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對骨髓基質干細胞進行改造,使其在保持快速生長的同時向成骨細胞方向分化是目前國內外研究的熱點。實驗發現,成熟的成骨細胞可以通過細胞間的直接接觸作用促進骨髓基質干細胞增殖[ 1 ] ,此外成骨細胞可產生多種生長因子促進其骨髓基質干細胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基質干細胞通過誘導向成骨細胞分化后,難以再與原有的成骨細胞區分開,因此,本實驗將骨髓基質干細胞與成骨細胞以1∶1 的比例直接混合培養,同時將成骨細胞和骨髓基質干細胞在與混合培養細胞完全相同的條件下單獨進行培養并取其平均值作為對照,以細胞計數、細胞堿性磷酸酶(ALP) 染色陽性率、細胞培養液上清中堿性磷酸酶含量、細胞形成鈣結節數目為觀察指標,將混合培養細胞與相應成骨細胞及骨髓基質干細胞指標的平均值進行比較,觀察兩者的區別。 1 材料與方法 1 .1 材料 無酚紅DMEM 培養液(Hyclon 公司)、胎牛血清(杭州四季清公司)、淋巴細胞分離液......閱讀全文
對骨髓基質干細胞進行改造,使其在保持快速生長的同時向成骨細胞方向分化是目前國內外研究的熱點。實驗發現,成熟的成骨細胞可以通過細胞間的直接接觸作用促進骨髓基質干細胞增殖[ 1 ] ,此外成骨細胞可產生多種生長因子促進其骨髓基質干細胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基質干細胞通過誘導向成骨細胞分化后,
實驗方法原理采用植塊培養方法時，用少量培養液孵育，使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時，將松質骨切成 2~5 mm 大小，用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶，用 F12 培養液培養。 實驗材料骨標本試劑、試劑盒Hams F1
成骨細胞原代培養實驗 實驗方法原理 采用植塊培養方法時，用少量培養液孵育，使骨組織塊貼附于培養瓶。
實驗方法原理 采用植塊培養方法時，用少量培養液孵育，使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時，將松質骨切成 2~5 mm 大小，用膠原蛋白
酶消化法 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨，以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養
大鼠乳鼠成骨細胞培養培養可以：（1）獲得大鼠乳鼠成骨細胞；（2）用于骨修復的細胞學機制研究。實驗方法酶消化法實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨，以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養，采用膠原酶消化法分離成骨細胞，并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快
酶消化法 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨，以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養
美國加州大學圣地亞哥分校研究人員開發出一種簡單高效的方法，通過給人類多能干細胞“喂”腺苷，誘使其分化為成骨細胞，進而生成骨骼組織。實驗表明，利用該方法生成的骨骼組織可很好地修復小鼠的顱骨缺陷，而不會發展出腫瘤或造成感染。 多能干細胞有能力變成任何類型的細胞，這一過程被稱為分化。正因為多能干細
美國加州大學圣地亞哥分校研究人員開發出一種簡單高效的方法，通過給人類多能干細胞“喂”腺苷，誘使其分化為成骨細胞，進而生成骨骼組織。實驗表明，利用該方法生成的骨骼組織可很好地修復小鼠的顱骨缺陷，而不會發展出腫瘤或造成感染。 多能干細胞有能力變成任何類型的細胞，這一過程被稱為分化。正因為多能干細
實驗材料：1. 骨組織來源：新生或胚胎大鼠、兔、人類胚胎或手術切除之骨組織；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅡ型膠原酶溶液；4. 培養液：RPMI 1640培養基，配制培養液