堿性磷酸酶的染色檢測
實驗概要了解堿性磷酸酶的染色檢測方法。實驗原理本試驗是一個酶組織化學試驗，酶組織化學是在不破壞組織細胞的條件下，檢測酶的存在，定位與活性的學科，即在酶的存在，分布及其用在顯微鏡下變成可見的。生命是有序的，包括時間的有序及其空間的有序。其中美的空間有序性在于其細胞組織結構的精確位置，各種酶的自己的位置保證了化學活動的有效進行。酶的定位方法必須準確，其顯示方法必須具有高度的特異性，使酶本身具有可見性，這是一種直接的方法，目前主要有免疫熒光化學法，該法敏感性高，速度快，但成本高。如果有相同的抗原決定簇時，則會有交叉反應。方法成熟，使用廣泛的還是經典的組織化學方法。下面以堿性磷酸酶的顯示方法來學習經典酶組織化學的理論及操作。經典酶組織化學不是顯示酶本身，常采用的方法是：在一定條件下，使細胞中的酶作用于酶的底物，使其產物在原地進行捕捉、沉淀轉化為有色產物。堿性磷酸酶（AKP）的顯示方法最早由Gomeri（1939）提出，現在這種方法稱為G......閱讀全文
酸性磷酸酶的簡介
酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）廣泛存在于體內各組織、細胞和體液中。血液中的酸性磷酸酶的組織來源是前列腺、肝、脾、腎、紅細胞、白細胞、血小板，以前列腺含量最為豐富。正常男性血清中酸性磷酸酶1/3～1/2來自于前列腺，女性血清中的酸性磷酸酶主要來自肝臟、紅細胞和血小板。酸性磷
細胞堿性磷酸酶染色
實驗概要細胞堿性磷酸酶染色實驗原理胚胎干細胞中堿性磷酸酶的活性比較高， 5-溴-4-氯-3吲哚-磷酸鹽（BCIP）能被堿性磷酸酶水解，形成一個中間體，這個中間體能與氯化硝基四氮唑藍，也稱氮藍四唑（NBT）反應生成白色的中間二聚體和NBT-藍紫色結晶物。通過染色結果可以相對得知堿性磷酸酶的活性，進
堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶（APAAP）免疫組化染色技術
實驗方法原理APAAP（Alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase technique）技術的基本原理為：抗鼠IgG抗體作為橋梁，將鼠源性識別細胞抗原的第一抗體與鼠源性的抗堿性磷酸酶單克隆抗體-堿性磷酸酶復合物相連接，使之成為Ag，-Ab1－Ab2-
免疫堿性磷酸酶組織化學實驗——間接免疫堿性磷酸酶法
免疫堿性磷酸酶組織化學技術是以堿性磷酸酶（AKP 或 AP）取代 HRP 來顯示結果的免疫酶組織化學技術。最早出現的是間接免疫堿性磷酸酶法（IAP），1983 年 Mason 及 Moir 等建立了堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶（APAAP）復合物法。隨后，人們建立了更為敏感的生物素-親和素-堿性磷酸酶復合
酸性磷酸酶的顯示方法
1.目的與原理實驗目的： 掌握Comori法的基本原理和方法。觀察酸性磷酸酶在細胞內的分布狀況。實驗原理： 酸性磷酸酶能分解磷酸脂而釋放出磷酸基。在pH5．0的環境中，磷酸基能與鉛鹽反應形成磷酸鉛。但因其是無色的，所以再經過與硫化銨作用，形成棕黑色的硫化鉛沉淀，由此就能顯示酸性磷酸酶在細胞內的存
酸性磷酸酶的顯示方法
實驗概要酸性磷酸酶能分解磷酸脂而釋放出磷酸基。在pH5．0的環境中，磷酸基能與鉛鹽反應形成磷酸鉛。但因其是無色的，所以再經過與硫化銨作用，形成棕黑色的硫化鉛沉淀，由此就能顯示酸性磷酸酶在細胞內的存在與分布。主要試劑1.?? 10％中性福爾馬林(pH6．8～7．1)甲醛 10ml 蒸餾水 90ml 醋
堿性磷酸酶的染色檢測
實驗概要了解堿性磷酸酶的染色檢測方法。實驗原理本試驗是一個酶組織化學試驗，酶組織化學是在不破壞組織細胞的條件下，檢測酶的存在，定位與活性的學科，即在酶的存在，分布及其用在顯微鏡下變成可見的。生命是有序的，包括時間的有序及其空間的有序。其中美的空間有序性在于其細胞組織結構的精確位置，各種酶的自己的位置
酸性磷酸酶的顯示方法
實驗概要酸性磷酸酶能分解磷酸脂而釋放出磷酸基。在pH5.0的環境中，磷酸基能與鉛鹽反應形成磷酸鉛。但因其是無色的，所以再經過與硫化銨作用，形成棕黑色的硫化鉛沉淀，由此就能顯示酸性磷酸酶在細胞內的存在與分布。主要試劑10％中性福爾馬林(pH6.8～7.1)酸性磷酸酶作用液2％β—甘油磷酸鈉 4ml1％
前列腺酸性磷酸酶
中文名稱：前列腺酸性磷酸酶英文名稱及縮寫：Prostatic Acid Phosphatase （PAP）正常參考值：
酸性磷酸酶的顯示方法
實驗試劑1.?? 10％中性福爾馬林(pH6．8～7．1)甲醛 10ml 蒸餾水 90ml 醋酸鈉 2g2.?? 酸性磷酸酶作用液 蒸餾水 90ml 0．2mol／L醋酸緩沖液(pH4．6) 12ml 5％硝酸鉛 2ml3.?? 2％β—甘油磷酸鈉 4ml 先將蒸餾水和醋酸緩沖液混合，隨
酸性磷酸酶的顯示實驗
實驗方法原理 Gomori硝酸鉛改良法是根據：以磷酸酯為底物，其被磷酸酶水解后釋放出磷酸基，在pH5左右和鉛鹽結合成磷酸鉛鹽，但磷酸鉛無色，須經硫化銨作用使其變成棕黃色至棕黑色的硫化鉛沉淀。實驗材料 427細胞試劑、試劑盒 丙酮乙醇Gomori硝酸鉛作用液甲基綠硫化銨儀器、耗材 溫箱冰箱顯微鏡乳頭吸
酸性磷酸酶的測定實驗
實驗方法原理正磷酸單酯磷酸水解酶（最適酸度）。最適 pH 在 5 左右，描述 σ-磷酸硝基苯的堿性磷酸試驗系統可以用于酸性情況。鄰磷酸羧基苯＋H2O → 水楊酸＋Pi實驗材料酶樣品試劑、試劑盒乙酸緩沖液σ-磷酸硝基苯儀器、耗材分光光度計實驗步驟25℃時，持續 3 min0.1 ml 酶樣品25℃ 時
腺苷三磷酸酶的測定實驗
實驗方法原理ATP → ADP＋Pi很多 ATP 酶是與膜組分聯系在一起的酶，比如氧化磷酸化或離子轉運系統。在細胞勻漿中或膜懸浮物中必須測定它們的不溶性。實驗材料酶樣品試劑、試劑盒TES-TrisATPMgCl2BSA 溶液十二烷基硫酸鈉實驗步驟在 37 ℃ 下輕輕地振蕩培養 1 ml 含有 5～2
酸性磷酸酶的顯示實驗
實驗方法原理Gomori硝酸鉛改良法是根據：以磷酸酯為底物，其被磷酸酶水解后釋放出磷酸基，在pH5左右和鉛鹽結合成磷酸鉛鹽，但磷酸鉛無色，須經硫化銨作用使其變成棕黃色至棕黑色的硫化鉛沉淀。實驗材料427細胞試劑、試劑盒丙酮乙醇Gomori硝酸鉛作用液甲基綠硫化銨儀器、耗材溫箱冰箱顯微鏡乳頭吸管實驗步
酸性磷酸酶的顯示實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Gomori硝酸鉛改良法是根據：以磷酸酯為底物，其被磷酸酶水解后釋放出磷酸基，在pH5左右和鉛鹽結合成磷酸鉛鹽，但磷酸鉛無色，須經硫化
堿性磷酸酶的測定實驗
哺乳動物堿性磷酸酶 細菌堿性磷酸酶 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 酶樣品
酸性磷酸酶的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 正磷酸單酯磷酸水解酶（最適酸度）。最適 pH 在 5 左右，描述 σ-磷酸硝基苯的堿性磷酸試驗系統可以用于酸性情況。鄰磷酸羧基苯＋H2
腺苷三磷酸酶的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 ATP → ADP＋Pi很多 ATP 酶是與膜組分聯系在一起的酶，比如氧化磷酸化或離子轉運系統。在細胞勻漿中或膜懸浮物中必須
腺苷三磷酸酶的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 ATP → ADP＋Pi很多 ATP 酶是與膜組分聯系在一起的酶，比如氧化磷酸化或離子轉運系統。在細胞勻漿中或膜懸浮物中必須
酸性磷酸酶的顯示實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Gomori硝酸鉛改良法是根據：以磷酸酯為底物，其被磷酸酶水解后釋放出磷酸基，在pH5左右和鉛鹽結合成磷酸鉛鹽，但磷酸鉛無色，須經硫化
酸性磷酸酶染色的原理
（1）原理：血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下，將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解，釋放萘酚AS-BI，萘酚AS-BI與六偶氮付品紅偶聯，形成不溶性紅色沉淀，定位于胞質內，如果血細胞的胞質呈紅色為陽性反應，無紅色為陰性反應。 抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制備2份基質液，一份再加入適量L-酒石
酸性磷酸酶染色結果判斷
結果判斷：陽性結果為胞質中出現鮮紅色顆粒沉淀： ①（-）胞質無色。 ②（+）胞質出現淡紅色顆粒。 ③（++）胞質布滿鮮紅色顆粒。 ④（+++）胞質充滿深紅色顆粒。
堿性磷酸酶染色的原理
人血液和造血細胞的堿性磷酸酶pH值為9.4，主要見于中性粒細胞系的成熟階段或晚幼粒細胞。在不同生理狀態和病理狀態中均有明顯的改變，具有鑒別診斷意義。
酸性磷酸酶染色的原理
血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下，將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解，釋放萘酚AS-BI，萘酚AS-BI與六偶氮副品紅偶聯，形成不溶性紅色沉淀，定位于胞質內，如果血細胞的胞質呈紅色為陽性反應，無紅色為陰性反應。 抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制備2份基質液，一份再加入適量L-酒石酸，另一份不
堿性磷酸酶染色的原理
（偶氮偶聯法）：血細胞內的堿性磷酸酶在pH9.4～9.6的條件下將基質液中的α-磷酸萘酚鈉水解，產生α-萘酚與重氮鹽偶聯形成不溶性灰黑色沉淀，定位于酶活性所在之處。
小兒磷酸酶過少癥的檢查
在血清、骨骼、肝、腎、胰、腸黏膜、肺、腦膜和腦實質以及白細胞等組織中堿性磷酸酶減低或消失。病人及雜合子攜帶者的血和尿內均有大量的磷酸酰乙醇氨（PEA）。國外資料報告，尿和血漿PEA的正常值分別為17～99umol/dl，0.21～0.33umol/dl。腎臟PEA清除率正常值4～12ml/分。雜
鈣調磷酸酶的基本信息
中文名稱鈣調磷酸酶英文名稱calcineurin定 義依賴鈣和鈣調蛋白的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶。可激活磷酸化的轉錄因子NF-ATp，參與T細胞激活信號的轉導。環孢菌素A和FK506等可通過阻抑鈣調磷酸酶活性而發揮抑制T細胞活化的作用。應用學科免疫學（一級學科），免疫系統（二級學科），免疫分子（三級學
蛋白酪氨酸磷酸酶的簡介
1988年Tonks等首次在人的胎盤細胞中分離和純化了第一個37kDa的蛋白酪氨酸磷酸酶1B（ProteinTyrosine Phosphatase-1B，PTP-1B）。 PTP1B是一種胞內PTP，位于內質網，在人體的各種組織中都有表達；其與蛋白酪氨酸激酶（ProteinTyrosineK
鈣調磷酸酶的基本信息
中文名稱鈣調磷酸酶英文名稱calcineurin定 義依賴鈣和鈣調蛋白的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶。可激活磷酸化的轉錄因子NF-ATp，參與T細胞激活信號的轉導。環孢菌素A和FK506等可通過阻抑鈣調磷酸酶活性而發揮抑制T細胞活化的作用。應用學科免疫學（一級學科），免疫系統（二級學科），免疫分子（三級學
焦磷酸酶的基本信息
焦磷酸酶是作用于雙磷酸鍵上的酸酐水解酶。是一種催化一分子焦磷酸鹽轉化為兩分子磷酸鹽離子的酶。