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    鈣調蛋白的胰蛋白酶消化實驗

    試劑、試劑盒消化緩沖液經 TPCK 處理的胰蛋白酶HCl純的鈣調蛋白實驗步驟材料經 TPCK 處理的胰蛋白酶(其干粉可從 WorthingtonBiochemicalCorp. 買到)HCl(1 mmol/L)純的鈣調蛋白(干粉;無鹽(0.1~1 mg)試劑消化緩沖液(配方,見"試劑的配制',PP.82~83)操作程序1) 稱重 0.1~1mg 胰蛋白酶于 1.5-ml 離心管,并溶于 1mmol/LHCl 中,終濃度為 1 mg/ml。置冰上。2) 用消化緩沖液溶解鈣調蛋白,終濃度為 1 mg/ml 置冰上。3) 加一等分胰蛋白酶于鈣調蛋白。該等分含胰蛋白酶的重量應為鈣調蛋白總量的 1/100。例如,對 0.5 mg 鈣調蛋白,加 5ug 胰蛋白酶(5ullmg/ml 胰蛋白酶儲液)。4) 蓋緊離心管,反應混合物于 37°C 孵育 2 h。5) 在消化反應正在進行的同時,置剩余的胰蛋白酶儲液于冰上。2 h 后......閱讀全文

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