昆蟲細胞的低MOI桿病毒感染
感染懸浮細胞是使桿病毒系統生產蛋白的普遍方法。懸浮培養的細胞很容易從10ml擴大到100L。一般來說，懸浮的細胞在無血清的培養液中培養。這種培養液許多公司有售，比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Systems等，用起來都不錯，盡管由于細胞株和目的蛋白的不同，效果有所差異。最好是將目的蛋白和細胞株用不同的培養液做一個表達試驗，選出表達效果最好的一種培養液。在進行這個表達試驗之前要先使你的細胞株分別適應不同的培養液（見上文），否則試驗結果不具有代表性。注意：為了優化表達，你必須了解你的細胞的生長參數；為了方便新手，我將列出一些生長參數通常的值。我最喜歡的Sf9細胞株可以最低以2×105細胞/ml的濃度分裝，并且恢復幾乎沒有滯后期。在對數期，20個小時細胞數目就可以翻倍，濃度最高可以達到5×106細胞/ml。下面的實驗步驟將以上面列出的......閱讀全文
昆蟲細胞的低MOI桿病毒感染
感染懸浮細胞是使桿病毒系統生產蛋白的普遍方法。懸浮培養的細胞很容易從10ml擴大到100L。一般來說，懸浮的細胞在無血清的培養液中培養。這種培養液許多公司有售，比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Sys
昆蟲細胞--高MOI桿病毒感染
高MOI（?Multiplicity Of Infection，等于用于感染的病毒數目與細胞數目的比值）感染是生產蛋白的最好方法。這有兩個原因。一是不用考慮DIP（Defective Interfering Particles，即只包裝入部分基因組的病毒顆粒）的形成，因為關心的是細胞或者培養液中的蛋
腺病毒感染細胞時，一般用多大的MOI值比較好
- 不同的病毒感染不同的細胞效率有所不同,要多少MOI感染,我一般會做一個梯度實驗,以24h出現熒光的細胞數80%以上為最佳。
昆蟲細胞的擴增
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。 實驗材料 Sf9細胞 二甲基亞砜
昆蟲細胞的擴增
實驗方法原理?用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料?Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒?生長培養液儀器、耗材?培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟 常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞（( ATCC # CR
昆蟲細胞的擴增
實驗方法原理用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒生長培養液儀器、耗材培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞（( ATCC # CRL-171
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料昆蟲細胞試劑、試劑盒胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟1. ?接種2x106個Sf9細胞于60 mm 培養皿，在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養，于27℃培養30~60 min，讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿，吸取40 ul 無菌
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料 昆蟲細胞試劑、試劑盒 胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材 培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2×106個Sf9細胞于60 mm 培養皿，在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養，于27℃培養30~60 min，讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿，吸取40
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒