反相高效液相色譜5
方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合物進行脫鹽實驗實驗材料蛋白質或多肽樣品試劑、試劑盒乙腈（HPLC級）2 -丙醇硝酸鈉硫脲三氟乙酸儀器、耗材分析型 HPLC 裝置色譜柱洗脫液瓶Hamilton 玻璃注射器氮氣量筒微量離心機流動相過濾裝置實驗步驟一、流動相的配制1.配制緩沖液 A(弱流動相）和緩沖液 B(強流動相）各 1L，例如：緩沖液 A:0.1%TFA 水溶液。緩沖液 B:0.09%TFA 的 2-丙醇溶液。要點：用于蛋白質測序的 TFA，因其含有抗氧化劑而不適用于 RPHPLC 樣品的洗脫。2.在備好的量筒中用 Teflon 包被的磁轉子將溶液攪拌均勻（時間視體積而定）。3.用 0.2ul PTFE 過濾器過濾緩沖液 A 和 B。4.將洗脫液瓶用塞子封閉，以防止有機溶劑揮發。二、多肽和蛋白質樣品的制備1.檢查樣品的純度。2.如果存在不溶的蛋白、固體顆粒，則要用 0.2ul PTFE 濾膜過濾，或者離心樣品后取......閱讀全文
反相高效液相色譜柱可在任意pH值均可實現高效分離
在建立方法時，改變流動相的pH值是一個非常有效的工具，尤其在分離一些中性胺類化合物或者在堿性條件下分離其他的有機堿類化合物。?盡管近年來有宣稱硅膠基C18色譜柱在堿性pH條件下能夠穩定工作，但是所有的硅膠基C18色譜柱在pH>6是測量性能均有所下降，相比在理想條件下使用，色譜柱的使用壽命也顯著縮短。
高效液相反相色譜具有什么原理
在反相鍵合相色譜法中使用的是非極性鍵合固定相。它是將全多孔(或薄殼)微粒硅膠載體,經酸活化處理后與含輕基鏈(c4、C8、C18)或苯基的硅烷化試劑反應,生成表面具有烷基或苯基的非極性固定相。如共價結合到載體上的直鏈碳氫化合物正辛基等。關于反相色譜的分離機理,吸附色譜的作用機制認為溶質在固定相上的保留
反相高效液相層析的基本概念
中文名稱反相高效液相層析英文名稱reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定 義固定相顆粒表面為非極性材料(如含C18鏈),流動相為極性的一種高效層析。通過這類反相層析柱的分子按其極性大小移動，極性越大移動越快。應用學
反相高效液相層析的概念和應用
中文名稱反相高效液相層析英文名稱reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定 義固定相顆粒表面為非極性材料(如含C18鏈),流動相為極性的一種高效層析。通過這類反相層析柱的分子按其極性大小移動，極性越大移動越快。應用學
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多，加之樣品基質復雜，色譜柱極易被污染，是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一，通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物，堵在柱頭篩板上，極易導致柱壓高；上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題，一般有0.22和0.45um規格，根據您的需要選擇合
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多，加之樣品基質復雜，色譜柱極易被污染，是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一，通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物，堵在柱頭篩板上，極易導致柱壓高；上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題，一般有0.22和0.45um規格，根據您的需要選擇合
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多，加之樣品基質復雜，色譜柱極易被污染，是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一，通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物，堵在柱頭篩板上，極易導致柱壓高；上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題，一般有0.22和0.45um規格，根據您的需要選擇合
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多，加之樣品基質復雜，色譜柱極易被污染，是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一，通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物，堵在柱頭篩板上，極易導致柱壓高；上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題，一般有0.22和0.45um規格，根據您的需要選擇合
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。（1）硅膠基質填料：1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團（NH2，APS）和氰基團（CN，C
高效液相色譜分類
按照分離原理分類，大概可以分為：1.吸附色譜：基于各組分對固定相的吸附能力不同而實現分離的方法。比較常見的色譜柱是火星硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于測定結構異構體。2.分配色譜：基于樣品在流動相和固定相之間溶解度不同的原理實現分離。比較常見的正相氰基柱（正相）和極為普遍的C18色譜柱（
高效液相色譜原理
色譜法是一種分離技術，試樣混合物的分離過程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進行著的分配過程。 其中的一相固定不動，稱為固定相； 另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體（氣體或液體），稱為流動相。 當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，其與固定相發生相互作用。由于混合物中各組分在性質
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱?現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。?（1）硅膠基質填料：?1、正相色譜?正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團（NH2，APS）和氰基團（
高效液相色譜技術
高效液相色譜（HPLC：High Performance Liquid Chromatography ）是化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術，是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。國際市場
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀，具有常規HPLC的基本性能，并擴展了更多智能化的功能，能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求，使用戶能更加輕松的使用，并獲得準確的分析數據。一、原理：高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論，色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
高效液相色譜原理
采用高效液相色譜（HPLC）法分離單糖和寡糖，較多采用氨基柱，乙腈和水作為流動相，此法具有完全分離麥汁、發酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和麥芽三糖的優點。本文采用Hypersil NH2柱分析麥汁、發酵液和啤酒中三糖以內的可發酵糖。至今尚未見到采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法分離測
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵，色譜柱，進樣器，檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比，液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制，只要求把樣品制成溶液即可，非常適合于分離生物大分子、離子型化合物，不穩定的天然產物以
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀，具有常規HPLC的基本性能，并擴展了更多智能化的功能，能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求，使用戶能更加輕松的使用，并獲得準確的分析數據。一、原理：高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論，色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
高效液相色譜原理
采用高效液相色譜（HPLC）法分離單糖和寡糖，較多采用氨基柱，乙腈和水作為流動相，此法具有完全分離麥汁、發酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和麥芽三糖的優點。本文采用Hypersil NH2柱分析麥汁、發酵液和啤酒中三糖以內的可發酵糖。至今尚未見到采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法分離測
高效液相色譜積分
正常操作不建議手工積分，手工積分會人為的帶來誤差，同一次測定的對照品和樣品的色譜圖最好是在設定一個固定的積分條件進行積分計算，積分參數一致的情況下進行可減少人為主觀意識上的誤差。
高效液相色譜特點
①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。 ②高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小于1小時。 ③高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵，色譜柱，進樣器，檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比，液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制，只要求把樣品制成溶液即可，非常適合于分離生物大分子、離子型化合物，不穩定的天然產物以
高效液相色譜基線
高效液相色譜基線色譜基線也常被稱作背景噪音，是在無樣品組分通過色譜檢測器時，檢測器響應信號的隨機分布。基線噪音的大小直接影響色譜分析方法的檢測靈敏度以及對雜質的檢出能力，如純度測試以及痕量物質殘留檢測方法等。對于液相色譜而言，等度洗脫模式下，由于流動相的組成保持一致，其折光率不變，因而基線比較平坦，
高效液相色譜原理
高效液相色譜（HPLC）的原理：以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。高效液相色譜對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發性和熱穩定性的限制，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。高效液相色譜和氣
液相色譜中反相系統換正相系統
例：反相換正相有些柱子只能用做反相就得換一根正相柱有些正反通用的柱子就不用了，改變流動相就可以了。在更換流動相過程中要沖柱
反相液相色譜中流動相pH的確定
反相高效液相色譜緩沖體系PH的選定 反相高效液相色譜中緩沖體系PH值的選擇在反相高效液相色譜分析中，選擇正確的緩沖液PH值，對可離解的化合物分析的重現性十分重要，不恰當的PH值可能導致不對稱峰，寬峰，分裂峰或肩峰，而尖銳的，對稱的峰是定量分析中獲得低的檢測限以，兩次分析之間較低的相對標準偏差（
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
高效液相色譜與超高效液相色譜條件有什么差異
原理是一致的。不同的地方一個是儀器，一個是色譜柱。后者超高效液相色譜，可以縮短檢測時間，節省時間，節省流動相，大大地提高了效率。先說色譜柱，超高效液相色譜柱的粒徑會更小，柱子也更短。如果說樣品流過液相色譜柱的感覺是流過滿是石頭的管路，那么超高效液相色譜柱就是裝滿了沙子的管路。一般液相色譜柱的粒徑是5
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況