細胞組分的化學反應_細胞內堿性蛋白和酸性蛋白的顯示
實驗方法原理由于不同的蛋白質分子所帶的堿性和酸性基團的數目不同,在pH值不同的溶液中,蛋白質分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理條件下,整個蛋白質所帶負電荷多,則為酸性蛋白質;帶正電荷多,則為堿性蛋白質。據此,可將標本經三氯醋酸處理提出核酸后,用不同pH值的固綠染液分別染色,細胞內的酸性蛋白和堿性蛋白質顯示出來。實驗材料小白鼠試劑、試劑盒PBS緩沖液丙酮二甲苯乙醇三氯醋酸固綠硫酸銅聯苯胺混合液番紅過碘酸酒精液Schiff氏酒精液亞硫酸水蘇木精Carnoy固定液儀器、耗材光學顯微鏡解剖器材蠟盤載玻片吸水紙染色缸蓋玻片水浴箱實驗步驟一、方法1. 以破壞脊髓法處死蟾蜍,將其腹面向上放人蠟盤中,剪開胸腔,打開心包。小心將心臟剪一小口,取心臟血一滴滴在干凈載玻片一端,推片,按此法制備二張血涂片,室溫晾干。2. 將涂片作好標記放在70%乙醇中固定5分鐘,室溫晾干。3. 放入5%三氯醋酸中60℃30分鐘,抽提......閱讀全文
簡述髓鞘堿性蛋白的歷史背景和作用
1、髓鞘堿性蛋白的歷史背景: 1962年,Laatsch等首先從豚鼠腦中分離出MBP.隨后國內外學者對MBP進行了廣泛和深入的研究.試圖闡明人類脫髓鞘疾病的發病原理,尋找診斷和治療方法。國外還用直接合成多肽的方法合成MBP的某一肽段,用于檢測和治療中樞神經系統疾病。同時,患者的MBP可釋放到腦
制備和純化-mRNA-顯示蛋白實驗
實驗方法原理 實驗材料 DNA 庫不含甲硫氨酸的翻譯混合物試劑、試劑盒 MgCl2核苷三磷酸溶液轉錄緩沖液去離子超濾水T7 RNA 聚合酶固體 EDTA尿素緩沖液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶緩沖液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 連接酶緩沖液T4 DNA 連接酶乙酸鉀溶液兔網織
制備和純化-mRNA-顯示蛋白實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 DNA 庫 不含甲硫氨酸的翻譯混合物
制備和純化-mRNA-顯示蛋白實驗
實驗材料DNA 庫不含甲硫氨酸的翻譯混合物試劑、試劑盒MgCl2核苷三磷酸溶液轉錄緩沖液去離子超濾水T7 RNA 聚合酶固體 EDTA尿素緩沖液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶緩沖液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 連接酶緩沖液T4 DNA 連接酶乙酸鉀溶液兔網織紅細胞裂解物翻譯試劑盒氯化
細胞光度學
是對細胞內某些化學物質的光學上的數量進行分析。最常用的方法有吸收量度法、熒光測定法、干涉量度法、反射量度法等。原位定量測量包括對切片厚度的測定,和對一個特定細胞化學反應區域的定量測量,以及放射自顯影顆粒的計數和自動影像分析。自動影像分析是將光掃描系統和電子計算機連在一起進行定量分析,是定量細胞化
細胞染色技術中常用的堿性染料和酸性染料有哪些
1、酸性染料這類染料電離后染料離子帶負電,如伊紅、剛果紅、藻紅、苯胺黑、苦味酸和酸性復紅等,可與堿性物質結合成鹽。當培養基因糖類分解產酸使pH值下降時,細菌所帶的正電荷增加,這時選擇酸性染料,易被染色。2、堿性染料這類染料電離后染料離子帶正電,可與酸性物質結合成鹽。微生物實驗室一般常用的堿性染料有美
細胞內蛋白質降解的主要途徑有哪些
真核細胞內蛋白質的降解途徑主要有三種,溶酶體途徑、泛素化途徑和胱天蛋白酶(caspase)途徑。1、溶酶體途徑:蛋白質在同酶體的酸性環境中被相應的酶降解,然后通過溶酶體膜的載體蛋白運送至細胞液,補充胞液代謝庫。胞內蛋白:胞液中有些蛋白質的N端含有KFERQ信號,可以被HSC70識別結合,HSC70幫
PNAS:新探針量化細胞內折疊和錯誤折疊蛋白水平
美國Scripps研究所(TSRI)的科學家發明了一種小分子折疊探針,可在不同條件下量化細胞內正常折疊的功能性蛋白,以及疾病相關的錯誤折疊目的蛋白。 科學家們長期以來都需要更好的工具在細胞內進行這種測量,因為蛋白質錯誤折疊是組織損傷的一個主要原因。以過多蛋白錯誤折疊為特征的疾病,折磨著全球
骨形成蛋白-如何從細胞內運輸到細胞外?
骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是一類重要的形態發生素,其介導的信號通路不僅廣泛參與胚胎發育、器官形成、組織再生等生命過程,還與多種疾病及腫瘤發生密切相關,因此BMP信號通路受到學術界的廣泛關注。然而,作為一類經典的胞外信號分子,BMP是如何從細胞內分泌
細胞內作用的蛋白質怎么合成和加工的
胞內蛋白由細胞質內游離的核糖體合成,不經過內質網、高爾基體的加工和細胞膜的胞吐,只在細胞內產生影響的一類蛋白質。胞內蛋白是在細胞質游離的核糖體上合成的 不需要運輸到細胞膜外 只在細胞內起作用,如呼吸酶DNA聚合酶、各種轉氨酶、DNA解旋酶、RNA聚合酶等細胞生命活動必需的酶。細胞中有游離的核糖體和附
堿性蛋白酶簡介
CAS編碼 9014-01-1英文通用名稱 Alcalase中文通用名稱 堿性蛋白酶中文商品名稱 愛爾卡酶性狀描述 澄清透明褐色液體。主要成分為絲氨酸型蛋白酶的枯草溶菌素(Subtilisin carlsberg)。混溶于水,相對密度約為1.06。最適溫度50~60℃,PH8.5(6~10)。制法
堿性蛋白酶的功能應用
堿性蛋白酶是經細菌原生質體誘變方法造育的2709枯草桿微生物通過深層發酵、提取及精制而成的一種蛋白水解酶,屬于一種絲氨酸脆外高堿性蛋白酶,它能水解蛋白質分子肽鏈生成多肽或氨基酸,具有較強的分解蛋白質的能力。生產工藝是采用微濾超濾膜分離、噴霧干燥或真空冷凍干燥等先進技術,廣泛應用于食品、醫療、釀造、絲
堿性蛋白酶的應用介紹
堿性蛋白酶是目前市場上流行的洗滌添加劑,能大幅度提高洗滌去污能力,特別對血漬、汗漬、奶漬、油漬等蛋白類污垢,具有獨特的洗滌效果。堿性蛋白酶在技術上采用細菌原生質體誘變處理方法,從國內堿性蛋白菌生產菌2709枯草桿菌中研究選育出若干穩定高性能菌株,在后處理上,采用去渣鹽析沉淀法,減少了蛋白酶的雜質含量
堿性蛋白酶的性狀描述
澄清透明褐色液體。主要成分為絲氨酸型蛋白酶的枯草溶菌素(Subtilisin carlsberg)。混溶于水,相對密度約為1.06。最適溫度50~60℃,PH8.5(6~10)。
簡述堿性蛋白酶的用途
主要應用領域:洗滌劑、制革、絲綢、飼料、醫藥、食品、環保等 其應用主要圍繞其水解蛋白質肽鍵的功能展開,生產生活中,有幾個主要的需求:1 使復雜的大分子蛋白質結構變成簡單的小分子肽鏈或者氨基酸,從而變得易于吸收或洗去,比如食品、洗滌劑、飼料等領域。2 部分破壞蛋白質結構,使物質組分之間實現分離,
核堿性蛋白的定義及原理
定義 一類由 蛋白質和 核酸結合而成的 復合蛋白質。存在于一切生物。 病毒是一類極簡單的生物,它們的化學本質就是 核蛋白。細胞中核蛋白主要存在于 染色體和 核糖體中。由于核酸有DNA和RNA兩類,核蛋白也因而分為DNA-核蛋白和RNA-核蛋白兩類。DNA-核蛋白主要存在于 細胞核內,RNA-核
堿性胚胎蛋白的臨床意義
異常結果 堿性胎兒蛋白增高見于原發性肝癌、膽管癌、膽囊癌、胰腺癌,其次對胃癌、肝癌臨床抗癌療效的判斷及術后復發的監測有一定意義。良性疾病也有一定升高,對陽性結果應結合臨床加以綜合分析。 需要檢測的人群 肝功能異常、胃痛、消化異常、器官痛。
堿性胚胎蛋白的檢查過程
(1)現有一步法酶標檢測甲胎蛋白試劑盒供應,該法將樣品和酶標記物加在一起共同溫育1h后顯色,其操作更加簡單快速。 (2)甲胎蛋白斑點酶免疫試驗(DEIA)檢測,其操作要點是在硝酸纖維薄膜上點加抗甲胎蛋白抗體2μl,室溫干燥15min,用10g/L牛血清白蛋白封閉1h,用濾紙吸干后,加待檢血清2
α1酸性糖蛋白
α-酸性糖蛋白(α1-acidglycoproteinTimes New Roman,AAG,早期稱之為乳清類粘蛋白)分子量近4萬,含糖約45%,pI為2.7-3.5,包括等分子的已糖、已糖胺和唾液酸。 AAG是主要的急性時相反應蛋白,在急性炎癥時增高,顯然與免疫防御功能有關,但詳細機制尚待闡明。
α1酸性糖蛋白
α-酸性糖蛋白(α1-acidglycoproteinTimes New Roman,AAG,早期稱之為乳清類粘蛋白)分子量近4萬,含糖約45%,pI為2.7-3.5,包括等分子的已糖、已糖胺和唾液酸。AAG是主要的急性時相反應蛋白,在急性炎癥時增高,顯然與免疫防御功能有關,但詳細機制尚待闡明。早期
關于核酸性蛋白的基本介紹
核酸性蛋白端粒是一個蛋白質與RNA的復合物,其中有一個完整的RNA片段作為端粒合成的模板,以及合成的活性酶-端粒逆轉錄酶(TERT-telomerasereversetranscriptase)。 臨床適應證與轉移因數相似。目前主要用于惡性腫瘤如腎癌、肺癌、消化道癌及神經母細胞瘤和骨肉瘤等的輔
α酸性糖蛋白的生理功能
α-酸性糖蛋白(α1-acidglycoprotein,AAG,早期稱之為乳清類粘蛋白)分子量近4萬,含糖約45%,pI為2.7-3.5,包括等分子的已糖、已糖胺和唾液酸。是主要的急性時相反應蛋白,在急性炎癥時含量增高,顯然與免疫防御功能有關明。早期工作認為肝是合成α1-糖蛋白的唯一器官,近年有證據
關于酸性蛋白酶的簡介
酸性蛋白酶是由隆科特黑曲霉優良菌種經發酵精制提煉而成,它能在低PH條件下,有效水解蛋白質,廣泛應用于酒精、白酒、啤酒、釀造、食品加工、飼料添加、皮革加工等行業。 1、產品規格:,規格有5萬u/g~10萬u/g 液體型為黑褐色液體,規格有50000u/ml~10000u/ml. 2、酶活力定
mRNA-顯示蛋白的純化和逆轉錄實驗
實驗材料mRNA 顯示蛋白翻譯反應產物試劑、試劑盒Oligo 纖維素Oligo(dT)結合緩沖液Oligo 洗滌緩沖液Ni-NTA 瓊脂糖NI-NTA 結合緩沖液Ni-NTA 洗脫緩沖液鮭精 DNABSADNA splintSuperscript Ⅱ 逆轉錄酶緩沖液DTT脫氧核苷三磷酸Supersc
mRNA-顯示蛋白的純化和逆轉錄實驗
實驗材料 mRNA 顯示蛋白翻譯反應產物試劑、試劑盒 Oligo 纖維素Oligo(dT)結合緩沖液Oligo 洗滌緩沖液Ni-NTA 瓊脂糖NI-NTA 結合緩沖液Ni-NTA 洗脫緩沖液鮭精 DNABSADNA splintSuperscript Ⅱ 逆轉錄酶緩沖液DTT脫氧核苷三磷酸S
mRNA-顯示蛋白的純化和逆轉錄實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 mRNA 顯示蛋白翻譯反應產物 試劑、試劑盒 Oligo 纖維素 Oligo(dT)結合緩沖液
人膠質細胞酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
人膠質細胞酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?GFAP?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?GFAP與單抗結合,加入生物素化的抗人GFAP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的S
大鼠膠質細胞酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測法
大鼠膠質細胞酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?GFAP?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?GFAP與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠GFAP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標
關于堿性蛋白酶的基本介紹
堿性蛋白酶,指在堿性條件下能夠水解蛋白質肽鍵的酶,最適pH在9~11范圍內。廣泛應用于洗滌劑、食品、醫療、釀造、絲綢、制革等行業。 堿性蛋白酶,又稱絲氨酸蛋白酶。常見的有兩種,一為Novo蛋白酶,另一為Carsberg蛋白酶,兩者的性質和構造相近,分別含275和274個氨基酸殘基,由一條多肽鏈
關于堿性蛋白酶的來源介紹
堿性蛋白酶的主要來源為微生物提取,研究和應用較多的主要是芽孢桿菌,以枯草桿菌為最,也有少量其他菌種,比如鏈霉菌。 天然菌種的生產能力和所含的酶活性、穩定性往往達不到工業生產的需求,需要對菌種進行篩選改進,常用的方法有誘變、基因工程、蛋白質工程、孢子熱處理等。主要目標是提高酶的活性、穩定性(耐溫