昆蟲細胞的擴增
實驗方法原理用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒生長培養液儀器、耗材培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞（( ATCC # CRL-1711 ) 或從甘藍環 Trichoplusia ni 獲得的細胞系（Tn 368 或 BTI-TN-5B1-4，也稱 “High Five ”，可從 Invitrogen 購買））法使細胞從培養瓶中脫落，或者利用在旋轉瓶中懸浮生長的細胞。2. 用血細胞計數板計數細胞，通過用臺盼藍或萘黑染色檢査細胞的活力。3. 以 0.5~1×106 個/ml 活細胞密度將細胞種植于旋轉培養瓶內，每 500 ml 旋轉瓶內注入 20~100 ml 細胞懸液。4. 在 20~28°C 條件下培養細胞，以 37°C 為佳。5. 每 48~72 h ......閱讀全文
昆蟲細胞的擴增
實驗方法原理?用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料?Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒?生長培養液儀器、耗材?培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟 常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞（( ATCC # CR
昆蟲細胞的擴增
實驗方法原理用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒生長培養液儀器、耗材培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞（( ATCC # CRL-171
昆蟲細胞的擴增
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。 實驗材料 Sf9細胞 二甲基亞砜
方案27.7－昆蟲細胞的擴增
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用機械法從細胞單層分離細胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。 實驗材料 Sf9細胞 二甲基亞砜
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料 昆蟲細胞試劑、試劑盒 胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材 培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2×106個Sf9細胞于60 mm 培養皿，在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養，于27℃培養30~60 min，讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿，吸取40
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料昆蟲細胞試劑、試劑盒胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟1. ?接種2x106個Sf9細胞于60 mm 培養皿，在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養，于27℃培養30~60 min，讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿，吸取40 ul 無菌
昆蟲細胞的保存培養實驗
基本方案 實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾（Sf 9）細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 70％乙醇 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
昆蟲細胞的保存培養實驗
實驗材料草地夜蛾（Sf 9）細胞試劑、試劑盒70％乙醇0.4％(m V)臺盼藍儀器、耗材無血清昆蟲細胞培養基60 mm 培養皿或 25 cm2 培養瓶 27℃ 培養箱旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐實驗步驟1. 將 3 ml 含 10％ 胎牛血清的昆蟲細胞培養基 TNM-FH
昆蟲細胞的保存培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾（Sf 9）細胞試劑、試劑盒 70％乙醇0.4％(m V)臺盼藍儀器、耗材 無血清昆蟲細胞培養基60 mm 培養皿或 25 cm2 培養瓶 27℃ 培養箱旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐實驗步驟 1. 將 3 ml 含 10％ 胎牛血清的昆蟲細
昆蟲細胞的保存培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾（Sf 9）細胞
昆蟲細胞的保存和培養實驗
實驗材料昆蟲試劑、試劑盒胎牛血清臺盼藍乙醇儀器、耗材培養瓶培養箱細胞計數器攪拌臺轉子離心機實驗步驟1. ?將4 ml 含10%胎牛血清的完全昆蟲細胞培養基加入一個25 cm2?培養瓶。取出一支凍存Sf9細胞的安瓿，迅速置于37℃水浴，用手前后劇烈搖動融化之，當安瓿的內容物幾乎完全融化時，將安瓿浸入7
昆蟲細胞的保存和培養實驗
實驗材料 昆蟲試劑、試劑盒 胎牛血清臺盼藍乙醇儀器、耗材 培養瓶培養箱細胞計數器攪拌臺轉子離心機實驗步驟 1. ?將4 ml 含10%胎牛血清的完全昆蟲細胞培養基加入一個25 cm2 培養瓶。取出一支凍存Sf9細胞的安瓿，迅速置于37℃水浴，用手前后劇烈搖動融化之，當安瓿的內容物幾乎完全融化時，將安
昆蟲細胞共轉染實驗
實驗材料草地夜蛾（Sf 9）細胞含目的基因的重組桿狀病毒轉移質粒陽性對照載體：pVL 1392 - XylE試劑、試劑盒ORF 1629 缺失的線性 AcMNPV DNA轉染緩沖液 B轉染緩沖液A500 mmol／L 兒茶酚／50 mmol／L 硫酸氫鈉儀器、耗材含 10％ 胎牛血清（FBS）的 T
昆蟲細胞共轉染實驗
實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾（Sf 9）細胞含目的基因的重組桿狀病毒轉移質粒陽性對照載體：pVL 1392 - XylE試劑、試劑盒 ORF 1629 缺失的線性 AcMNPV DNA轉染緩沖液 B轉染緩沖液A500 mmol／L 兒茶酚／50 mmol／L 硫酸氫鈉儀器、耗材 含 10％ 胎牛
昆蟲細胞共轉染實驗
基本方案 用線性化桿狀病毒DNA ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾（Sf 9）細胞
桿狀病毒昆蟲細胞表達系統
實驗步驟一、桿狀病毒表達載體最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒，其基因組含有一段外源核酸序列，通常為編碼目標蛋白質的dDNA，在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成，其位于病毒基因組多角體座位，替代了非必需的野生型多角體基因。在實驗室中
桿狀病毒昆蟲細胞表達系統
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒，其基因組含有一段外源核酸序列，通常為編碼目標蛋白質的dDNA，在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
干細胞的擴增及分化
干細胞的擴增因為干細胞的數量很小，所以有必要在體外擴增干細胞。為了克服干細胞頻率低的局限性，研究人員致力于開發自體干細胞擴增的方法。然而，在長期擴增過程中保持干細胞的未分化、多系潛能是很重要的。在臨床應用中，理想的方法需要開發由已知細胞因子和生長因子支持的無血清和無基質自體系統。干細胞分化干細胞研究
CD34+－細胞的擴增
實驗概要CD34 ?細胞的擴增主要試劑DPBS、HSCs培養液主要設備超凈臺，倒置顯微鏡，移液槍，細胞計數器實驗步驟（1）分選得到CD34 細胞后用HSC培養液在培養板上進行懸浮培養。（2）每隔2～3天進行半量換液，并進行細胞計數得到生長曲線，培養至19天時細胞增殖約260倍。
昆蟲sf9細胞的直徑為多少
17nm左右。sf9是一種生物學實驗常用的昆蟲細胞，通常作為昆蟲平臺用來生產各種蛋白、病毒，或用于基礎研究。sf9 是Spodoptera frugiperda cell 的縮寫，即草地貪夜蛾細胞，草地貪夜蛾也稱草地夜蛾。這些細胞系絕大多數來自于鱗翅目和雙翅目的農業害蟲，其來源組織包括卵巢、精巢、胚
昆蟲細胞的低MOI桿病毒感染
感染懸浮細胞是使桿病毒系統生產蛋白的普遍方法。懸浮培養的細胞很容易從10ml擴大到100L。一般來說，懸浮的細胞在無血清的培養液中培養。這種培養液許多公司有售，比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Sys
細胞化學詞匯基因擴增
基因擴增是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程。
細胞化學詞匯DNA擴增
中文名稱：DNA擴增英文名稱：DNA amplification定 義：一段特定的DNA序列拷貝數增加的過程。可發生在體內或體外。體內擴增的DNA序列可以是經過轉化進入細胞的外源DNA或染色體自身的一段基因組DNA；體外擴增可通過聚合酶鏈反應獲得。此外，某些特定的細胞信號或環境因子會導致腫瘤細胞不
細胞擴增倍數怎么算
采用DAPI細胞計數法，記錄擴增前細胞總數，再記錄擴增末細胞總數，以后者除以前者MTT法，分時間點記錄細胞總體活力，以后時間點的除以前時間點的。消化細胞計數法，總之，就是用擴增后的細胞總數，除以擴增前的細胞總數。如已知細胞的分裂周期，擴增時間，也可以數學方法粗略計算即2^（擴增時間/分裂周期）括號內
昆蟲細胞高MOI桿病毒感染
高MOI（?Multiplicity Of Infection，等于用于感染的病毒數目與細胞數目的比值）感染是生產蛋白的最好方法。這有兩個原因。一是不用考慮DIP（Defective Interfering Particles，即只包裝入部分基因組的病毒顆粒）的形成，因為關心的是細胞或者培養液中的蛋
桿狀病毒昆蟲細胞表達系統2
五、親代桿狀病毒基因組的改進就像轉移質粒的改進，對親代桿狀病毒基因組的改進也是為了滿足各種不同的需要。起初，最主要的目的是找到克服重組桿狀病毒載體構建和分離低效率的方法，這也是最初的桿狀病毒-昆蟲細胞系統存在的主要問題。現在已經知道這個問題的根源在于, 在共轉染的昆蟲細胞系中，轉移質粒和親代桿狀病毒
桿狀病毒昆蟲細胞表達系統3
七、桿狀病毒表達載體的新一代昆蟲細胞宿主最早的鱗翅類昆蟲細胞的遺傳轉化技術出現在1990年（Jarvisetal.，1990)。那時，研發該技術的初衷在于構建一個穩定轉化的昆蟲細胞系，它旨在能夠持續生產目標重組蛋白而無需使用桿狀病毒進行感染。然而, 構建這個生產用細胞系所用的載體及方法也為構建具有新
人－T－細胞的克隆和擴增
實驗步驟基 本 方案 精編免疫學實驗指南, 第章材 料用可溶性抗原誘導特異性自體 T 細胞克隆時：外周 血 單 個 核 細 胞（P B M C ; 單 元 8.1)，來自抗原致敏的個體，作為反應細胞待 測 抗 原（抗原或抗原肽）照射滅活的自體或 H L A 匹配的同種異體 P B M C ，用作抗原