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    氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗

    通過測定轉染細胞的報告基因表達,如β-gal或CAT,可以確定導人的DNA是否已被整合到宿主細胞主要用于(1)測定基因表達(2)基因整合評價(3)細胞的調控。來源于《動物細胞培養:基礎技術指南(第五版)》實驗方法原理氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法,檢測CAT活性,它的靈敏度接近同位素測定方法,而操作極為簡便、快捷,成本也大為降低。使用通用裂解緩沖液,能與其他類型的報告基因檢測和蛋白含量檢測兼容。實驗材料細胞樣本試劑、試劑盒Tris-緩沖液Tris 三硝基甲苯(Triton)CAT 稀釋緩沖液CAT 酶標準物閃爍液聚丙烯閃爍杯儀器、耗材微量離心管微量離心機實驗步驟一、材料滅菌物品1. D-PBSA2. 多孔培養板:6 孔,35 mm非消毒物品1. Tris-緩沖液:Tris-HCl,0.1mol......閱讀全文

    氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法,檢測CAT活性,它的靈敏度接近同位素測定方法,而操作極

    氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法,檢測CAT活性,它的靈敏度接近同位素

    氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗

    通過測定轉染細胞的報告基因表達,如β-gal或CAT,可以確定導人的DNA是否已被整合到宿主細胞主要用于(1)測定基因表達(2)基因整合評價(3)細胞的調控。來源于《動物細胞培養:基礎技術指南(第五版)》實驗方法原理氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransfe

    氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定

    試劑、試劑盒 Tris-緩沖液 Tris 三硝基甲苯(Triton) CAT 稀釋緩沖液CAT 酶標準物閃爍液 聚丙烯閃爍杯 儀器、耗材 微量離心管微量離心機 實驗步驟 一、材料 滅菌物品 1. D-PBSA 2. 多孔培養板:6 孔,35 mm 非消毒物品

    二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗

    分光光度法 Stopped 實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料

    二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗

    實驗方法原理 實驗材料 酶樣品 試劑、試劑盒 Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸轉乙酰酶DL-二氫硫辛酰胺 儀器、耗材 分光光度計 實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」 0.98 ml 實驗混合物 0.02 ml 酶樣品 30℃ 時,于 240 nm

    二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗——Stopped 實驗

    實驗材料酶樣品試劑、試劑盒Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸轉乙酰酶DL-二氫硫辛酰胺HCl羥胺FeCl3 試劑實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 酶樣品30 ℃ 培養 15 min,加入 0.1 ml 1 mol/L HCl 停止,沸水浴 5 min。而

    薄層層析法測定氯霉素酰基轉移酶含量實驗

    材料 緩沖液和溶液 貯存液、緩沖液和試劑的組分請見附錄 1。 貯存液稀釋到適當濃度。 CAT 反應混合物 1 1mol/LTris-Cl(pH7.8)50ul [14C] 氯霉素 (60mCi/mmol, 用水稀釋到 0.1mCi/m

    薄層層析法測定氯霉素酰基轉移酶含量實驗

    試劑、試劑盒 CAT 反應混合物 1乙基乙酸裂解緩沖液不含鈣鹽和鎂鹽的磷酸鹽緩沖液薄層層析(TLC) 溶劑Tris-Cl放射性墨水 儀器、耗材 干冰 乙醇浴不溶于乙醇的墨水的記號筆旋轉真空蒸發器橡膠棒 薄層層析板薄層層析槽預設為 65°C 的水浴 實驗步驟 材料 緩沖液和溶液 貯

    薄層層析法測定氯霉素酰基轉移酶含量實驗

    本方案中,我們列出了三種不同的分析方法,可以用來測定報道基因載體 pCAT3 轉染哺乳動物細胞后表達的 CAT 酶活性(請見圖 17-3)。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。 實驗材料 用攜帶感興趣 DNA 的 pCA

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