痘苗載體轉染細胞實驗——DOTAP法
實驗方法原理將感興趣的外源基因亞克隆到質粒轉移載體上，外源基因的兩端為痘苗病毒基因組非必需基因片段。隨后，將重組質粒轉染病毒感染的細胞，痘苗病毒基因組與質粒上同源的部分發生同源重組。應用適當的篩選方案，經幾輪噬斑純化，從細胞裂解物中獲得重組病毒。實驗材料pSCll／pRB21／pSC65／pLW9 ／其他合適載體CV-1／BS-C-1／ BHK-21 ／CEF 細胞痘苗病毒儲液試劑、試劑盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培養基轉染緩沖液干冰／乙醇胰酶HEPESDOTAP 脂質體轉染試劑OptiMEM 培養基儀器、耗材25 cm2 組織培養瓶聚苯乙稀管刮刀／橡皮細胞刮刀15 ml 無菌錐形離心管Sorvall 離心機實驗步驟1. 將目的基因亞克隆到 pSC11、pRB21、pSC65、pLW9 或其他合適載體的多克隆位點（MCS）上，分離質粒。2. 將 1 × 106 的 CV-1、BS-C-1，BHK-21 或......閱讀全文
痘苗載體轉染細胞實驗——DOTAP－法
實驗方法原理將感興趣的外源基因亞克隆到質粒轉移載體上，外源基因的兩端為痘苗病毒基因組非必需基因片段。隨后，將重組質粒轉染病毒感染的細胞，痘苗病毒基因組與質粒上同源的部分發生同源重組。應用適當的篩選方案，經幾輪噬斑純化，從細胞裂解物中獲得重組病毒。實驗材料pSCll／pRB21／pSC65／pLW9
脂質體制備中使用最多的磷脂輔料陽離子脂質材料DOTAP
說起DOTAP，這是一款帶正電荷的陽離子脂質材料，陽離子脂質體作為如今最火熱的研究方向之一，如何選擇制備材料是我們需要了解的首要部分。本期AVT小編要介紹的即是在陽離子脂質體制備中使用最多的DOTAP，制備脂質體不可或缺。?根據包載的API不同，可將陽離子脂質體分為兩大類，一類是包載以mRNA、si
脂質體載體用于直接體內基因轉染實驗
試劑、試劑盒 氯仿 DC-Chol 儲存液DOPEDOTAP膽固醇儲存液葡萄糖儀器、耗材 透紫外燈玻璃離心管氮氣桶真空干燥器水浴超聲破碎儀水浴鍋擠壓機聚碳酸酯膜濾器實驗步驟 1.用氯仿將 30.0ml 的透紫外燈玻璃管漂洗 3 次。2.混勻用于準備脂質體的在透紫外燈玻璃管中的適當的脂質。（1）對于
脂質體載體用于直接體內基因轉染實驗
試劑、試劑盒氯仿DC-Chol 儲存液DOPEDOTAP膽固醇儲存液葡萄糖儀器、耗材透紫外燈玻璃離心管氮氣桶真空干燥器水浴超聲破碎儀水浴鍋擠壓機聚碳酸酯膜濾器實驗步驟1.用氯仿將 30.0ml 的透紫外燈玻璃管漂洗 3 次。2.混勻用于準備脂質體的在透紫外燈玻璃管中的適當的脂質。（1）對于 DC-C
痘苗載體轉染細胞實驗
CaCl2 法 DOTAP 法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將感興趣的外源基因亞克隆到質粒轉移載體上，外源基因的兩端為痘苗病毒基因組非必需基因片段。隨后，將重組質
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry兩者都是生物檢驗的化學試劑。 bradford法，也稱考馬斯藍染色法（coomassie blue staining）。考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色，當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色，前者最大光吸收在
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry兩者都是生物檢驗的化學試劑。 bradford法，也稱考馬斯藍染色法（coomassie blue staining）。考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色，當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色，前者最大光吸收在
沉淀法、過濾法、蒸餾法的區別
一沉淀法：固液分離。有時為了加速沉淀，可以加入一些凝聚劑，如明礬、活性炭等。二過濾法：固液分離。但是固體必須是不溶于水的才行。三蒸餾法：液液分離。利用沸點不同，沸點低的先蒸餾出來，沸點高的后蒸餾出來。
Folin—酚試劑法（Lowry法）
實驗概要本文介紹了Folin—酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法，由于其試劑乙的配制較為困難，近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Fol
內標法與外標法
一、內標法 什么叫內標法?怎樣選擇內標物? 內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。 內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被
外標法與內標法
? 一、內標法 什么叫內標法？怎樣選擇內標物？ 內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。 內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質
氣相法液相法固相法優缺點
氣相法液相法固相法優點：分離效率高，分析速度快，樣品用量少和檢測靈敏度高。選擇性好，可分離、分析恒沸混合物，沸點相近的物質，某些同位素，順式與反式異構體鄰、間、對位異構體，旋光異構體等。氣相法液相法固相法缺點：分析成本高，液相色譜儀價格及日常維護費用貴，分析時間一般比氣相長。檢測器氣相色譜法中可以使
可見異物檢查法第一法(燈檢法)
取規定量供試品,除去容器標簽,擦凈容器外壁,必要時將藥液轉移至潔凈透明的適宜容器內,將供試品置遮光板邊緣處,在明視距離(指供試品至人眼的清晰觀測距離,通常為25cm),手持容器頸部,輕輕旋轉和翻轉容器(但應避免產生氣泡),使藥液中可能存在的可見異物懸浮,分別在黑色和白色背景下目視檢查,重復觀察,總檢
峰面積歸一法、內標法、外標法區別
色譜定量分析方法可以分為外標法、內標法、歸一化法三大類。當能夠精確進樣量的時候，通常采用外標法進行定量。這種方法標準物質單獨進樣分析，從而確定待測組分的校正因子；實際樣品進樣分析后依據此校正因子對待測組分色譜峰進行計算得出含量。其特點是標準物質和未知樣品分開進樣，雖然看上去是二次進樣，但實際上未知樣
各顯神通！淺談歸一化法、內標法、外標法及標準加入法
面積歸一法、內標法、外標法、標準加入法。這么多定量法，用哪一種呢？每一種的適用范圍是什么呢？其優缺點又是什么？其標準物又有什么要求呢？看完你就都知道了。 1、歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法，稱為歸一化法，各成分校正因子一致時可用該法。 歸一化法的優點： 該法簡便
Nature－Nanotech.：納米顆粒出奇招，撩了抗原殺腫瘤
近年來，免疫治療已經成為了最有效的癌癥治療方法之一，例如基于抗體的免疫檢驗點抑制劑（如CTLA-4抑制劑、PD-1抑制劑等）已經能夠顯著提高部分癌癥病人的生存期（如黑色素瘤、非小細胞肺癌等）。但是，目前免疫療法也存在著響應率低、療效持續時間不長等缺點。臨床研究表明將免疫療法與放療結合可以提高抗癌
SPOS技術激光粒度儀在脂質體檢測方面的應用
摘要:磷脂脂質體是由磷脂制成的球形顆粒，用于制藥和化妝品工業。脂質體的大小和表面電荷是兩項重要特征需要檢測和監控。動態光散射(DLS)是用于測量亞微米脂質體的大小最常見的分析技術，而單顆粒光學傳感（SPOS）技術用來測量大于1um的脂質體，不僅可以檢測脂質體的大小還可以進行顆粒計數。美國PSS粒度儀
淺談歸一化法、內標法、外標法及標準加入法區別很重要！
1.歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法，稱為歸一化法。 各成分校正因子一致時可用該法，該法簡便、準確，特別是進樣量不容易準確控制時，進樣濃度及進樣量的變化的影響很小。 其他操作條件，如流速、柱溫等變化對定量結果的影響也很小。GC應用廣于HPLC。
消化道接種法、鼻腔接種法及角膜接種法
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒病毒試劑儀器、耗材注射器實驗步驟消化道接種。在分離腹瀉病毒或經由消化道病毒感染的研究中，可采用灌胃接種法將所接種的臨床標本或病毒用灌胃器灌到動物胃內。抓取固定小鼠，用灌胃器吸取接種物，將灌胃針從鼠的口腔插入，使口腔與食道成一條直線，再將灌胃針沿咽后壁慢慢插入食道，可感到輕
動態色譜法和靜態法
動態色譜法是將待測粉體樣品裝在U型的樣品管內，使含有一定比例吸附質的混合氣體流過樣品，根據吸附前后氣體濃度變化來確定被測樣品對吸附質分子準確度差、對設備要求很高等缺陷已很少使用。另一種可行的方法是采用CO2作吸附質在室溫進行吸附，可以無需分子渦輪泵級的真空度。可以很方便的得到比表面積、微孔孔徑、微孔
氣相色譜法—內標法
1）什么叫內標法?內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。2）怎樣選擇內標物?內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被色譜拄所分
氣相色譜法—內標法
什么叫內標法?怎樣選擇內標物?內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被色譜拄所分離，又不
藥物鑒別法呈色反應鑒別法
呈色反應鑒別法是指供試品溶液中加入適當的試劑溶液,在一定條件下進行反應,生成易于觀測的有色產物。在鑒別試驗中最為常用的呈色反應類型有以下幾個。(1)三氯化鐵呈色反應:應用于含有酚羥基或水解后產生酚羥基的藥物,如水楊酸及其鹽。(2)異羥肟酸鐵反應:應用于含有芳酸、芳酸酯或酰胺的藥物,如β-內酰胺類。(
藥物鑒別法薄層色譜鑒別法
薄層色譜鑒別法薄層色譜法鑒別原理為同一種藥物在同樣條件下的薄層色行為相同。一般采用對照品(或標準品)比較法,將供試品和對照品(或標準品)按藥典規定,用同種溶劑配成同樣濃度的溶液。在同一層板上點樣、展開、顯色,要求供試品斑點應與對照品(或標準品)斑點的位置(Rf)和顏色一致。薄層色譜法簡單易行,適用于
足跡法
High Resolution Genetic Footprinting?(Stanford)Genetic footprinting is a technique for high-resolution mapping of the functional organization of a clo
圓環法
測量方法：圓環法?（GB/T6541-86）;?????測量范圍：5～200mN/m?????運動速度：快速：1mm/S???????????????慢速：0.3――0.4mm/S?????靈敏閥：0.1mN/m?????適用溫度：10--30℃?????適應溫度：≤80%?????電源：交流220
ELISA法
ELISA法是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上，因而，具有特異性。由于測定中需要酶標記抗原或抗體，酶分子與抗原或抗體分子的結合物可以催化底物分子發生反應，產生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。常用的ELISA分析1)?? 測定抗原A??將抗體吸附于固相表面，這個過程叫包被。B
電容法
涂層測厚儀的無損檢測方法與原理：涂層測厚儀在現實測量中是一門理論上綜合性較強，又非常重視實踐環節的很有發展前途的學科。它涉及到材料的物理性質，產品設計，制造工藝，斷裂力學以及有限元計算等諸多方面。 在化工，電子，電力，金屬等行業中，為了實現對各類材料的保護或裝飾作用，通常采用噴涂有色金屬覆蓋以及磷
重量法
一、定義 ????根據單質或化合物的重量，計算出在供試品中的含量的定量方法稱為重量法 二、原理 ????采用不同方法分離出供試品中的被測成分，稱取重量，以計算其含量。按分離方法不同，重量分析分為沉淀重量法、揮發重量法和提取重量法。 三、沉淀重量法 （一）原理 ????被測成分與試劑作用，生成組成固定
色譜定量分析歸一化法、內標法、外標法及標準加入法比較
歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法，稱為歸一化法。 各成分校正因子一致時可用該法，該法簡便、準確，特別是進樣量不容易準確控制時，進樣濃度及進樣量的變化的影響很小。 其他操作條件，如流速、柱溫等變化對定量結果的影響也很小。GC應用廣于HPLC。 外標法（標準曲線法、直