堿性磷酸酶的分離提取及比活力的測定
一、實驗原理 堿性磷酸酶（alkaline phosphatase EC 3.1.3.1簡稱為ALPase）廣泛存于微生物界和動物界。ALPase能催化幾乎所有的磷酸單酯的水解反應，產生無機磷酸和相應的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基團的轉移反應，磷酸基團從磷酸酯轉移到醇、酚或糖等磷酸受體上。在磷的生物和化學循環過程中，ALPase起了及其重要的作用。在生物體內ALPase與磷的代謝直接相關，參與磷與鈣物質的消化、吸收、分泌以及骨骼的形成等生理生化過程。ALPase的作用zui適PH在堿性區域，一般在PH9.0~10.5范圍內。Mg2+對該酶的活力有顯著的激活使用。 為了獲得好的提取效果，在酶的制備過程，特別應注意以下幾點： &nbs......閱讀全文
核酸提取分離方法
核酸提取分離方法核酸提取分為傳統方法和商業化試劑抽提。傳統的方法一般會采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀來提取核酸。商業化試劑盒方法提取核酸，比較經典的是采用離心柱法，將硅膠膜固定在離心管中，通過離心力或者負壓讓液體通過硅膠膜，核酸就留在膜上。在經過洗滌、洗脫的步驟得到核酸。商業化試劑盒的應用還能避免試劑污
mRNA提取、分離純化
從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工等一系列問題。總之
胰酶分離提取
一、原理與目的提取制備酶的經典方法，多采用硫酸銨分級沉淀，胰酶在75%飽和度硫酸銨中沉淀，其它雜蛋白一般在10%硫酸銨飽和度下被沉淀而除去。經此多次提取，最后在PH8.0硼酸緩沖液中得到結晶。胰酶在PH3.0時最穩定，可在低溫下儲存較長的時間而不失活；低與此PH酶易變性；高于PH5時，酶易自溶而失活
酵母RNA提取與分離
一、目的：學習稀堿法提RNA的原理與技術。二、原理：由于RNA的來源和種類很多，因而提取制備方法也各異，一般有苯酚法、去污劑法和鹽酸胍法。其中苯酚法又是實驗室最常用的。組織勻漿用苯酚處理并離心后，RNA即溶于上層被酚飽和的水相中，DNA和蛋白質則留在酚層中，向水層加入乙醇后，RNA即以白色絮狀沉淀析
核酸分離提取的原則
核酸分離提取的原則核酸包括DNA、RNA兩種分子，在細胞中都是以與蛋白質結合的狀態存在。真核生物的染色體DNA為雙鏈線性分子，原核生物的“染色體”、質粒及真核細胞器DNA為雙鏈環狀分子；有些嗜菌體DNA有時為單鏈環狀分子，RNA分子在大多數生物體內均是單鏈線性分子，不同類型的RNA分子可以具有不同的
核酸分離提取的原則
核酸分離提取的原則核酸包括DNA、RNA兩種分子，在細胞中都是以與蛋白質結合的狀態存在。真核生物的染色體DNA為雙鏈線性分子，原核生物的“染色體”、質粒及真核細胞器DNA為雙鏈環狀分子；有些嗜菌體DNA有時為單鏈環狀分子，RNA分子在大多數生物體內均是單鏈線性分子，不同類型的RNA分子可以具有不同的
單萜的 提取分離方法
環烯醚萜苷的提取，一般采用溶劑法，提取時常在植物材料中拌入碳酸鈣或氫氧化鋇以抑制酶的活性和中和植物酸，常用水、甲醇、乙醇、稀丙酮溶液、正丁醇、乙酸乙酯等作為提取溶劑。可采用冷滲液法和熱回流提取法。在同一植物中，往往含有多種結構相似的環烯醚萜苷，欲進一步分離單一成分，可采用硅膠、氧化鋁等制備性薄層或柱
卵清蛋白分離提取
一、實驗目的與原理雞卵粘蛋白存在于雞蛋清中，對胰蛋白酶有強烈的抑制作用，高純度的雞卵粘蛋白抑制胰蛋白酶的分子酶的分子比為1:1。雞卵粘蛋白在中性或酸性溶液中對熱和高濃度的脲都是相當穩定的，而在堿性溶液中較不穩定。由于雞卵粘蛋白對胰蛋白酶有強烈的抑制作用，因此可以用雞卵粘蛋白做親和配基配制純化胰酶的親
葉綠體色素的提取與分離
一、原理葉綠體中含有綠色素（包括葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（包括胡蘿卜素和葉黃素）兩大類。它們與類囊體膜蛋白相結合成為色素蛋白復合體。它們的化學結構不同，所以它們的物化性質（如極性、吸收光譜）和在光合作用中的地位和作用也不一樣。這兩類色素是酯類化合物，都不溶于水，而溶于有機溶劑，故可用乙醇、丙醇等
酶的提取和分離純化
(一)細胞破碎處理 許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶，首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多，主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指