DNA測序儀
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今dna序列分析的主流。美國peabi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一種型號。本實驗介紹的是abiprism310型dna測序儀的測序原理和操作規程。abi prism 310型基因分析儀(即dna測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司利的四色熒光染料標記的ddntp(標記終止物法),因此通過單引物pcr測序反應,DNA測序儀生成的pcr產物則是相差1個堿基的3''''末端為4種不同熒光染料的單鏈dna混合物,使得四種熒光染料的測序 pcr產物可在一根毛細管內電泳,從而避免了泳道間遷移率差異的影響,大大提高了測序的精確度。......閱讀全文
DNA測序儀:454測序儀
454測序儀的出現極大促進了測序業務的開展,科研人員已經將測序技術作為解決科研工作中許多常見 問題的利器。這是因為454測序儀在以下幾個方面取得了質的突破:首先是解決了高通量測序問題;其次它簡 化了樣品準備步驟,將以往轉化大腸桿菌擴增質粒的繁瑣過程全部用簡單的體外PCR擴增法替代了;最后, 它縮小了
DNA測序儀
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今dna序列分析的主流。美國peabi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一種型
DNA測序儀
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今 dna序列分析的主流。美國pe abi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一
DNA測序儀pcr測序反應
pcr測序反應 (1) 取0.2ml的pcr管,用記號筆編號,將管插在顆粒冰中,按下表加試劑: 所加試劑 測定模板管 標準對照管 bigdye mix 1μl 1μl 待測的質粒dna 1μl - pgem-3zf (+) 雙鏈dna - 1μl 待測dna的正向引物 1μl -
計算/DNA測序儀
測序反應精確度計算公式:100%-差異堿基數(不包括n數)/650×100%差異堿基即測定的dna序列與已知標準dna序列比較不同的堿基,n為儀器不能辨讀的堿基。
DNA測序儀定義
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今 dna序列分析的主流。美國pe abi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多
DNA測序儀相關
分析或打印出彩色測序圖譜 上機操作按儀器操作說明書安裝毛細管,進行毛細管位置的校正,人工手動灌膠和建立運行的測序順序文件。儀器將自動灌膠至毛細管,1.2kv預電泳5min,按編程次序自動進樣,再預電泳(1.2kv,20min),在7.5kv下電泳2h。電泳結束后儀器會自動清洗,灌膠,進下一樣品
DNA測序儀原理
abi prism 310型基因分析儀(即dna測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddntp(標記終止物法),因此通過單引物pcr測序反應,生成的pcr產物則是相差1個堿基的3''''末端為4種不同熒光染料的單
試劑器材/DNA測序儀
1.bigdye測序反應試劑盒 主要試劑是bigdye mix,內含pe專利四色熒光標記的ddntp和普通dntp,amplitaq na polymerase fs,反應緩沖液等。2.pgem-3zf (+) 雙鏈dna對照模板 0.2g/l,試劑盒配套試劑。3.m13(-21)引物 tgtaaa
操作步驟/DNA測序儀
pcr測序反應(1) 取0.2ml的pcr管,用記號筆編號,將管插在顆粒冰中,按下表加試劑:所加試劑 測定模板管 標準對照管bigdye mix 1μl 1μl待測的質粒dna 1μl -pgem-3zf (+) 雙鏈dna - 1μl待測dna的正向引物 1μl -m13(-21)引物 - 1μl
發展歷史/DNA測序儀
70年代末,WalterGilbert發明化學法、FrederickSanger發明雙脫氧終止法手動測序,同位素標記80年代中期,出現自動測序儀(應用雙脫氧終止法原理)、熒光代替同位素,計算機圖象識別90年代中期,測序儀重大改進、集束化的毛細管電泳代替凝膠電泳2001年完成人類基因組框架圖
DNA測序儀的計算
測序反應精確度計算公式:100%-差異堿基數(不包括n數)/650×100% 差異堿基即測定的dna序列與已知標準dna序列比較不同的堿基,n為儀器不能辨讀的堿基。
DNA測序儀發展歷史
70年代末,WalterGilbert發明化學法、FrederickSanger發明雙脫氧終止法手動測序,同位素標記 80年代中期,出現自動測序儀(應用雙脫氧終止法原理)、熒光代替同位素,計算機圖象識別 90年代中期,測序儀重大改進、集束化的毛細管電泳代替凝膠電泳 2001年完成人類基因組
DNA測序儀的原理
abi prism 310型基因分析儀(即dna測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddntp(標記終止物法),因此通過單引物pcr測序反應,生成的pcr產物則是相差1個堿基的3''''末端為4種不同熒光染料
全自動DNA測序儀
全自動DNA測序儀是一種用于生物學、農學領域的分析儀器,于2003年7月22日啟用。 技術指標 全自動DNA測序、PCR片段大小分析和定量分析;自動灌膠、進樣數據收集分析;還可進行雜合子、PCR序列和片段分析。 主要功能 CEQuence研究模塊是一個新的軟件模塊,它將序列與已知參考序列
DNA測序儀的原理
abi prism 310型基因分析儀(即dna測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddntp(標記終止物法),因此通過單引物pcr測序反應,生成的pcr產物則是相差1個堿基的3''''末端為4種不同熒光染料
DNA測序儀試劑器材
1.bigdye測序反應試劑盒 主要試劑是bigdye mix,內含peZL四色熒光標記的ddntp和普通dntp,amplitaq dna polymerase fs,反應緩沖液等。 2.pgem-3zf (+) 雙鏈dna對照模板 0.2g/l,試劑盒配套試劑。 3.m13(-21)引物
DNA測序儀原理和方法
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括Sanger雙脫氧鏈終止法和Maxam-Gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今DNA序列分析的主流。美國PE ABI公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一種
DNA測序儀注意事項
1.abi prism 310基因分析儀是高檔精密儀器,需專人操作、管理和維護。 2.本實驗測序pcr反應的總體積是5μl,而且未加礦物油覆蓋,所以pcr管蓋的密封性很重要,除加完試劑后蓋緊pcr管蓋外,最好選用pe公司的pcr管。如pcr結束后pcr液小于4~4.5μl,則此pcr反應可能失
DNA測序儀原理和方法
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括Sanger雙脫氧鏈終止法和Maxam-Gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今DNA序列分析的主流。美國PE ABI公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最
DNA測序儀的發展歷史
70年代末,WalterGilbert發明化學法、FrederickSanger發明雙脫氧終止法手動測序,同位素標記 80年代中期,出現自動測序儀(應用雙脫氧終止法原理)、熒光代替同位素,計算機圖象識別 90年代中期,測序儀重大改進、集束化的毛細管電泳代替凝膠電泳 2001年完成人類基因組
DNA測序儀的試劑器材
1.bigdye測序反應試劑盒 主要試劑是bigdye mix,內含peZL四色熒光標記的ddntp和普通dntp,amplitaq dna polymerase fs,反應緩沖液等。 2.pgem-3zf (+) 雙鏈dna對照模板 0.2g/l,試劑盒配套試劑。 3.m13(-21)引物
DNA測序儀原理和方法
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括Sanger雙脫氧鏈終止法和Maxam-Gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今DNA序列分析的主流。美國PE ABI公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的
DNA測序儀原理和方法
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括Sanger雙脫氧鏈終止法和Maxam-Gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今DNA序列分析的主流。美國PE ABI公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最
DNA測序儀的操作步驟
pcr測序反應 (1) 取0.2ml的pcr管,用記號筆編號,將管插在顆粒冰中,按下表加試劑: 所加試劑 測定模板管 標準對照管 bigdye mix 1μl 1μl 待測的質粒dna 1μl - pgem-3zf (+) 雙鏈dna - 1μl 待測dna的正向引物 1μl -
DNA測序儀注意事項
1.abi prism 310基因分析儀是高檔精密儀器,需專人操作、管理和維護。2.本實驗測序pcr反應的總體積是5μl,而且未加礦物油覆蓋,所以pcr管蓋的密封性很重要,除加完試劑后蓋緊pcr管蓋外,最好選用pe公司的pcr管。如pcr結束后pcr液小于4~4.5μl,則此pcr反應可能失敗,不必
DNA測序儀的操作步驟
醋酸鈉/乙醇法純化pcr產物 (1) 將混合物離心,將擴增產物轉移到1.5ml ep管中。 (2) 加入25μl醋酸鈉/乙醇混合液,充分振蕩,置冰上10min以沉淀dna。12 000r/min于4℃離心30 min,小心棄上清。 (3) 加70%(v/v)的乙醇50μl洗滌沉淀2次。12
DNA測序
DNA測序(主要內容如下)·?????????Sequencing Gel Preparation·?????????Preparation of Templates?·?????????DNA Sequencing by the Dideoxy Method·?????????DNA Sequen
DNA測序
實驗方法原理 ABI ?PRISM 310型基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DN
DNA測序
? ? ? ? ? ? ? ? 自動測序法 雙脫氧鏈末端終止法 非同位素銀染 鳥槍法 Maxam-Gilbert化學修飾法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法