高地辛標記的DNA探針制備實驗——基本方法
實驗材料DNA試劑、試劑盒dTTPdUTPEDTASDS儀器、耗材水浴鍋培養箱實驗步驟1. 建立一個標準100 μl 反應體系，用10 μl，10×地高辛·11-dUTP/dTTP貯液，DNA酶Ⅰ酶量不變，15℃溫育2 h。2. 取小份在微型膠中進行電泳以檢測探針大小。3. 繼續反應直到獲得大小合適的DNA探針。 4. 加入2 μl 0.5mol/l EDTA和1 μl 10%SDS，68℃加熱10 min 以終止反應。5. 用G-50離心柱分離探針。 6. 用比色法或化學發光法測定地高辛標記的探針。7. 用堿性磷酸酶偶聯的抗地高辛抗體代替鏈親和素-堿性磷酸酶交聯物。8. 利用地高辛標記的標唯DNA或是標好的地高辛探針作為對照檢測地高辛摻入效率。......閱讀全文
制備電泳實驗
實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的，它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品通過某種電泳方法進一步分離純化后，再用擴散洗脫或電泳洗脫收集純樣品，繼而用作其他分析的需要。實驗材料 凝膠切片儀器、耗材 解剖刀勻漿器實驗步驟 1. 擴散洗脫擴散洗脫是用解剖刀或勻漿器將凝膠切片搗
制備克隆實驗
試劑、試劑盒ATP-巰基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶連接緩沖液T4DNA 連接酶平末端插入物克隆載體培養基儀器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯試管37°C 恒溫箱水浴箱實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ATP(10 mmol/L)β-巰基乙醇（可選擇）IPTG(100 mmol/L
制備克隆實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 ATP -巰基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 連接緩沖液 T4DNA 連接酶 平末
血清制備實驗
血清制備實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 血 儀器、耗材
制備電泳實驗
洗脫 連續電泳 等電聚焦制備電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的，它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品
血清制備實驗
抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。實驗材料血儀器、耗材低溫離心機4℃冰箱試管–80℃低溫儲藏箱實驗步驟1. 取血后，37℃下，讓血液凝固1 到2 小時（不加抗凝劑）；2. 4℃冰箱過夜（讓
制備克隆實驗
試劑、試劑盒?ATP-巰基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶連接緩沖液T4DNA 連接酶平末端插入物克隆載體培養基儀器、耗材?FALCON 2059 多聚丙烯試管37°C 恒溫箱 水浴箱實驗步驟?一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ATP(10 mmol/L)β-巰基乙醇（可選擇）IPTG(100 mm
血清制備實驗
實驗材料 血儀器、耗材 低溫離心機4℃冰箱試管–80℃低溫儲藏箱實驗步驟 1. 取血后，37℃下，讓血液凝固1 到2 小時（不加抗凝劑）；2. 4℃冰箱過夜（讓血塊固縮）；3. 當血清自然析出后， 4℃，3000 轉/分，離心10 分鐘，分離血清，棄去不溶物；4. 將血清移至一干凈試管，并分裝成小份
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備 核糖體及多核糖體的分離 70S核糖體的純化 多核糖體的純化 將核糖體解離為大亞基和小亞基 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
細菌細胞的制備實驗實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 弗氏破碎緩沖液勻漿緩沖液儀器、耗材 弗氏破碎器實驗步驟 1. 將 5~10 g 新鮮或凍存的細胞沉淀物垂懸于弗氏破碎緩沖液中或者適當的勻漿緩沖液中。通常 4L 的大腸桿菌培養物可以獲得大約 7.5 g 的細胞沉淀。2. 懸液中加入無 RNase 的 DNase 至終濃度為
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備核糖體及多核糖體的分離70S核糖體的純化多核糖體的純化將核糖體解離為大亞基和小亞基實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒弗氏破碎緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
橋粒的制備實驗
從牛舌或牛口鼻部分離橋粒 分級分離橋粒 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 牛口鼻部或舌頭
橋粒的制備實驗
從牛舌或牛口鼻部分離橋粒分級分離橋粒實驗材料牛口鼻部或舌頭 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒檸檬酸緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
細菌RNA制備實驗
革蘭氏陰性細菌中提取 革蘭氏陽性細菌中提取 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試
散劑的制備實驗
示例法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 碳酸氫鈉 氧化鎂 試劑、試劑盒
制備電泳實驗——洗脫
蛋白質的分離純化是研究其結構、特性和功能的基礎，諸如一級結構、溶液構象、晶體結構、免疫功能和生物機理等研究都必須用一定量并具有活性的純樣品作為研究材料。本實驗來源「蛋白質電泳實驗技術」主編：郭堯君。實驗方法原理嚴格來說洗脫不能達到制備的目的，它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品
細菌RNA制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 STET氯仿乙酸鈉氯化銫無水乙醇EDTA儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?培養100 ml 大腸桿菌或500 ml 藍細菌至對數生長期，加入1/20體積終止緩沖液，置于冰上。2. ?于4℃用JA-10轉子17 700 g 離心5 min 收集細胞。3.
血平板制備實驗
實驗方法原理 肉湯瓊脂中加羊血或兔血均可。用血量為5-7%。在血平板上除了可以觀察菌落的形態外，還可判斷溶血情況，菌落周圍的培養基內紅細胞完全破壞為β-溶血。菌落周圍成綠色為α-溶血。溶血情況可以顯微鏡下用低倍鏡觀察。實驗步驟 成分：牛肉浸出液： ? ? ? ? ?1000 ml蛋白胨： ? ? ?
血平板制備實驗
實驗方法原理肉湯瓊脂中加羊血或兔血均可。用血量為5-7%。在血平板上除了可以觀察菌落的形態外，還可判斷溶血情況，菌落周圍的培養基內紅細胞完全破壞為β-溶血。菌落周圍成綠色為α-溶血。溶血情況可以顯微鏡下用低倍鏡觀察。實驗步驟成分：牛肉浸出液：????????? 1000 ml蛋白胨：????????
巧克力平板制備實驗
實驗方法原理 巧克力平板應用羊血或免血制備。因其中含有Ⅹ和Ⅴ因子，嗜血桿菌、奈瑟氏菌等生長良好，凡疑有這些菌種存在的標本，均須接種巧克力平板。血液標本培養，增苗后有細苗生長，若移種巧克力平板上，有利于分離到更多的細菌。實驗步驟 成分：牛肉浸出液： ? ? ? ? ? ? ?1000 ml蛋白胨： ?
巧克力平板制備實驗
實驗方法原理主要是蛋白胨和牛肉粉用來提供細菌生長所需的碳源、氮源、氨基酸以及維生素。氯化鈉維持培養基中的滲透壓，瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血提供氯化血紅素和輔酶I，為嗜血桿菌屬的生長提供特殊營養。巧克力平板培養基還能夠培養其他細菌，主要的原因是血液中有V、X因子，這兩種因子是位于紅細胞中的，一般細菌不
制備電泳實驗——等電聚焦制備電泳
實驗方法原理等電聚焦制備電泳是一種非變性制備技術。由于等電聚焦電泳技術的特點，因而是一種理想的制備方法。試劑、試劑盒電極液兩性電解質Ultrodex實驗步驟一、液體介質垂直柱狀蔗糖密度梯度等電聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制備和分析目的的等電聚焦方法。載體兩性電解質在蔗糖密度梯度柱中形成 pH
細菌細胞的制備實驗實驗——細胞抽提物的制備
實驗材料細胞試劑、試劑盒弗氏破碎緩沖液勻漿緩沖液儀器、耗材弗氏破碎器實驗步驟1. 將 5~10 g 新鮮或凍存的細胞沉淀物垂懸于弗氏破碎緩沖液中或者適當的勻漿緩沖液中。通常 4L 的大腸桿菌培養物可以獲得大約 7.5 g 的細胞沉淀。2. 懸液中加入無 RNase 的 DNase 至終濃度為 2 μ
實驗動物組織標本的制備實驗
實驗材料 家兔豚鼠白鼠試劑、試劑盒 營養液儀器、耗材 注射器線浴槽實驗步驟 通常選用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等動物，禁食24 小時。擊頭致昏，以避免麻醉或失血對胃腸道機能的影響。立即打開腹腔，取出所需的胃、腸、膽囊等。去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速放入充氧（或95%O2+5%CO2
單克隆抗體上清制備實驗——大量制備
實驗材料目的雜交瘤試劑、試劑盒完全 DMEM-10 培養液（含 5～10 mmol／L HEPES pH 7.2～7.4）儀器、耗材250 ml 無菌錐形離心管轉瓶培養裝置850 cm2 旋轉培養瓶175 cm2 組織培養瓶實驗步驟1. 重復基本方案 1 步驟 1，并按 1:10 分傳到終體積為 1
轉基因小鼠制備實驗
轉基因小鼠制備實驗可應用于：（1）動物發育研究；（2）研究細胞功能調控機制。實驗方法原理遺傳的基本物質是DNA，基因是位于染色體上有遺傳效應的DNA片段，對于儲存在生物全套染色體中的全部遺傳信息，可稱其為基因組。不同種類、不同個體的生物基因組成是不同的，對動物個體來說，非自身的基因成分屬于外源基因，
轉基因小鼠制備實驗
實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 HCGPMSG透明質酸酶戊巴比妥鈉儀器、耗材 顯微鏡鑷子持卵針注射針實驗步驟 1. ?選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。?2. ?47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合
反義RNA的制備實驗
實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽酸亞精胺NaCl胎盤RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC儀器、耗材 DNA合成儀瓊脂糖凝膠電泳微量離心管實驗步驟 一、化學合成的 RN
植物RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 TELiCl無水乙醇乙酸鈉氯仿儀器、耗材 勻漿器離心管離心機水浴鍋實驗步驟 1. ?研缽和研棒先用液氮冷卻，稱出15 g 凍結植物組織于研缽中（加液氮保持凍結）。2. ?用研棒磨成粉末，立即轉移到一個盛有150 ml，研磨緩沖液和50 ml TLE緩沖液平衡酚的500
poly（A）+－RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 NaOH寡聚脫氧胸苷纖維素poly（A）樣品緩沖液LiClEDTATE乙酸鈉儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的層析柱，然后用水沖洗。2. ?取0.5 g oligo（dT）纖維素干粉加1 ml 0.1 m