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    常用的測定蛋白質含量方法的比較

    蛋白質定量是生物化學、食品檢驗和其它生命學科zui常涉及的分析內容,是臨床診斷的重要指標,也是許多生物制品、藥物、食品質量檢測的重要指標。生化實驗中,在對生化藥品,特別是蛋白質、酶、某些多肽或蛋白質激素的分離純化時,對蛋白質進行準確可靠的定量分析是非常重要的。 紫外分光光度法是根據蛋白質的物理性質來對蛋白質進行定量的;而凱氏定氮法、雙縮脲法、Lowry法、BCA法、膠體金法測試根據蛋白質的化學性質來實現對蛋白質進行定量的;根據蛋白質的染色性質的不同,又建立了考馬氏亮藍染色法和銀染法;此外還有人在這些蛋白質定量方法的基礎上建立了熒光法。 然而蛋白質的種類很多,結構不均一,分子量又相差很大,功能各異,這給建立一個理想而又通用的蛋白質定量分析的方法帶來了很......閱讀全文

    蛋白質轉印法檢定蛋白質

    蛋白質轉印法檢定蛋白質?????蛋白質經SDS-PAGE后,膠片浸入轉印緩沖液,蛋白質可被轉印到硝化纖維紙(nitrocellulose)?上,先經?素洗去SDS,并使蛋白質回?原態抗原性,可使用抗體進?免疫染色?(Towbin?et?al,?1979)。儀器用具:電泳轉印槽?(Hoefer?Tra

    蛋白質的蛋白質的提取技術

    選擇材料及預處理?  以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方

    蛋白質根據蛋白質結構進行分類

    纖維蛋白(fibrous protein):一類主要的不溶于水的蛋白質,通常都含有呈現相同二級結構的多肽鏈許多纖維蛋白結合緊密,并為單個細胞或整個生物體提供機械強度,起著保護或結構上的作用。球蛋白(globular protein):緊湊的,近似球形的,含有折疊緊密的多肽鏈的一類蛋白質,許多都溶于水

    用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗—蛋白質激酶C

    試劑、試劑盒PKC 分析緩沖液組蛋白 HI 儲存液磷脂酰絲氨酸甘油二油酸脂實驗步驟1. 在冰浴的離心管內配制如下 20 μl 反應混合物:5X PKC 分析緩沖液??????????????????????????????????????? 4 μl10 mg/ml 組蛋白 HI 儲存液 ?????

    用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析—凝膠蛋白質激酶分析

    試劑、試劑盒Tris-HClDTT鹽酸胍尿素激酶分析緩沖液儀器、耗材SDS-PAGE實驗步驟1. 準備下列材料:SDS-PAGE 要用到的所有試劑50 mmol/L Tris-HCl,室溫(pH 8.0),1 mmol/L DTT6 mol/L 鹽酸胍,50 mmol/L Tris-HCl,室溫(p

    完全蛋白質、不完全蛋白質及半完全蛋白質的概念

    完全蛋白質所含必需氨基酸種類齊全,數量充足,相互之問比例也適當,不但能夠維持成人的健康,也能夠促進人體的生長發育,如乳中的酪蛋白、蛋類中的卵白蛋白、大豆球蛋白、小麥中的麥符蛋白等。?半完全蛋白質所含各種必需氨基酸種類齊全,但各種氨基酸含量多少不勻,互相之間比例不合適。在膳食中作為唯一的蛋白質來源時,

    蛋白質分離實驗_分離未知 pI 蛋白質

    用 CE 進行 IEF分離是選擇隨后用于在非衍生毛細管柱上分離蛋白的緩沖液系統的有效的第一步。如果沒有檢測到蛋白質,可能是被吸收到柱的硅表面。在離子去垢劑如 SDS 存在的情況下重復分離過程,這樣就會用負電荷包被蛋白質從而阻止吸收。但是,這意味著蛋白質只能依據大小的不同而進行分離。知道蛋白質的 pI

    蛋白質分離和分析——凝膠蛋白質染色

    實驗步驟?基 本 方 案 1 考馬斯亮藍染色檢測范圍為〇.3?lMg 每蛋白質條帶。材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)聚丙烯酰胺凝膠(單 元 12. 3)考馬斯亮藍、銀染用固定液考馬斯亮藍染液甲醇/乙酸脫色液7 % (V /V ) 水乙酸Whatman 3M M 濾 紙(可選)干 膠 儀(可選

    蛋白質組和蛋白質組學分析

    ?隨著人類基因 組計劃研究成果的公布,人們對基因的認識逐漸清晰,但基因數量的有限性和基因結構的相對穩定性,與生命現象的復雜性和多樣性之間存在巨大反差。如何了解眾多的基因與危害人類身心健康的疾病之間的關系,對生命科學研究者來說仍是一項長期而艱巨的任務。因此,作為生命活動的直接承擔者――蛋白質,成為后基

    蛋白質純化

    是當代生物產業當中的核心技術。該技術難度、成本均高;例如一個生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質分離純化當中。常用技術有:1、沉淀,2、電泳:蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的,在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白質與小分

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