WIKI資訊
自1985年 Mullis 發明了體外多聚酶鏈反應(PCR)至今, PCR在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用.今天的第三代PCR技術, 即絕對定量的數字化 PCR也備受關注。來自西安交通大學生命科學與技術學院等處的研究人員近期發表綜述，介紹了 PCR 技術的發展歷程, 綜述和討論了絕對定量的數字化 PCR 的技術路線和應用進展, 總結提出了其進一步發展面臨的問題, 并展望了數字 PCR 技術在生物醫學方面的發展前景. 第一代 PCR(即終點法 PCR)在進行擴增后只能獲得半定量的結果. 隨著生物分子熒光技術的發展, 1992 年, 實時定量 PCR(RT-PCR)即基于熒光探針或染料的第二代 PCR 技術應運而生.該技術隨后逐漸發展為檢測目標片段的主流分子生物學技術. 在實時定量 PCR 過程中, 熒光信號隨著擴增產物的積累而增強. 實時熒光定量 PCR 能夠實時獲得模板擴增的熒光值, 然......閱讀全文
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一
PCR技術概論PCR技術簡史PCR技術的基本原理PCR反應體系與反應條件PCR反應特點PCR擴增產物的分析 聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。 它具有特異、敏感、產率高、 快速、 簡便、重復性好、易自
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
PCR反應體系與反應條件 標準的PCR反應體系： 10×擴增緩沖液 10ul 4種dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一
PCR技術自1985年建立以來，發展之迅速、應用之廣泛，表明其具有強大的生命力.近些年來，基于PCR的基本原理，許多學者充分發揮創造性思維，對PCR技術進行研究和改進，使PCR技術得到了進上步地完善，并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織
PCR技術自1985年建立以來，發展之迅速、應用之廣泛，表明其具有強大的生命力.近些年來，基于PCR的基本原理，許多學者充分發揮創造性思維，對PCR技術進行研究和改進，使PCR技術得到了進上步地完善，并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR
多聚酶鏈式反應即PCR（polymerase chain reaction）技術，應用這一技術可以將微量目的基因（DNA片段）擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義，它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最
多聚酶鏈式反應即PCR（polymerase chain reaction）技術，應用這一技術可以將微量目的基因（DNA片段）擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義，它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最
PCR反應體系與反應條件-------------------------------------------------------------------------------- 標準的PCR反應體系：10×擴增緩沖液 10ul4種dNTP混合物 各200umol/L引物 各10
簡介：什么是PCR芯片？實時定量PCR是檢測基因表達zui靈敏，zui可靠的方法。通過在試驗過程中，實時監測熒光染料的信號變化，反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣（能達到5個數量級），因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是，由于實時定量PCR需要制備
PCR技術必須有人工合成的合理引物和提取的樣品DNA，然后才進行自動熱循環，最后進行產物鑒定與分析。引物設計與合成目前只能在少數技術力量較強的研究院、所進行，臨床應用只需購買PCR檢測試劑盒就可開展工作，PCR自動熱循環中影響因素很多，對不同的DNA樣品，PCR反應中各種成份加入量和溫度循環參數均不
試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑 酶和酶緩沖液 核酸和寡核苷酸 儀器、耗
試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸儀器、耗材 專用設備實驗步驟 第 1 階段：DNA 引物的激酶處理研究表明很多種 DNA 聚合酶（比如，T7、修飾過的 T7、Taq、Vent、Tth 和 Klenow)具有脫氧核苷酸末端轉移酶（Tdt) 活性（Clark1988;H
隨著現代科學技術的不斷發展，特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展，新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應，已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力，已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法
試劑、試劑盒緩沖液、溶液和試劑酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸儀器、耗材專用設備實驗步驟第 1 階段：DNA 引物的激酶處理研究表明很多種 DNA 聚合酶（比如，T7、修飾過的 T7、Taq、Vent、Tth 和 Klenow)具有脫氧核苷酸末端轉移酶（Tdt) 活性（Clark1988;Hu1993)。
第一節 概述 聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction, PCR），又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique)，是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法。該方法一改傳統分子克隆技術的模式，不通過活細胞，操作
隨著現代科學技術的不斷發展，特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展，新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應，已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力，已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法，
多聚酶鏈式反應即PCR（polymerase chain reaction）技術，應用這一技術可以將微量目的基因（DNA片段）擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義，它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應
PCR 芯片實驗體系 完整的PCR芯片實驗體系包括RT2ProfilerTM PCR芯片，RT2 Real-TimeTM SYBR Green PCR反應體系和cDNA合成試劑盒。所有這些組分均為基于SYBR Green的實時定量PCR反應優化。精心
5．核酸探針雜交技術原理 根據完成雜交反應所處介質的不同，分成固相雜交反應和液相雜交反應。固相雜交反應是在固相支持物上完成的雜交反應，如常見的印跡法和菌落雜交法。事先破碎細胞使之釋放DNA/RNA然后把裂解獲得的DNA/RNA固定在硝基纖維素薄膜上，再加標記探針雜交，依顏色變化確定結果，該法是
PCR技術概論 聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一
2.2.2.3 操作程序1．在無菌的Eppendorf管內加入以下反應物：2．93℃ 反應2 min后開始以下循環： 93℃變性反應1 min； 50℃退火反應1 min； 72℃延伸反應3 min。 經過17～35循環后，最后一個循環72℃增加5 min。循環結束后反應產物置于40
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析，分析的都是PCR終產物。但是在許多
PCR技術簡史 PCR的最早設想 核酸研究已有100多年的歷史，本世紀60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術，Korana于1971年最早提出核酸體外擴增的設想：“經過DNA變性，與合適的引物雜交，用DNA聚合酶延伸引物，并不斷重復該過程便可克隆tRNA基因”。 PCR的實現 1
(張蓓，沈立松 上海第二醫科大學附屬新華醫院上海兒童醫學中心實驗診斷中心)摘要:多聚酶鏈反應飛速的發展使其成為了分子生物學實驗室重要的工具，實時熒光定量PCR(real-timequantitative PCR)技術以其敏感性高、重復性好、速度快和污染少使PCR技術又
1實驗原理 1.1聚合酶鏈式反應（PCR）的基本構成 PCR指在引物指導下由酶催化的對特定模板（克隆或基因組DNA）的擴增反應，是模擬體內DNA復制過程，在體外特異性擴增DNA片段的一種技術，在分子生物學中有廣泛的應用，包括用于DNA作圖、 DNA測序、分子系統遺傳學等。 PCR基本原理
前兩天寫了一篇博客，講國內單位比較喜歡批量購買最先進的測序儀的事。文章提到生物技術和IT一樣，都有軟硬兩個方面，而對我們搞生物技術的來說，軟的就是各種酶了： 做分子診斷，創新可以分成兩類：應用創新（applications)靠的是人家研制出最新的儀器；原始創新則靠自己擺弄不同的酶反應了。而一個
一、目的基因的獲得 目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式