplet culture定 義一種將原生質體懸浮液通過稀釋機械地分成單個原生質體，放在有許多小培養池的培養容器中，密封后進行培養的技術。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞培養與細胞工程（二級學科）
液滴微流控（一）：液滴制備方法
基于液滴的微流控系統，因其提供了方便處理微流體(μL，pL)的混合、封裝、分選等多種操控的可行性，并適合高通量實驗，在近幾十年期間，得到高速發展。 什么是液滴？液滴微流控有哪些應用？如何搭建液滴制備系統？有關液滴的諸多問題，將會是我們近期所要分享的內容。 什么是液滴？ 微流
液滴微流控（一）：液滴制備方法
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Naica自動化微滴芯片數字PCR系統在HPV檢測的應用
人類DNA中HPV16和HPV18的靈敏度和特異性檢測?全世界有超過5％的癌癥是因人乳頭瘤病毒（HPV）導致的，它主要通過性傳播的方式感染[1]。十多種HPV亞型由于其在細胞轉化中的作用以及宮頸癌和口咽癌發病率的增加而被認為是高風險的。在這些亞型中，HPV16和HPV18是最普遍的，在大約70％的宮
液滴微流控芯片原理
在微流控芯片中，液滴是兩相界面處的表面張力和剪切力共同作用形成的，根據分散相和連續相的不同，液滴可分為兩種：油相中的水相微液滴（W/O）和水相中的油相微液滴(O/W)。形成液滴的方法可分為被動法和主動法兩種。被動法是指通過控制微管結構和兩相流速比來控制液滴的生成。主動法一般通過外加力來驅動和控制液滴
液滴微流控：如何保證液滴的穩定性
液滴，因其微型化及高通量的特性，已成為一種用于微生物培養的有力工具，但在液滴中進行微生物的長期培養時，微生物的生長（生長速度及形態）及其分泌的各種代謝物，均會對液滴的穩定性造成一定的影響，可能會出現液滴“破裂”或者液滴互相融合現象，此外，部分微生物的生長對微環境特別敏感，液滴失去穩定性，便意味著我們
科學家解釋微液滴秘密
特立尼達和多巴哥的拉布雷亞瀝青湖是世界上最大的天然瀝青湖。 瀝青湖內極小的水滴中也會蘊含著豐富的生態系統，例如細菌和甲烷生成菌，如果以科學的方法利用該特性將有助減少漏油事故。 研究者調查了特立尼達和多巴哥境內的拉布雷亞瀝青湖，發現只需極少量的水便能夠支撐以石油為食的生物體的生存。研究者將這一發現
微納加工讓液滴“乖乖聽話”
在前沿研究和精密制造領域，微液滴有著廣泛應用。國家納米科學中心研究員高玉瑞團隊和香港城市大學講席教授曾曉成、賓夕法尼亞大學講席教授Joseph S. Francisco等團隊合作，在前期理論研究的基礎上，通過光刻技術和后期處理，制備出一類具有同心閉環微壁/微通道的結構表面，實現了對微液滴的精準調控。
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淺析IVD最成熟的技術領域蘊藏的機遇
IVD增速最快的細分行業當屬分子診斷，而分子診斷主要包括核酸診斷和生物芯片技術。核酸診斷主要分為聚合酶鏈式反應（PCR）和熒光原位夾雜（FISH）。PCR目前在分子診斷細分技術中最為成熟且應用最廣。在這一技術紅海的最遠處，數字化PCR技術因為其先進性尚處于藍海競爭市場，國內外企業積極參戰，讓這一領域
液滴微流控：在液滴中培養大腸桿菌
已有研究表明，使用氟化油進行油包水液滴制備，可用于長期細胞培養[1]，相較礦物油，氟化油表現出更好的生物相容性[2]，但要找到一種有效穩定液滴的表面活性劑，仍是一個挑戰。本研究的目的是：通過在液滴中培養大腸桿菌（Escherichia coli），說明新型表面活性劑dSURF的生物相容性及液滴穩定表
Talanta：高靈敏和防污染的“準共聚焦”微液滴數字PCR閱讀儀
清華大學醫學院生物醫學工程系郭永實驗室在《分析學家》（Analyst）在線以封底（back cover）發表題為《一種雙熒光四分類微液滴數字PCR數據的準確、可靠和自動分類方法——密度分水嶺算法》（A density-watershed algorithm (DWA) method for ro
微流控漫談系列之圖解液滴微流控技術
圖解液滴微流控技術微液滴具有體積小、比表面積大、速度快、通量高、大小均勻、體系封閉、內部穩定等特性，在藥物控釋、病毒檢測、顆粒材料合成、催化劑等領域中均有重要應用。微流控技術的發展為微液滴生成中實現尺寸規格、結構形貌和功能特性等的可控設計和精確操控提供了全新平臺。本文還是采用以圖片展示為主，結合相關
巢式PCR
實驗方法原理 由于巢式PCR反應有兩次PCR擴增，從而降低了擴增多個靶位點的可能性（因為與兩套引物都互補的引物很少）增加了檢測的敏感性；又有兩對PCR引物與檢測模板的配對，增加了檢測的可靠性。 由于第二套引物位于第一輪PCR產物內部，而非目的片斷包含兩套引物結合位點的可能性極小，因此第二套引
巢式PCR
巢式PCR可應用于：（1）病毒檢測；（2）測序分析；（3）低表達基因檢測。實驗方法原理由于巢式PCR反應有兩次PCR擴增，從而降低了擴增多個靶位點的可能性（因為與兩套引物都互補的引物很少）增加了檢測的敏感性；又有兩對PCR引物與檢測模板的配對，增加了檢測的可靠性。?由于第二套引物位于第一輪PCR產物
巢式PCR
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 由于巢式PCR反應有兩次PCR擴增，從而降低了擴增多個靶位點的可能性（因為與兩套引物都互補的引物很少）增加了檢測的敏感性；又有兩對P
液滴微流控：單細胞高通量液滴測序（Dropseq）
細胞是生物結構與功能的基本單位，形態類型千差萬別。通過細胞基因組學，可以描述細胞特性及功能，本文所介紹的單細胞（single-cell）高通量液滴測序（Drop-seq）技術，是一種快速分析成千上萬個單細胞的方法，通過將每個細胞包裹在納升級微滴中，進行RNA雜交并生成mRNA轉錄物，制作細胞基因表達
微控視頻旋轉滴超低界面張力儀
XZD-SP技術指標?1、表面及界面張力測量范圍1×10-7～100mN/m；2、轉速范圍1000～9000r/min(13000r/min)，控制精度±0.1％；高速同步伺服電機直連傳動，提高了轉速的控制精度，克服了升速電機經常更換皮帶的麻煩；讀數范圍徑向0～6mm，軸向0-50mm，讀數精度0.
第三代數字PCR技術應用分享
數字PCR技術即Digital PCR技術真正實現了對目標DNA或RNA分子進行絕對定量，在精密度、準確度和靈敏度方面有無與倫比的優勢，同時解除了對Ct值和標準品的依賴，提高了抑制劑的耐受能力，因此被稱作第三代PCR技術。 Naica crystal 全自動微滴芯片數字PCR儀系統自動化生成25
西安交大最新綜述：第三代PCR技術
自1985年 Mullis 發明了體外多聚酶鏈反應(PCR)至今, PCR在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用.今天的第三代PCR技術, 即絕對定量的數字化 PCR也備受關注。來自西安交通大學生命科學與技術學院等處的研究人員近期發表綜述，介紹了 PCR 技術的發展
數字PCR的前世今生：特點、優勢和局限性
數字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR，數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的絕對定量。數字PCR是近年來迅速發展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環閾值（Ct），不受擴增效率的影響，具有很好的準確度