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    高GC含量片段的PCR擴增實驗

    試劑、試劑盒甜菜堿dNTP 溶液二甲基亞砜四甲基砜Taq 酶和酶緩沖引物儀器、耗材PCR 儀實驗步驟一、材料1. 試劑甜菜堿(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四種 dNTP, 每種 25 mmol/L)二甲基亞砜(DMSO)(Sigma 公司)四甲基砜(Sigma 公司)2. 酶和酶緩沖液Taq 酶Taq 酶緩沖液(Taq 酶制造商提供)3. 核酸和寡核苷酸人類基因組 DNA,每個反應中 20ng,hRF3(hGSPTl) 引物:hRF3f CCGC/CTCT/GTCG/TCGT/CGC &nbs......閱讀全文

    多重 PCR 擴增實驗

    多重PCR擴增實驗可以用于:(1)在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是用一滴血就可檢測多種病原體;(2)多重PCR很適宜于成組病原體的檢測,如肝炎病毒,腸道致病性細菌,性病,無芽胞厭氧菌,戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢;(3)多種病原體在同一反應管內

    多重 PCR 擴增實驗

    試劑、試劑盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 酶和酶緩沖液Taq 聚合酶許多 Taq 聚合酶都可以用;作者發現 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以滿足大多數需要. 如果需要提高PCR 產物的特異性,應該使用熱啟動聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附帶的

    多重 PCR 擴增實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 多重PCR(multiplex PCR),其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同。一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定。重PCR的特點有:①高效性在同一PCR反應管內同時

    PCR基因擴增實驗

    [實驗目的]通過本實驗學習PCR反應的基本原理與實驗技術。[實驗原理]多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)的原理類似于DNA的天然復制過程。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物,經變性、退火和延伸若干個循環后,DNA擴增2n倍。1.變性:加

    PCR基因擴增儀實驗原理

    技術應用實現快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體,在以16位單片機為核心的電控裝置管理下,能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測,避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現標準樣本的PCR熱循環擴增及高通量實

    差異 DNA 的 PCR 擴增實驗

    實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液(包含所有 4 種 dNTP,各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液,10X聚合酶混合液,50X(Advantage2,Clontech,或相當產品)3. 核酸和寡核苷

    差異 DNA 的 PCR 擴增實驗

    在本方案所描述的反應中,差異 DNA 被選擇性地擴增。每個實驗至少應該有 4 個反應:①已消減的檢測 DNA;②未消減的檢測者對照(1-c);③反向消減的檢測 DNA;④反向未消減的對照(2-c)。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑

    差異 DNA 的 PCR 擴增實驗

    實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液(包含所有 4 種 dNTP,各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液,10X聚合酶混合液,50X(Advantage2,Clontech,或相當產品)3. 核酸和寡核苷酸DNA 樣品(即方案 2 第 16 步中的各消減樣品

    實驗分析方法-PCR擴增產物

    孔板夾心雜交法:  該法是通過一固定于微孔板的捕獲探針與PCR產物的某一區域特 異雜交使產物的間接地固定于微孔板上,然后,再用一生物素 等非放射性標記物標記的檢測探針與產物的另一特異性較一次 雜交,漂洗后顯色即可判斷結果。該法需要兩個雜交過程來檢測 一個產物,因此,其特異性較一次雜交的檢測法高。該法

    PCR擴增過程

    ①首先是將含有待擴增DNA樣品的反應混合物放置在高溫(>91℃)環境下加熱1分鐘,使雙鏈DNA變性,形成單鏈模板DNA;②降低反應溫度(約50℃),致冷1分鐘,使寡核苷酸引物與兩條單鏈模板DNA發生退火作用并結合在靶DNA區段兩端的互補序列位置上;③將反應混合物的溫度上升到72左右保溫1-數分鐘,在

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