高效液相色譜法測定紅霉素眼膏的含量的探討
紅霉素眼膏系由紅霉素和眼膏基質加工制成的外用抗菌素，是目前臨床常用于沙眼、結膜炎、角膜炎、眼臉緣炎及眼外部感染。中國藥典2000年版采用抗生素微生物檢定法測定其含量，該方法周期長，操作繁瑣，影響因素較多。本文介紹的高效液相色譜法，采用優化的色譜條件，使紅霉素眼膏的含量測定操作簡便，專屬性高，重現性好，可以替代微生物檢定法。 1儀器與試藥 AgilentLC1100高效液相色譜儀，AgilentLC1100自動進器，AgilentLC1100紫外檢測器，依利特色譜柱（大連依利特科學儀器有限公司，填料：sinochromODS-BP5um；4.6mm×250mm），AgilentLC1100數據處理儀。 紅霉素對照品由中國藥品生物制品檢定所（批號：0307－9713）；紅霉素眼膏三批（批號041103、050202、050601），規格2g：0.5%；眼膏基質均由新鄉恒久遠藥業有限公司提供；乙腈為色譜純；磷酸二氫銨、三乙胺......閱讀全文
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵，色譜柱，進樣器，檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比，液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制，只要求把樣品制成溶液即可，非常適合于分離生物大分子、離子型化合物，不穩定的天然產物以
高效液相色譜原理
色譜法是一種分離技術，試樣混合物的分離過程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進行著的分配過程。 其中的一相固定不動，稱為固定相； 另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體（氣體或液體），稱為流動相。 當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，其與固定相發生相互作用。由于混合物中各組分在性質
高效反相液相色譜
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液
高效反相液相色譜
實驗方法原理反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反
高效液相色譜基線
高效液相色譜基線色譜基線也常被稱作背景噪音，是在無樣品組分通過色譜檢測器時，檢測器響應信號的隨機分布。基線噪音的大小直接影響色譜分析方法的檢測靈敏度以及對雜質的檢出能力，如純度測試以及痕量物質殘留檢測方法等。對于液相色譜而言，等度洗脫模式下，由于流動相的組成保持一致，其折光率不變，因而基線比較平坦，
反相高效液相色譜
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件 方案2 填充 RP-HPLC 毛細管微柱 方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗 方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗 方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合
高效液相色譜分類
按照分離原理分類，大概可以分為：1.吸附色譜：基于各組分對固定相的吸附能力不同而實現分離的方法。比較常見的色譜柱是火星硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于測定結構異構體。2.分配色譜：基于樣品在流動相和固定相之間溶解度不同的原理實現分離。比較常見的正相氰基柱（正相）和極為普遍的C18色譜柱（
高效液相色譜原理
高效液相色譜（HPLC）的原理：以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。高效液相色譜對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發性和熱穩定性的限制，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。高效液相色譜和氣
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
高效液相色譜與超高效液相色譜條件有什么差異
原理是一致的。不同的地方一個是儀器，一個是色譜柱。后者超高效液相色譜，可以縮短檢測時間，節省時間，節省流動相，大大地提高了效率。先說色譜柱，超高效液相色譜柱的粒徑會更小，柱子也更短。如果說樣品流過液相色譜柱的感覺是流過滿是石頭的管路，那么超高效液相色譜柱就是裝滿了沙子的管路。一般液相色譜柱的粒徑是5
高效液相色譜流動相選擇
流動相選擇1）由強到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或緩沖溶液）進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍規則：每減少10％的有機溶劑（甲醇或乙腈）的量，保留因子約增加３倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況
液相色譜的分類和高效液相色譜用途
制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：（1）低壓液相色譜；（2）中壓液相色譜；（3）高壓液相色譜；（4）快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊，沒有統一、明確的標準。 1、快速色譜 柱壓通常為2bar（或30psi）左右，對于那些容易分離的簡單混
色譜技術方法高效液相色譜
高效液相色譜 （HPLC）是目前應用最多的色譜分析方法，高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩；進樣系統要求進樣便利切換嚴密；由于液體流動相粘度遠遠高于氣體，
高效液相色譜的色譜柱
填料和流動相的組分應按各品種項下的規定，常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之，氰基或氨基鍵合硅膠也有使用；離子交換填料用于離子交換色譜；凝膠或玻璃微球等，用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外，柱溫為室溫，檢測器為紫外吸收檢測器。在用
高效液相色譜串聯質譜和高效液相色譜質譜法的區別
兩個的區別是質譜部分不同，串聯質譜的質譜部分是多級的，而后者是一級的。
高效液相色譜串聯質譜和高效液相色譜質譜法的區別
兩個的區別是質譜部分不同，串聯質譜的質譜部分是多級的，而后者是一級的。
分析型高效液相色譜和制備型高效液相色譜的區別
是的,兩者有關也沒關,制備液相一般是中藥用的,差別在于精密度和載樣量上,普通液相接上制備柱就是制備液相
高效液相色譜故障排除
注意：在對NH2改性的色譜柱進行再生時，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。 如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。 色譜柱的維護 1．使用預柱保護分析
高效液相色譜的維修
一、儀器的安裝對環境的要求１、 ?電源電壓２２０V：有條件的情況下，最好使用照明電，此電壓比較穩定,對儀器的性能穩定性較好，在沒有辦法的時候，必須要用動力線路供電時，就要采取相應的辦法克服或減少由于電機頻繁啟動，停止運行時對電網電壓波動的影響電機是感性負載，停止和啟動能產生很強的干擾尖脈沖電壓。
反相高效液相色譜3
方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗實驗材料大分子量非極性多肽或蛋白質儀器、耗材層析柱HPLC 系統冷凍干燥器微量離心機標準的或專用 HPLC 儀器氮氣實驗步驟一、用于 RP-HPLC 純化的大分子非極性多肽或蛋白質樣品的制備1.將多肽樣品（如果蛋白質是通過固相化學合成法得到的，質量在 30~5
高效液相色譜故障排除
注意：在對NH2改性的色譜柱進行再生時，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。 如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。 色譜柱的維護 1．使用預柱保護分析柱（
反相高效液相色譜1
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件實驗材料蛋白質標樣試劑、試劑盒乙睛（HPLC級）去離子水（HPLC級）三氟乙酸（TFA)儀器、耗材HPLC 色譜系統反相柱實驗步驟1.進行空白或對照層析譜分析（即在步驟①中不加樣）。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系
高效排阻液相色譜
實驗材料 nrhTNF 試劑、試劑盒 氯化鈉 PB 儀器、耗材
高效液相色譜如何工作
一個儲液瓶裝有溶劑[稱為流動相，因為溶劑是流動的]。一個高壓泵[溶劑傳輸系統或稱溶劑管理器]用來產生和計量流動相的流速，一般是毫升/分鐘。一個進樣器[樣品管理器或自動進樣器]可以將樣品導入[注射]連續的流動相，并由流動相攜帶樣品進入高效液相色譜柱。色譜柱裝有能獲得分離效果的填料。這種填料稱為固
高效液相色譜的應用
高效液相色譜儀是用來檢測分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物。HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點。因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀
高效液相色譜使用步驟
高效液相色譜儀操作步驟如下：1)． 過濾流動相，根據需要選擇不同的濾膜.2)． 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。3)． 打開hplc工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統。4)． 進入hplc控制界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。5)． 有一段時間沒用
反相高效液相色譜概述
結果與保留值之間的關系：利用RP-HPLC 分離多肽首先得確定不同結構的多肽在柱上的保留情況。為了獲得一系列的保留系數，Wilce 等利用多線性回歸方法對2106 種肽的保留性質與結構進行分析，得出了不同氨基酸組成對保留系數影響的關系，其中極性氨基酸殘基在2～20 氨基酸組成的肽中，可減少在柱上