動物細胞培養及外源基因導入的原理和操作步驟（一）
實驗原理細胞培養是現代生物學研究中應用最為廣泛的技術之一。它的突出優點，一是研究對象是活的細胞，可長時期地監控、檢測甚至定量評估其形態、結構和生命活動等；二是可以人為地嚴格控制研究條件，便于研究各種物理、化學、生物等外界因素對細胞生長、發育和分化等的影響，有利于單因子分析；三是研究的樣本可以達到比較均一性。常用的細胞系均是性質均一的細胞，需要時還可采用克隆化等方法使細胞進一步純化；四是研究的內容便于觀察、檢測和記錄。體外培養的細胞可采用顯微鏡，電鏡等直接觀察記錄，充分滿足實驗的要求。另外還具有研究范圍比較廣泛，研究費用相對經濟等優點。然而，細胞培養也有其局限性。由于培養的細胞脫離了機體復雜的環境條件，其細胞形態和功能都會發生一定程度的改變。尤其是體外反復傳代、長期培養的細胞，有可能發生染色體非二倍體改變等情況。因此，應將體外培養的細胞視為一種既保持動物體內原細胞一定的性狀又具有某些改變的特定的細胞群體。由于細胞培養技術的優點是其......閱讀全文
動物細胞培養
動物細胞培養 基本練習 2.2 無菌技術I：吸取與移液 練習2 細胞培養介紹 2.2 無菌技術I：吸取與移液 練習3無菌技術II：準備培養基 練習4：單層細胞的換液 練習5：玻璃器皿的清洗和滅菌 練習
動物細胞培養的培養步驟
注：所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。取離體的動物組織，器官或細胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞，配置形成細胞懸液。制備動物細胞培養液體培養基（需加入血清，保證無菌無毒），將細胞接種至培養基，放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。當細胞增殖達到一定程度，出現接觸抑制現象
動物細胞培養和動物細胞培養的區別有哪些？
1、培養基不同：植物細胞（固體培養基），動物細胞（液體培養基）。 2、培養基的成分不同：動物細胞培養必須利用動物血清，植物組織培養則不需要，而需要加入植物生長素。 3、產物不同：植物組織培養最后一般得到新的植物個體，而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性，因此得到的是只含同一種的細
動物細胞培養7
無Ca2＋和Mg2＋的 Dulbecco 磷酸鹽緩沖液（D-PBSA）的制備與滅菌實驗方法原理目的在常壓下使用的等滲鹽溶液的制備。應用用于稀釋濃縮液．如稀釋2.5％腆蛋白酶；胰蛋自酶消化前的預漂洗，收集細胞或換試劑時的清洗溶液。因為它不含Can+和Mg汁，NaHCO3或葡萄糖，所以不適合長時間孵育。
動物細胞培養1
動物細胞的培養對（1）動物體外細胞實驗較體內實驗便利可多次使用具有廣泛的用途（2）藥物和病毒等的機制研究（3）臨床前實驗等的研究。實驗材料動物細胞試劑、試劑盒水磷酸鹽緩沖液PH試紙儀器、耗材移液管細胞培養基紫外燈玻璃器皿
動物細胞培養方法
體外培養的動物細胞可分為原代細胞與傳代細胞。原代細胞是指從機體取出后立即培養的細胞，進行傳代培養后的細胞即稱為傳代細胞。?任何動物細胞的培養均需從原代細胞培養開始。動物很多組織的細胞，如幼年動物的腎、肺、卵巢、精巢、肌肉及腫瘤等組織的細胞較易培養，而神經細胞等則較難培養。原代細胞培養步驟如下：首先取
動物細胞培養培養液成分
體外細胞培養所需營養物質與體內基本相同，例如，需要糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等。將細胞所需的上述物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養基，稱為合成培養基。由于動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內的環境，因此在使用合成培養基時，通
動物細胞培養的培養步驟介紹
注：所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。取離體的動物組織，器官或細胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞，配置形成細胞懸液。制備動物細胞培養液體培養基（需加入血清，保證無菌無毒），將細胞接種至培養基，放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。當細胞增殖達到一定程度，出現接觸抑制現象
動物細胞培養——細胞培養介紹
實驗方法原理目的細胞培養的評判性檢查。應用檢查常規維持的一致性；在復蘇、傳代、凍存前培養狀況的評估；對新的或實驗性情形反應的評估；確認明顯的污染物。訓練目標熟悉不同類型和不同密度的細胞培養的外觀；數碼或膠片相機的使用；滅菌物品和污染物間的區別，健康的和不健康的培養物間的區別；培養物生長階段的評估。監
動物細胞培養的培養條件簡介
1、無菌、無毒的環境：對培養液和所有培養用具進行無菌處理，通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外應定期更換培養液，以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。 2、營養物質：無機物（無機鹽、微量元素等），有機物（糖、氨基酸、促生長因子等） 3、血清和血漿 (提供
動物細胞培養——基本練習
實驗方法原理 這部分是一名實習生或學生應當首先接觸的內容。大部分是簡單易懂并易于操作的，為了使實驗比較有趣，操作方案和備選方案以相互參考的方式詳細列出。每一個操作方案中材料部分的指定數量見操作說明，但可以按比例調節。表2.1中黑體部分的練習是必需的。 首先有必要參觀介紹組織培養的設施，這
動物細胞培養的原理
動物細胞在液體培養基上進行正常的生命活動，并發生有絲分裂進行增殖。
動物細胞培養的原理
動物細胞在液體培養基上進行正常的生命活動，并發生有絲分裂進行增殖。
動物細胞培養的簡介
在所有的細胞離體培養中，最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。 ⑴血清：動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。 ⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用
動物細胞大規模培養介紹
所謂動物細胞大規模培養技術（large-scale culture technology）是指在人工條件下（設定pH、溫度、溶氧等），在細胞生物反應器（bioreactor）中高密度大量培養動物細胞用于生產生物制品的技術。目前可大規模培養的動物細胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細胞及人二倍
動物細胞培養的定義
動物細胞培養是從動物機體中取出相關的組織，讓它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養基中讓這些細胞生長和增殖。培養產品一般是細胞產品或細胞分泌物。
動物細胞培養主要儀器
一、潔凈間擺放的儀器（一）提供細胞培養環境的儀器l.CO2培養箱指能精密控制并提供恒溫、恒濕、潔凈、恒定CO2濃度的儀器，利用該儀器可使用培養皿、多孔板（(6-96孔板）、培養方瓶等進行細胞培養。根據容積大小，有60-190L臺式，也有上下堆疊落地式。根據通氣狀況，一般通CO2和空氣，也有3氣（CO
論動物細胞的灌注培養
動物細胞的培養技術自上世紀初出現以來，經歷了一個多世紀的發展，獲得了很大的進步。不僅建立了許多細胞系和培養了許多類型的原代細胞，而且開發了人工合成培養基和無血清培養基，并且出現了細胞工程，哺乳動物細胞的大規模培養獲得了工業化的應用，用于生產重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開發了
動物細胞培養的應用
培養各種正常或病變的動物細胞，用于生理病理研究。培養動物細胞，用于判斷和檢測某些物質對于細胞的毒性大小。作為動物基因工程的受體細胞。作為皮膚或器官移植的供體細胞。
動物細胞培養的要求
動物細胞培養在所有的細胞離體培養中，最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清：動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用
動物細胞大規模培養方法
根據動物細胞的類型，可采用貼壁培養、懸浮培養和固定化培養等三種培養方法進行大規模培養。 一、動物細胞生長特性及培養溫度 1.細胞生長緩慢，易污染，培養需用抗生素 2.細胞大，無細胞壁，機械強度低，環境適應性差 3.需氧少，不耐受強力通風與攪拌 4.群體生長效應，貼壁生長（錨地依賴性） 5.培養過程產
動物細胞大規模培養方法
根據動物細胞的類型，可采用貼壁培養、懸浮培養和固定化培養等三種培養方法進行大規模培養。 一、動物細胞生長特性及培養溫度 1.細胞生長緩慢，易污染，培養需用抗生素 2.細胞大，無細胞壁，機械強度低，環境適應性差 3.需氧少，不耐受強力通風與攪拌 4.群體生
哺乳動物細胞培養過程－－培養條件
哺乳動物細胞培養過程 & 培養條件導語：哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取，原代培養，傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。哺乳動物細胞培養過程哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取，原代培養，傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。如下對各
哺乳動物細胞培養過程－－培養條件
哺乳動物細胞培養過程哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取，原代培養，傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。如下對各個過程進行簡述：原代培養：從動物機體取出組織后切碎，經過各種酶（常用胰蛋白酶），螯合劑（常用EDTA）結合機械方法（吸液管反復吸吹）處理，分散成單細胞，置于
動物細胞培養的技術應用
1、生物制品的生產(如制備單克隆抗體） 2、轉基因動物的培養 3、檢測有毒物質并判斷其強弱 4、醫學研究（生理 病理 藥理） 5、器官移植培養 6、篩選抗癌藥物
動物細胞培養的基本過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試。二、取材在無菌環境下從機體取出某種組織
動物細胞大規模培養的意義
動物細胞大規模培養是指在人工條件下（設定配合、溫度、溶氧等）在細胞生物反應器中高密度大量培養動物細胞用于生產生物制品的技術。目前可大規模培養的動物細胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細胞及人二倍體細胞、蟲（中華倉鼠卵巢）細胞、BHK-21（倉鼠腎細胞）Vero細胞（非洲綠猴腎傳代細胞，是貼壁依賴
動物細胞培養的歷史發展
1907年，哈里森（Harrison）在無菌條件下用淋巴液作培養基，培養蛙胚神經組織存活數周，并觀察到神經細胞突起的生長過程，由此創建了蓋片覆蓋凹窩玻璃懸滴培養法，奠定了動物組織體外培養的基礎。之后，又有人將懸滴培養法改良為雙蓋片培養，提高了傳代效率并減少了污染；1923年，卡雷爾（Carrel）設
動物細胞培養的基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理后的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現接觸抑制。此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用
動物細胞培養的必需條件
在所有的細胞離體培養中，最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清：動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃，塑料等