實驗方法原理培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點,是制備染色體極好的對象。實驗材料細胞試劑、試劑盒HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟1. 培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %~90 %匯合單層培養細胞;2. 加秋水仙素使用最終濃度為0.02~0.8 μg/ml營養液;溫箱繼續培養6~10 小時;或用低溫封閉法:把培養細胞置于4 ℃條件下6~12 小時后,再于37 ℃溫箱中繼續培養6~10 小時處理(加秋水仙素);3. 采集分裂細胞可利用分裂中期細胞體變圓與底物附著不牢特點,此時手持培養瓶,左右反復橫向水平搖動,令培養液在培養細胞表面反復沖涮;應用此法可使90 %的中期分裂細胞從瓶壁脫落;注意勿用力過猛,以防多量非分裂細胞脫落影響觀察;4. 離心收集培養液,1000 轉/分鐘,離心5~10......閱讀全文
3.2 免 疫 B 細胞的制備血清效價有意義(>1 : 1000)的免疫后動物可以提供抗原反應性B 細胞用于融合。這些細胞可以從脾臟或淋巴結中獲得。動物用吸人CO2 處死,在無菌操作下取組織,放 在 4°C無血清培養基中,最多可放lh 。用懾子或針頭輕輕打開組織脾臟或淋巴結的外包膜獲得
實驗概要細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境,在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下,使期生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物為單個細胞或細胞群。主要設備細胞培養設施和基本條件 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染
(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混
實驗概要通過本實驗掌握傳代細胞培養的基本方法,了解無菌操作的基本原則。掌握磷酸鈣介導的貼壁細胞的通用轉染方法。了解細胞凋亡的形態特征,掌握細胞凋亡DNA梯度(“DNA Ladder”)電泳檢測法。實驗原理細胞培養是現代生物學研究中應用最為廣泛的技術之一。它的突出優點,一是研究對象是活的細胞,可長時期
實驗概要掌握細胞培養染色體顯示實驗方法。實驗步驟1. 傳代培養細胞染色體顯示法 1) 培養細胞:取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80%~90%匯合單層培養細胞。 2) 加秋水仙素:使用最終濃度為0.02~0.8微克/毫升營養液,溫箱繼續培養6~10
細胞培養是現代生物學研究中應用最為廣泛的技術之一。它的突出優點,一是研究對象是活的細胞,可長時期地監控、檢測甚至定量評估其形態、結構和生命活動等;二是可以人為地嚴格控制研究條件,便于研究各種物理、化學、生物等外界因素對細胞生長、發育和分化等的影響,有利于單因子分析;三是研究的樣本可以達到比較均一性。
3 生物性污染的來源、危害及預防 外界的微生物如昆蟲、節肢動物、原蟲、霉菌、病毒、細菌、無細胞壁的微生物(通常指支原體)和其它類型的細胞都可能侵入培養環境引起污染。只要在一個開放的環境中進行培養,都難以避免發生污染。發生污染的可能性取決于操作方法、培養室的無菌環境以及實驗室的規章制度。生物性污染對細
實驗概要本文描述了體外生長的人晶狀體上皮細胞的生長情況與非永生化人晶狀體上皮細胞的成熟過程。從18周大的胎兒晶狀體上獲得的人晶狀體上皮細胞,在培養基中維持在牛角膜內皮(BCE)的細胞外基質(ECM)上,輔以纖維母細胞生長因子(FGF-2)。從培養過程中的特點、生長以及分化以染色體組型、細胞形態、和生
實驗原理細胞培養是現代生物學研究中應用最為廣泛的技術之一。它的突出優點,一是研究對象是活的細胞,可長時期地監控、檢測甚至定量評估其形態、結構和生命活動等;二是可以人為地嚴格控制研究條件,便于研究各種物理、化學、生物等外界因素對細胞生長、發育和分化等的影響,有利于單因子分析;三是研究的樣本可以達到比較
一、 人外周血染色體制備 1. 實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下,人外周血小淋巴細胞都處在G1期(或G0期),但在體外給予一定的條件,進行培養,經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。
實驗概要 傳代培養細胞染色體顯示法實驗步驟1.培養細胞:取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80%~90%匯合單層培養細胞。2.加秋水仙素:使用最終濃度為0.02~0.8微克/毫升營養液,溫箱繼續培養6~10小時;或用低溫封閉法:把培
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提 綱 一、化療藥物的發展 二、腫瘤的藥物治療 三、抗腫瘤藥物篩選及評價 四、體外抗腫瘤活性試驗 五、體內抗腫瘤活性試驗 一、化療藥物的發展 ? 近代腫瘤化療學始于20世紀40年代。 ? 50年代通過動物篩選化療藥物發現了5FU、MTX、CTX等,
提 綱 一、化療藥物的發展 二、腫瘤的藥物治療 三、抗腫瘤藥物篩選及評價 四、體外抗腫瘤活性試驗 五、體內抗腫瘤活性試驗 一、化療藥物的發展 ? 近代腫瘤化療學始于20世紀40年代。 ? 50年代通過動物篩選化療藥物發現了5FU、MTX、CTX等,
2.6 納米細菌的系統發生學分類用納米細菌中提取的核酸作為PCR模板擴增16S rRNA基因. 使用通用引物1492 RPL(GGCTCGAGCGGCCGCCCGGGTTAC CTTGTTACGACTT)和細菌特異性引物8FPL(GCGGATCCGCGGCCGCTGCAGAGTTTGATCCTGGC
實驗方法原理 在間期細胞核中,女性X染色質和男性Y染色質均可用特殊染色法顯示出來。女性的兩個X染色體中的一個,在間期時的染色質呈異固縮(Heteropyconosis),呈深染的小體稱Barr氏體。Barr氏體位于間期細胞核內面,呈三角形或半月形小體,易為碳酸復紅或硫堇等染料著色。正常女性Barr氏
實驗方法原理 組織塊移植組將直徑2 mm的人肺癌新鮮標本癌組織塊移植于BALB/C裸鼠背部皮下組織內,每例人肺癌新鮮標本均移植入5只裸鼠體內,成瘤者為第1代。取第1代移植瘤組織塊以相同方法每例標本移植于另5只BALB/C裸鼠背部皮下組織內,成功者為第2代。重復上述傳代方法得到第3代移植瘤。將
個體化裸鼠荷人肺癌腫瘤模型的建立可以:(1)疾病定性篩選;(2)抗癌藥物的篩選;(3)為患者進行個體化治療提供藥物篩選的依據;(4)為研究經過各項治療后患者腫瘤細胞發生各種突變的情況和機制奠定基礎。實驗方法原理組織塊移植組將直徑2 mm的人肺癌新鮮標本癌組織塊移植于BALB/C裸鼠背部皮下組織內,每
實驗方法原理在間期細胞核中,女性X染色質和男性Y染色質均可用特殊染色法顯示出來。女性的兩個X染色體中的一個,在間期時的染色質呈異固縮(Heteropyconosis),呈深染的小體稱Barr氏體。Barr氏體位于間期細胞核內面,呈三角形或半月形小體,易為碳酸復紅或硫堇等染料著色。正常女性Barr氏體
小鼠常被用于研究癌癥,但科學家仍在努力改善這一模型,以更好地研究人類疾病。基因編輯的進步使研究人員能夠構建更能反映人類疾病的小鼠模型。 1915年,全球處于戰爭狀態,日本病理學家Katsusaburo Yamagiwa和他的助理Koichi Ichikawa正在努力研究一個致命武器,其殺傷力