融合蛋白化學降解實驗1
實驗材料融合蛋白試劑、試劑盒CNBr甲酸SDS儀器、耗材離心機分光光度計水浴鍋實驗步驟1. 進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份50 μl 的融合蛋白溶液，將其中一份重懸于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一份重懸于50 μl 含CNBr 的70%甲酸中，室溫下反應。2. 在0、8、24及48 h 的時刻，各取5 μl 并凍干。 3. 往所有凍干樣本加20 μl 1×SDS樣品緩沖液，煮沸10 min，加樣于SDS-聚丙烯酰胺凝膠。 4. 分析凝膠電泳結果以確定完全裂解蛋白所需的最短溫育反應時間。展開......閱讀全文
融合蛋白化學降解實驗1
實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒 CNBr甲酸SDS 儀器、耗材 離心機分光光度計水浴鍋 實驗步驟 1. ?進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份50 μl 的融合蛋白溶液，將其中一份重懸于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一
融合蛋白化學降解實驗
實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒 CNBr甲酸SDS 儀器、耗材 離心機分光光度計水浴鍋 實驗步驟 1. ?進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份50 μl 的融合蛋白溶液，將其中一份重懸于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一份重懸于50 μl 含CNBr 的7
融合蛋白化學降解實驗
基本方案 用溴化氰 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 1 mg ml 融合蛋白
融合蛋白化學降解實驗
基本方案 備選方案1 備選方案2 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 融合蛋白
融合蛋白化學降解實驗3
實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒 天冬氨酸脯氨酸甲酸乙酸鹽酸胍 儀器、耗材 電泳儀離心機水浴鍋 實驗步驟 1. ?進行預實驗確定最佳的水解條件。準備四個反應混合物： （1）反應1：20 μg 溶解在70%甲酸中的融合蛋白。 （2）反應2：20 μg
融合蛋白化學降解實驗2
實驗材料融合蛋白試劑、試劑盒Tris·ClNaCl鹽酸胍羥胺裂解緩沖液SDS儀器、耗材離心機水浴鍋培養箱實驗步驟1. ?進行預試驗以確定最短保溫反應時間。將50 μl 1 mg/ml? 融合蛋白與50 μl 2×羥胺裂解緩沖液混合在1.5 ml 微量離心管中，45℃溫育反應。?2. ?在0、2、4、
融合蛋白化學降解實驗—— 用溴化氰
實驗材料1 mg ml 融合蛋白試劑、試劑盒50 mg ml CNBr70%（V V）甲酸1 × SDS 樣品緩沖液實驗步驟1. 進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份各 50 μl 的融合蛋白溶液，將其中一份重懸于 50 μl 50 mg/ml CNBr / 70% 甲酸中，另一份重懸于 5
融合蛋白的酶解實驗1
實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒 SDS 儀器、耗材 水浴鍋培養箱離心機 實驗步驟 1. ?準備兩個小量預試驗反應以確定最佳溫育時間： ? （1）反應1：20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白，室溫下反應
GST 融合蛋白沉降實驗
實驗材料 細胞裂解液其中蛋白質 35S 用標記試劑、試劑盒 裂解緩沖液SDS 聚丙烯酰胺凝膠探針GST 蛋白儀器、耗材 沸水浴翻轉祥品旋轉儀谷胱甘肽瓊脂糖球珠實驗步驟 材料緩沖液和溶液將緩沖液稀釋到適當濃度。裂解緩沖液20 mmol/LTris-Cl(pH8.0)200 mml/L NaCl1 mm
GST 融合蛋白沉降實驗
GST 沉降實驗與 far western(方案 2) 相比有—個優點：探針蛋白是在更自然的環境下與可能的搭檔蛋白孵育，因而增強了相互作用的有效性。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料細胞裂解液其中蛋白質 35S 用標記試劑、試劑盒裂解