核酸親和層析實驗材料樣品蛋白質試劑、試劑盒平衡緩沖液(Tris-HClKClEDTA)非特異 DNA實驗步驟在上樣品液到核酸親和柱之前,建議首先采用其他的純化方法,如硫酸銨沉淀、離子交換或凝膠過濾層析等富集目的蛋白。這樣可以除去絕大多數的污染物,并減少非特異結合。親和層析柱一般來講是短而粗的,例如長寬比為 2:1。1. 10 倍柱體積的平衡緩沖液(20 mmol/L,pH 8.0 Tris-HCl,0.15 mol/L KCl,1 mol/L EDTA)平衡柱;2. 調整樣品液到相似的離子濃度(即 0.15 mol/L KCl);3. 加非特異 DNA 到樣品液內,每 ug 純蛋白質加 100 ng。混勻后在冰上孵育 10 min。非特異 DNA 長度通常是 1 kb 左右,可以是 poly(dI-dC)或 poly(dA-dT),也可以是超聲破碎的大腸桿菌、牛胸腺或鮭魚精 DNA。為了除去孵育后可能形成的復合物,需 10 00......閱讀全文
可利用合成雙鏈寡核苷酸篩選構建于λ噬菌體的 cDNA 表達文庫,以鑒定與特異 DNA 結合蛋白質相對應的克隆(Singhetal.1988,Vinsonetal.1988)。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒ATP結合緩沖液變性溶
試劑、試劑盒 ATP 結合緩沖液 變性溶液 二硫蘇糖醇 EDTA 乙醇激酶 連接酶
實驗材料 宿主細胞 質粒或λ噬菌體表達載體 包裝提取物 電轉化感受態大腸桿菌
類似方案 1、方案 2 描述了在真核表達載體上進行 cDNA 文庫構建與篩選的方法, 流程分為以下兩個階段:1. 在真核表達載體上構建 cDNA 文庫;2. 在真核表達載體上構建的 cDNA 文庫的篩選。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)上冊,作者:黃培堂。實驗材料宿主細胞質粒或λ噬菌體表達載體
分析測試百科網訊 2017年8月24日,第三屆全國樣品制備學術報告會在昆明召開(相關報道:第三屆全國樣品制備會在春城開幕 樣品處理再現新技術)。軍事醫學衛生學環境醫學研究所研究員高志賢、東北大學理學院化學系分析科學研究中心教授王建華和中國農業科學院農業質量標準于檢測技術研究所研究員王靜、武漢大學
一.原理RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是
SV總RNA試劑盒提取法 Trizol試劑提取法 實驗方法原理 SV Total RN
動物RNA提取可用于:(1)研究生物體基因調控機制;(2)分子克隆和基因表達以獲得該性狀基因;(3)可以對特定的基因表達進行定量的檢測,從分子水平精確的了解細胞生命活動的規律。實驗方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養
一.原理RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是至關重要的,
現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。 一、GST pull-down實驗 GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗