氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗
通過測定轉染細胞的報告基因表達,如β-gal或CAT,可以確定導人的DNA是否已被整合到宿主細胞主要用于(1)測定基因表達(2)基因整合評價(3)細胞的調控。來源于《動物細胞培養:基礎技術指南(第五版)》實驗方法原理氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法,檢測CAT活性,它的靈敏度接近同位素測定方法,而操作極為簡便、快捷,成本也大為降低。使用通用裂解緩沖液,能與其他類型的報告基因檢測和蛋白含量檢測兼容。實驗材料細胞樣本試劑、試劑盒Tris-緩沖液Tris 三硝基甲苯(Triton)CAT 稀釋緩沖液CAT 酶標準物閃爍液聚丙烯閃爍杯儀器、耗材微量離心管微量離心機實驗步驟一、材料滅菌物品1. D-PBSA2. 多孔培養板:6 孔,35 mm非消毒物品1. Tris-緩沖液:Tris-HCl,0.1mol......閱讀全文
棕櫚氯霉素混懸液的含量測定
含量測定照紫外可見分光光度法(通則0401)測定。供試品溶液精密量取本品3ml(約相當于棕櫚氯霉素0.13g),置125ml分液漏斗中,用三氯甲烷提取5次,第次25ml,后四次各用20ml,合并三氯甲烷液,蒸干,提取物用無水乙醇洗入250ml量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻;精密量取10ml,置200ml
棕櫚氯霉素(B型)片的含量測定
含量測定照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液取本品10片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于棕櫚氯霉素50mg),置200ml量瓶中,加無水乙醇適量,振搖使溶解,再用無水乙醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液適量,用無水乙醇定量稀釋制成每1ml中約含棕櫚氯霉素25μg的溶液。
氯霉素滴耳液的含量測定方法
含量測定照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液精密量取本品適量,用流動相定量稀釋制成每1ml中約含氯霉素0.1mg的溶液對照品溶液、系統適用性溶液、色譜條件、系統適用性要求與測定法見氯霉素含量測定項下。
表觀遺傳之組蛋白修飾—組蛋白乙酰化
大家好,我又來啦~~今天給大家放送的是表觀遺傳之組蛋白修飾相關的內容噢,組蛋白修飾也是一個比較復雜的過程,今天呢,我們就給大家講講組蛋白乙酰化及相關的產品。?一 組蛋白修飾?真核生物染色質的基本結構單位是核小體,它由約 146 bp DNA 纏繞組蛋白八聚體組成,其中組蛋白八聚體包含 2 (H2
小鼠(CAT)ELISA試劑盒操作說明
ELISA試劑盒檢測樣本齊全:(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒科研專用
組織細胞內CAT的作用
定位于細胞器的CAT與產生H2O2的需氧脫氫酶類(氨基酸氧化酶等)同時存在,能有效調節體內H2O2水平,及時地消除H2O2的有害影響。過氧化氫酶是在生物演化過程中正常細胞內清除氧自由基,生物防御系統的關鍵酶之一,其生物學功能是催化細胞內過氧化氫分解,防止過氧化,幫助減緩細胞衰老。保護細胞免受氧自由基
雙熒光素酶報告基因測試
在用螢火蟲熒光素酶定量基因表達時 ,通常采用第二個報告基因來減少實驗的變化因素。但傳統的共報告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不夠便利。因為各自的測試化學,處理要求,檢測特點存在差異。Promega提供一種先進的雙報告基因技術,結合了螢火蟲熒光素酶測試和海洋腔腸熒光素酶測試。雙熒光素酶報告基因
血清氨基轉移酶測定原理
丙氨酸氨基轉移酶主要分布在肝臟,其次是骨骼肌、腎臟、心肌等組織中。大門冬氨基轉移酶E要分布在心肌,其次是肝臟、骨骼肌、腎臟等組織中。在肝細胞內,ALT主要存在于非線粒體中。而AST大部分存在于線粒體中。ALT與AST均為肝細胞內的功能酶。 肝細胞受損后,由于肝細胞膜通透性增加,ALT與AST釋
氯霉素
性狀本品為白色至微帶黃綠色的針狀、長片狀結晶或結晶性粉末本品在甲醇、乙醇、丙酮或丙二醇中易溶,在水中微溶。熔點本品的熔點(通則0612)為149~153℃比旋度取本品,精密稱定,加無水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50mg的溶液,依法測定(通則0621),比旋度為+18.5°至+21.5鑒別(
氯霉素
性狀本品為白色至微帶黃綠色的針狀、長片狀結晶或結晶性粉末本品在甲醇、乙醇、丙酮或丙二醇中易溶,在水中微溶。熔點本品的熔點(通則0612)為149~153℃比旋度取本品,精密稱定,加無水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50mg的溶液,依法測定(通則0621),比旋度為+18.5°至+21.5鑒別(
氯霉素類藥物的殘留量的測定
食品安全分析工作流程賽默飛生命科學質譜不僅擁有深厚悠久的技術傳統,而且不斷銳意創新。在全系TSQ? 三重四極桿質譜儀上都使用了可以擬合出教科書般完美理論電場的真正的共軛雙曲面的四極桿質量分析。自1980 年賽默飛推出世界上第一臺三重四極桿MS/MS (TSQ?) 質譜儀以來,TSQ? 三
注射用琥珀氯霉素的含量測定方法
含量測定照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定。供試品溶液取裝量差異項下的內容物,精密稱取適量(約相當于氯霉素50mg),加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含氯霉素20g的溶液測定法取供試品溶液,在276nm的波長處測定吸光度,按C1H12Cl2N2O3的吸收系數(E)為298計算。
棕櫚氯霉素混懸液的含量測定方法
含量測定照紫外可見分光光度法(通則0401)測定。供試品溶液精密量取本品3ml(約相當于棕櫚氯霉素0.13g),置125ml分液漏斗中,用三氯甲烷提取5次,第次25ml,后四次各用20ml,合并三氯甲烷液,蒸干,提取物用無水乙醇洗入250ml量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻;精密量取10ml,置200ml
棕櫚氯霉素(B型)顆粒的含量測定方法
含量測定照紫外可見分光光度法(通則0401)測定。供試品溶液取裝量差異項下的內容物,混合均勻,精密稱取適量(約相當于棕櫚氯霉素50mg),置200ml量瓶中,加無水乙醇適量,振搖使溶解,再用無水乙醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液適量,用無水乙醇定量稀釋制成每1ml中約含棕櫚氯霉素25μg的溶
基因活性的同位素分析實驗——原位裂解細胞的CAT分析法
實驗材料轉染細胞試劑、試劑盒Triton裂解液儀器、耗材培養皿培養箱實驗步驟1. ?60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質粒的細胞,用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml?低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。2. ?吸去低滲緩沖液,加入400 μl Triton裂解液。用橡膠刮子將細胞刮
γ谷氨酰基轉移酶測定檢查前準備
向被檢測者解釋本操作的目的、方法等,消除顧慮;一般選取靜脈血進行檢測,采血前一天應清淡飲食,避免飲酒以免影響結果,采血時避免情緒緊張,采血當天需空腹。
三乙酰基苯安全信息
三乙酰基苯安全信息[ 危害碼 (歐洲) ?]:Xi:Irritant;[ 風險聲明 (歐洲) ]:R36/37[ 安全聲明 (歐洲) ]:S22-S24/25[ WGK德國 ]:3[ 海關編碼 ]:2914399090
全自動在線固相微萃取測定水中氯霉素
本方法采用Waters OA在線固相萃取裝置,簡化復雜的離線固相萃取操作,降低人工成本,提高分析效率,該方法靈敏度高,可移植性好,可滿足氯霉素在水體的痕量快速檢測。 抗生素面世以來,人們找到抑制細菌生長的方法,大衛教授于1947年發現可產生氯霉素的鏈霉菌,1949年氯霉素引入臨床使用。近代,氯霉
氯霉素片
性狀本品為糖衣片或薄膜衣片,除去包衣后,顯白色至微帶黃綠色鑒別(1)取本品1片,除去包衣后,研細,加乙醇l0ml,振搖,使氯霉素溶解,濾過,濾液蒸干。殘渣照氯霉素項下的鑒別(1)項試驗,顯相同的反應。(2)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。檢查溶
琥珀氯霉素
鑒別(1)取本品約50mg,加吡啶與氫氧化鈉試液各5ml,混勻,置水浴中加熱數分鐘,吡啶層顯深紅色(2)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集(3)取本品約50mg,加乙醇制氫氧化鉀試液2ml使溶解,注意防止乙醇揮散,置水浴中加熱15分鐘,溶液顯氯化物鑒別(1)的反應(通則0301)。性狀本品為
棕櫚氯霉素
性狀本品為白色或類白色粉末;幾乎無臭本品在丙酮中易溶,在乙醇中略溶,在水中不溶。熔點本品經60℃干燥2小時,依法測定(通則0612),A晶型的熔點為89~95℃;B晶型的熔點為86~91℃比旋度取本品,精密稱定,加無水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50mg的溶液,依法測定(通則0621),比旋
氯霉素滴眼液
性狀本品為無色至微黃綠色的澄明液體鑒別(1)取本品4ml,照氯霉素項下的鑒別(1)試驗顯相同的反應。(2)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致檢查pH值應為6.0~7.0(通則0631)有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液精密量取本
氯霉素膠囊
性狀本品內容物為白色至微帶黃綠色粉末或顆粒鑒別(1)取本品的內容物,照氯霉素項下的鑒別(1)項試驗,顯相同的反應。(2)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致檢查干燥失重取本品的內容物,在105℃千燥至恒重,減失重量不得過1.0%(通則0831)。溶出
氯霉素檢測
氯霉素檢測試劑盒可定性、定量檢測動物組織(含水產)、牛奶、蜂蜜、飼料、雞蛋等樣品中氯霉素的殘留 一、概要 氯霉素 (Chloramphenicol,CAP)曾是應用廣泛的抗菌素,但由于其存在嚴重的副作用,能引起人的再生障礙性貧血,粒細胞缺乏癥等疾病,歐美等發達國家已相繼禁止或嚴格禁
利用CAT技術測定聚四氟乙烯涂層與基材的粘結強度
自從1938年被偶然發現以來,聚四氟乙烯(以下簡稱PTFE)因其獨特的材料特性而得到廣泛應用。它具有很高的化學抗性,可以在很大的溫度范圍內使用,不易燃,具有良好的滑動性能即低摩擦系數,等等。除了航空航天、計算機等行業外,PTFE還廣泛的用于密封,絕緣體,服裝,工業過濾(阻止特殊物質),以及可見的
血清谷草轉氨酶的注意事項及檢查過程
注意事項 (1)臨床治療中很多藥物可使血清天冬氨酸氨基轉移酶升高,如利福平、四環素、慶大毒素、紅霉素、卡那霉素、氯霉素、灰黃霉素、環孢素、非那西丁、苯巴比妥、乙烯雌酚、口服避孕藥、地西泮、奎尼丁、保泰松、磺胺類、呋喃類等藥物,尤其是長期服用這些藥物對肝細胞有損害,對天冬氨酸氨基轉移酶活性測定均
報道基因活性的同位素分析實驗——CAT活性的層析分析法
報告基因 是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,在調控序列控制下進行表達,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控,篩選得到轉化體。實驗材料DNA試劑、試劑盒PBS乙酸乙酯
葡萄糖醛酸轉移酶活性的測定
分光光度法 實驗材料 肝微粒體蛋白 試劑、試劑盒 氯化鎂 維生素C
葡萄糖醛酸轉移酶活性的測定
葡萄糖醛酸轉移酶是指能催化間接膽紅素與葡萄糖醛酸結合形成葡萄糖醛酸酯(即直接膽紅素)的酶。 ?
谷胱甘肽S轉移酶活性測定_比色法
實驗材料肝微粒體蛋白試劑、試劑盒二硝基氯苯乙醇谷胱甘肽硝酸鉀緩沖液三氯醋酸儀器、耗材石英杯雙光束分光光度計比色池紫外分光光度計試管培養箱離心機離心管試管架谷胱甘肽S-轉移酶是指催化具有親電取代基的外源性化合物與內源的還原谷胱甘肽(GSH)反應的酶。 可催化多種反應包括烴基、芳基、芳烴基、烯基和氧基的