抗磷酸化酪氨酸的印跡檢測
實驗步驟基 本 方 案 抗 磷 酸 化 酪 氨 酸 印 跡 檢 測 的 準 備 及 分 析材 料一抗: lmg/m l 4 G 1 0 抗磷酸化酪氨酸單抗(UpstateBiotechnology) 或類似抗體P B S溶于 PBS/0. 0 2 % (m / V ) 疊 氮 鈉 的 5 0 % (m /V ) 蛋 白 A -瓊 脂 糖 懸 液(PharmaciaL K B )待分析的細胞刺激物2 X 和 I X 裂解液,冰冷PI/P B S ,冰冷lmmol/L 原銀酸鈉I X S D S /上樣緩沖液封閉液含 有 Tween 2 0 的 Tris 平 衡 鹽(T B S T )二 抗 :堿 性 磷 酸 酶(A P ) -偶 聯 的 抗 鼠 Ig (Promega 或 Pierce; l m g /m l 儲存液以1 : 7000 稀 釋 于 T B S T 中)V 顯影液Combitip 分液管連續分液器振蕩器平臺或軌道旋轉......閱讀全文
抗-磷-酸-化-酪-氨-酸-的-印-跡-檢-測
實驗步驟基 本 方 案 抗 磷 酸 化 酪 氨 酸 印 跡 檢 測 的 準 備 及 分 析材 料一抗: lmg/m l 4 G 1 0 抗磷酸化酪氨酸單抗(UpstateBiotechnology) 或類似抗體P B S溶于 PBS/0. 0 2 % (m / V ) 疊 氮 鈉 的 5 0 % (
蛋白質分離和分析——免-疫-印-跡-和-免-疫-檢-測
實驗步驟基 本 方 案 1 液體容器中的蛋白質印跡材 料待分析樣品標準分子質量蛋白質,預 染 型(Sigma 或 Bio-Rad) 或 生 物 素 化 型(Vector labs 或Sigma)轉移緩沖液無粉手套Scotch-Brite 墊 片(3M ) 或類似海綿Whatman 3M M 濾紙或類
免-疫-復-合-物-方-法-檢-測-酪-氨-酸-蛋-白-激-酶
實驗步驟基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 檢 測以下步驟可以釆用淋巴或非淋巴細胞、原代細胞或培養的細胞系、活化或非活化的細胞。材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)待檢測的細胞 冰預冷的 PBS含蛋白酶抑制劑的 I X 細 胞 裂 解 液(新鮮配置并于冰上保存
氨氮和總磷怎么測
氨氮用納氏試劑法,總磷用鉬酸銨分光光度法,可以到環境標準網上下到標準方法納氏試劑比色法是一種測定飲用水、地面水和廢水中銨的方法。其原理是:以游離的氨或銨離子等形式存在的銨氮與納氏試劑反應生成黃棕色絡合物,該絡合物的色度與銨氮的含量成正比,可用目視比色和分光光度法測定。目視比色法測定時,最低檢出濃度為
ELISA檢-測-抗-體-的-含-量
實驗步驟基 本 方案材 料展開?
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測
實驗步驟一、蛋白質印跡法蛋白質印跡 (Western Blotting) 法是在混合的復合物中鑒定和定量特定蛋白質的一種有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。這一技術對固定在硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯 (PVDP) 膜上的蛋白質樣本進行非直接的檢測。在常規的蛋白質印跡中,蛋白
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測(一)
一、蛋白質印跡法蛋白質印跡 (Western Blotting) 法是在混合的復合物中鑒定和定量特定蛋白質的一種有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。這一技術對固定在硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯 (PVDP) 膜上的蛋白質樣本進行非直接的檢測。在常規的蛋白質印跡中,
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測(三)
四、化學發光信號4.1 信號捕捉雖然化學發光蛋白質印跡法十分常用,但是對于難于捕獲的信號的捕捉卻很棘手。蛋白質印跡法要用到一系列需要技巧的技術,因此許多因素都會導致無法捕捉到信號。由于變量較多 (表 33. 2),問題印跡的問題診斷和排除就如同大海撈針一樣困難。傳統的方案在檢測某一個蛋白質時通常
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測
實驗步驟 一、蛋白質印跡法 蛋白質印跡 (Western Blotting) 法是在混合的復合物中鑒定和定量特定蛋白質的一種有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。這一技術對固定在硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測2
四、化學發光信號4.1 信號捕捉雖然化學發光蛋白質印跡法十分常用,但是對于難于捕獲的信號的捕捉卻很棘手。蛋白質印跡法要用到一系列需要技巧的技術,因此許多因素都會導致無法捕捉到信號。由于變量較多 (表 33. 2),問題印跡的問題診斷和排除就如同大海撈針一樣困難。傳統的方案在檢測某一個蛋白質時通常都是
B-細-胞-分-泌-抗-體-的-檢-測
實驗步驟基 本 方案材 料外周 血 單 個 核 細 胞(P B M C ; 單 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培養基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 養 板(Costar)1 . 計 數 PBMC (附錄 3A ) , 用 RPMI-5 完全培養基調整濃度至 4 X 10
抗-體-的-體-內-誘-導-和-檢-測
實驗步驟基 本 方案 1 蛋白質或多糖抗原體內法誘導抗體的產生材 料人外周血類毒素混合物: 25Lf U/ml 白 喉 類 毒 素(Connaught Laboratories 或 State Laboratoriy Institute of Massachusetts) 與 IOLf U/ml 破
酸水解酪蛋白的簡介
酸水解酪蛋白是以天然牛奶蛋白為原料,經鹽酸水解、脫色、脫鹽、噴霧干燥而成的產品,含有18種游離氨基酸,含氮和蛋白量均大于80%。氨基酸是合成蛋白質的基礎,是人、動植物、微生物最基本的營養成分之一。人和微生物可通過蛋白質間接獲取氨基酸,但需要胃酸和酶的水解,當蛋白質被鹽酸水解成氨基酸組分時藥用級可
酸水解酪蛋白的理化指標
項目單位值最低限度最高 pH值(25·C)5.04.86.5 灰份%3.02.05.0 氯化鈉%3.02.05.0 鐵ppm00100 氮(凱氏定氮法)%80.70.085.0 水份%6.0
巨-噬-細-胞-抗-腫-瘤-活-性-的-檢-測
實驗步驟基本方案 [111In] 釋放法檢測巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷作用材 料輔助方案 [111In ] 標記腫瘤靶細胞材 料展開
巨-噬-細-胞-一-氧-化-氮-的-檢-測
實驗步驟基本方案材料展開
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測(二)
2.3 半定量蛋白質印跡法通 常 認 為 蛋 白 質 印 跡 法 是 定 性 的 ,但 當 加 入 特 定 對 照 時 ,它 也 可 成 為 一 種 定 量 方 法 。當 E L I S A 無 法 用 于 某 種 樣 本 ,或 是 當 生 物 樣 本 中 的 某 種 組 分 會 干 擾 E
酸水解酪蛋白的注意事項
1、本品吸潮,未用完時務必密閉防潮。 2、飼料中添加時,在其它原料粉碎后再添加混合,以免粘附設備。 3、包裝規格:100克---500克(塑料瓶裝)、每袋10kg、20kg 采用聚乙烯無毒塑料內襯袋包裝,外用牛皮紙復合包裝袋。
酸水解酪蛋白的功能及作用
功能及作用編輯 1、飼料: a、增香增鮮,促進動物食欲。該產品谷氨酸含量高,具有調節口感,促進食欲之功效。 b、快速補充動物營養,增強飼料的利用率。該產品所有氨基酸均為水解游離氨基酸,無消化損失;由于多種氨基酸的復合效應,可增強其他營養物質的吸收利用;亦可利用氨基酸對微量元素的結合能力,增
煤炭測磷儀-測煤炭磷含量的儀器-煤中磷測定儀
煤炭測磷儀 測煤炭磷含量的儀器 煤中磷測定儀 鶴壁中創儀器公司生產與銷售 0392-3206612,139.3926.8598 聯系人:申經理ZCL-2磷測定儀煤中磷的測定儀器(設備)用于褐煤、煙煤、無煙煤和焦炭中磷含量的測定。測定方法:??? 按照《GB/T 216-2003煤中磷的測定方法》執行
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗
蛋白質翻譯后修飾 (PTM) 在細胞生物調節中發揮著基本作用。PTM 是 mRNA 翻譯后蛋白質的酶促共價化學修飾。蛋白質化學修飾非常重要,因為它們會潛在地改變蛋白質的物理或化學性質、組成、活性、細胞定位或穩定性。實際上,在氨基酸或蛋白質的 N 端或 C 端加入或移除化學基團會導致大部分蛋白質發生變
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(一)
一、引言蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 (P T M ) 在 細 胞 生 物 調 節 中 發 揮 著 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻譯 后 蛋 白 質 的 酶 促 共 價 化 學 修 飾 。蛋 白 質 化 學 修 飾 非 常 重 要 ,因 為 它 們 會 潛 在 地
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測(四)
五、常見問題及其原因5.1 沒 有 信 號初 次 曝 光 時 未 捕 獲 到 化 學 發 光 信 號 , 表 明 該 蛋 白 質 印 跡 系 統 需 要 優 化 。通 常 , 信 號 缺失 由 系 統 中 酶 量 (即 HRP) 過 多 造 成 。當 信 號 不 能 被 檢 測 到 時 ,采
水楊酸法測氨氮-顯色劑水楊酸有析出
你說的是什么時段析出,是藥品儲藏階段析出還是樣品加入階段析出?如果是前者,可以接受,但是析出量不能太多,因為析出太多會使藥品測定過程變得“不靈敏”,如果是加入階段析出,理論上不接受測量結果,首先你樣品析出本身就可能吸附一定的氨氮,這本身就不可行,而且不同樣品析出量可能會所有差別,不同樣品之間也會存在
COD氨氮總磷氨氮的測定步驟
氨氮的測定 1-1.打開主機電源,預熱。 1-2.準備若干潔凈干燥的比色管于比色管架。 1-3.準確量取5ml蒸餾水加到空白反應管中。 1-4.分別準確移取各水樣,依次加入到其他反應管中。 1-5.水樣氨氮值在0-5mg/L時取水樣5ml。 1-6.5-50mg/L時取0.5ml水樣
α、-β和-γ干-擾-素-誘-導-的-抗-病-毒-活-性-的-檢-測
實驗步驟基 本 方 案 小 鼠 干 擾 素 誘 導 的 抗 病 毒 活 性 的 檢 測材 料干擾素敏感的 L 929 成纖維細胞E M E M 培 養 基(Eagle 氏最低要求培養基)胰酶消化液檢 測 樣 品(具干擾素活性的血清或培養上清)小鼠干擾素的參照標準品 α -干擾素、β-干擾素、 γ-干
Western-Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測(五)
5.7.1 分析方法間 的 底 物 孵 育 會 延 長 信 號 持 續 時 間 。使 用 W e s t P i c o 或 W e s t D u r a 底 物 能 檢 測 到 低 至10 n g 的 蛋 白 質 , 甚 至 在 完 成 蛋 白 質 印 跡 的 64 h 后 依 然 可
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗2
二、用 于 鑒 定 P T M 的富 集 技 術2.1 磷酸化絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的可逆磷酸化也許是研究最為深人的 PT M 。蛋白質磷酸化信號網絡介導細胞對與不同的應激因子、生長因子、細胞因子以及細胞間相互作用作出響應。憐酸化還影響多種細胞進程,如增殖、凋亡 、遷移 、轉錄和蛋白質翻譯(W
γ干-擾-素-的-檢-測
實驗步驟基本方案材 料展
測氨儀的特點
結構緊湊,重量輕,壽命長。 低電壓狀態顯示。 高可靠性,高重現性, 穩定性好 。