酵母活細胞染色
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酵母活細胞染色
實驗步驟展
酵母菌的形態觀察及死細胞、活細胞的鑒別
基本原理 酵母菌是多形的、不運動的單細胞微生物,細胞核與細胞質已有明顯的分化,菌體比細菌大。繁殖方式也較復雜,無性繁殖主要是出芽生殖,僅裂殖酵母屬是以分裂方式繁殖;有性繁殖是通過接合產生子囊孢子。本實驗通過用美藍染色制成水浸片,和水-碘水浸片來觀察生活的酵母形態和出芽生殖方式。美藍是一種無毒性染料
酵母菌的形態觀察及死、活細胞的鑒別
實驗方法原理 美藍是一種無毒性染料,它的氧化型是藍色的,而還原型是無色的,用它來對酵母的活細胞進行染色,由于細胞中新陳代謝的作用,使細胞內具有較強的還原能力,能使美藍從藍色的氧化型變為無色的還原型,所以酵母的活細胞無色,而對于死細胞或代謝緩慢的老細胞,則因它們無此還原能力或還原能力極弱,而被美藍染成
活細胞熒光染色后細胞形態變圓是什么原因
不固定直接染色,細胞就會變圓,因為染色液的滲透壓和細胞質不一樣可以選擇用CFSE染色后,鋪板。過夜,等細胞重新貼壁后,再用PI染色,你應該是要看雙染的效果,這個比較合適。用熒光顯微鏡觀察的時候可以先觀測拍照再固定,避免甲醇影響了細胞狀態讓它貼的不牢,或者不固定直接拍照,PI染色效果一個小時影響不大。
活細胞的脂類染色的操作與應用
脂類是脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)的統稱。它是構成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學組成上,脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關的物質,脂類的主要功能是氧化供能。脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細胞漿內。在病理檢驗中,脂類染色法最常用于證明脂肪
酵母菌的形態觀察及死、活細胞的鑒別實驗——細胞鑒別
實驗方法原理美藍是一種無毒性染料,它的氧化型是藍色的,而還原型是無色的,用它來對酵母的活細胞進行染色,由于細胞中新陳代謝的作用,使細胞內具有較強的還原能力,能使美藍從藍色的氧化型變為無色的還原型,所以酵母的活細胞無色,而對于死細胞或代謝緩慢的老細胞,則因它們無此還原能力或還原能力極弱,而被美藍染成藍
酵母人工染色體
·?????????Easy YAC Preparation Method?(Andrew Davies,Shaw lab)·?????????Screening YAC libraries?(Donis Keller Lab)This is a method for screening YAC l
酵母遺傳學方法8:酵母活體染色
酵母活體染色1)核DNA和線粒體DNA1.當細胞培養到約107細胞/ml時,離心(5秒)收集細胞,再懸浮在70%乙醇中。2.固定5分鐘或5分鐘以上,用水洗2次。3.將細胞懸浮在含有50ng/ml的4,6-二脒基-2苯基吲哚的封固劑中。1mg/ml的4,6-二脒基-2苯基吲哚母液可在-20℃下貯存。4
超活染色--實驗操作
[1] 人口腔粘膜上皮細胞線粒體的超活染色觀察(1) 取清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上,滴2 滴詹納斯綠B 應用染液。 (2) 實驗者用牙簽寬頭在自己口腔粘膜處稍用力刮取上皮細胞,將刮下的粘液狀物放入載玻片的染液滴中,染色10~15min(注意不可使染液干燥,必要時可再加滴染液),蓋上蓋玻
染色法分析高溫對酵母細胞的影響
酵母細胞在高溫的刺激下,有些酵母不能忍受高溫環境,而早衰,或者死亡。本文用美蘭染色法觀察兩種釀酒酵母對于高溫的不耐受性。1 菌種釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae )Y14(LYCD制備菌株),從茅臺酒生產酒醅中分離,最佳生長溫度為35-38℃,最高可達42℃;釀酒酵母(
超活染色染色法的方法介紹
超活染色又稱體外活染。活體染色是指對生活有機體的細胞或組織某些結構能著色但又不影響細胞的生命活動和產生任何物理化學變化以致引起細胞的死亡的一種染色方法。
Nature:構造酵母染色體
合成生物學的目標之一就是構建那些復雜的人工合成有機體。目前,在酵母細胞中已經取得了階段性的進展——采用分段式方法,研究者已經可以將整個酵母染色體轉化成為合成序列了。 生物細胞其實很像是一臺計算機——基因組可以比作軟件,它負責對細胞的構成進行編碼,細胞器則猶如計算機的硬件,負責讀取并運行軟件的
超活染色--實驗用品介紹
[1] 材料?肝細胞、人口腔上皮細胞、洋蔥鱗莖內表皮細胞[2] 器材 顯微鏡、恒溫水浴鍋、解剖盤、剪刀、表面皿、吸管、牙簽、吸水紙。[3] 試劑 1.Ringer 溶液 (氯化鈉?0.85g)(氯化鉀?0.25g)(氯化鈣?0.03g)(蒸餾水?100ml) 2. 1%詹納斯綠B 溶液(原液) 稱取
超活染色所需實驗用品
[1] 材料?肝細胞、人口腔上皮細胞、洋蔥鱗莖內表皮細胞[2] 器材 顯微鏡、恒溫水浴鍋、解剖盤、剪刀、表面皿、吸管、牙簽、吸水紙。[3] 試劑1.Ringer 溶液 (氯化鈉?0.85g)(氯化鉀?0.25g)(氯化鈣?0.03g)(蒸餾水?100ml)2. 1%詹納斯綠B 溶液(原液) 稱取50
酵母人工染色體的應用
實驗方法原理 直到 20 世紀 80 年代中期,尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前,如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究,該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。實驗材料 釀酒酵母試劑、試劑盒 甘油儀器、耗材 脈沖場凝膠電泳儀選擇性培養
酵母染色體沉淀分析方法
ABSTRACTThis protocol describes a method for the detection of proteins bound to specific regions of chromatin in yeast. There are many variations of t
酵母人工染色體的應用
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 直到 20 世紀 80 年代中期,尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前,如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究,該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。
酵母人工染色體的簡介
酵母人工染色體(Yeast artificial chromosomes,簡稱YAC),是一種能夠克隆長達400Kb的DNA片段的載體,含有酵母細胞中必需的端粒、著絲點和復制起始序列,是細胞內具有遺傳性質的物體,易被堿性染料染成深色,所以叫染色體(染色質)。其本質是脫氧核苷酸,是細胞核內由核蛋白
酵母人工染色體的應用
直到 20 世紀 80 年代中期,尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前,如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究,該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理直到 20 世紀 80 年代
線粒體的超活染色與觀察
實驗原理活體染色是指對生活有機體的細胞或組織某些結構能著色但又不影響細胞的生命活動和產生任何物理化學變化以致引起細胞的死亡的一種染色方法。因此活染技術通常可用來研究生活狀態下的細胞形態結構和生理、病理狀態。根據所用染色劑的性質和染色方法的不同,通常把活體染色分為體內活染與體外活染兩類。體內活染是以膠
超活染色實驗操作方法
[1] 人口腔粘膜上皮細胞線粒體的超活染色觀察(1) 取清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上,滴2 滴詹納斯綠B 應用染液。 (2) 實驗者用牙簽寬頭在自己口腔粘膜處稍用力刮取上皮細胞,將刮下的粘液狀物放入載玻片的染液滴中,染色10~15min(注意不可使染液干燥,必要時可再加滴染液),蓋上蓋玻
線粒體的超活染色與觀察
實驗簡介:線粒體是機體能量代謝的重要細胞器。本實驗以肝細胞、人口腔上皮細胞、洋蔥鱗莖內表皮細胞三種材料為實驗對象,通過詹納斯綠B 專一性地對線粒體進行超活染色,可使線粒體內中的細胞色素氧化酶系呈藍綠色反應,而線粒體周圍的細胞質呈無色反應,由此作為線粒體的特異性特征。實驗學時3 個。一、實驗目
富集活細胞
實驗方法原理在 25 ml 縲口蓋離心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,將 9 ml 含 2×107 個細胞的培養基加在上面,離心,從交界部位收集活細胞。實驗材料細胞懸液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
富集活細胞
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在 25 ml 縲口蓋離心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,將 9 ml 含 2×107 個細胞的培養基加在上面,離心,從交界部位收集活細胞。 實驗材料
活細胞計數
活細胞計數是培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。 培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
鑒別活細胞
染色法分化學染色法和熒光染色法,根據染色機理的不同,染料或使死細胞著色,或使活細胞著色。死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括:死活細胞細胞膜通透性的差異:活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死
活細胞計數
活細胞計數是培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。 培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
富集活細胞
實驗方法原理在 25 ml 縲口蓋離心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,將 9 ml 含 2×107?個細胞的培養基加在上面,離心,從交界部位收集活細胞。實驗材料細胞懸液D-PBSA試劑、試劑盒Ficoll-Hypaque溶液或其他類似物儀器、耗材離心管或常規容器生長培養基注射器移
酵母od值為1活菌數為多少
5x10的8次方個。根據酵母的產品介紹得知,當酵母od值為1活菌數就是5x10的8次方個。酵母是基因克隆實驗中常用的真核生物受體細胞。
活細胞成像技術活細胞工作站介紹
我們知道以往的固定組織揭示了非常多的自然秘密,給了我們很大的啟示,現在的科學研究則向在最真實的條件下觀察自然發展。縱觀顯微鏡的歷史,直到15年前,科學家主要還是處理死細胞。現在,活細胞的應用已經非常普及了。 加拿大McGill大學成像實驗室主任Claire?M.Brown表示,要達到這個研究目的,我