細胞生長檢測1:[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數
[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數1.用RPMI-1640培養液洗滌對數生長期(培養3天)的CTLL-2細胞兩次,每次250×g離心10分鐘,洗去培養液中殘存的IL-2。2.用臺盼藍(1% Trypan blue)染色法計數細胞并決定細胞的活力,用10%小牛血清的RPMI-1640培養液懸浮細胞至1×105/ml。3.在96孔細胞培養板中每孔加0.1ml倍比稀釋的標準IL-2或待測樣品,每個稀釋度三個復孔,標準IL-2從40 IU/ml稀釋到0.019 IU/ml(8~10個稀釋度),陰性對照孔不加IL-2。4.每孔加0.1ml細胞懸液,在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養18~24小時。每孔加10μl(0.5μCi或1.85×104Bq)[3H]脫氧胸苷,繼續培養4小時。5.用多頭細胞收集器將細胞收集到玻璃纖維濾紙上,用3%醋酸水溶液濾紙3次,洗去游離的[3H]TdR。將濾紙置液體閃......閱讀全文
細胞生長檢測1:[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數
[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數1.用RPMI-1640培養液洗滌對數生長期(培養3天)的CTLL-2細胞兩次,每次250×g離心10分鐘,洗去培養液中殘存的IL-2。2.用臺盼藍(1%?Trypan blue)染色法計數細胞并決定細胞的活力,用10%小牛血清的RPMI-1640培養液懸浮細胞至1×
[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數
[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數:1、用RPMI-1640培養液洗滌對數生長期(培養3天)的CTLL-2細胞兩次,每次250×g離心10分鐘,洗去培養液中殘存的IL-2。2、用臺盼藍(1% Trypan blue)染色法計數細胞并決定細胞的活力,用10%小牛血清的RPMI-1640培養液懸浮細胞至1
細胞介導細胞毒作用檢測法2:[3H]脫氧胸苷釋放法
[3H]脫氧胸苷釋放法1)標記靶細胞1.用含5%小牛血清的RPMI-1640培養液將靶細胞配成2×106/ml,取10μCi(370kBq)[3H]TdR加到1ml靶細胞中,37℃水浴標記4~6小時,每30分鐘搖晃一次。2.用RPMI-1640培養液洗滌細胞3次,每次400×g 10分鐘。用含5%小
細胞生長檢測9:染料染色法測定細胞數
染料染色法測定細胞數1)結晶紫檢測法1.在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104~10×4?WEHI-164細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),37℃?5%?CO2的二氧化碳培養箱中培養2~3小時,讓細胞帖壁。2.用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標準品,
細胞生長檢測方法:染料染色法測定細胞數
一、結晶紫檢測法1、在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104 ~104 WEHI-164細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),37℃ 5% CO2 的二氧化碳培養箱中培養2~3小時,讓細胞帖壁。2、用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標準品,根據需要3~5倍遞
細胞生長檢測6:AlamarBlueTM攝入法
AlamarBlueTM攝入法1.按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。2.在培養結束前24小時加入Alamar Blue染料,96孔細胞培養板每孔20μl。3.在培養結束后,直接在酶聯檢測儀上測定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,用OD570減去OD
細胞生長檢測方法:AlamarBlueTM攝入法
AlamarBlueTM 攝入法 1、按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。 2、在培養結束前24小時加入Alamar Blue染料,96孔細胞培養板每孔20μl。 3、在培養結束后,直接在酶聯檢測儀上測定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,
細胞化學詞匯胸苷酸
中文名稱:胸苷酸英文名稱:Thymidine-5'-monophosphoric acid英文別名:thymidine 5-monophosphate free acid; thymidine 5-(dihydrogen phosphate); 1-(2-deoxy-5-O-phosphon
細胞化學詞匯胸苷一磷酸
中文名稱:胸苷一磷酸英文名稱:thymidine monophosphate;TMP定 義:通常指脫氧胸苷一磷酸(dTRMP)。由脫氧胸苷與一個磷酸基團連接而成的化合物。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞化學詞匯胸苷三磷酸
中文名稱:胸苷三磷酸英文名稱:thymidine triphosphate;TTP定 義:通常指脫氧胸苷三磷酸(dTTP)。由(脫氧)胸苷與三個磷酸基團連接而成的化合物。胸苷-5′-三磷酸是DNA合成的原料之一。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞化學詞匯胸苷二磷酸
中文名稱:胸苷二磷酸英文名稱:thymidine diphosphate;TDP定 義:通常指脫氧胸苷二磷酸(dTDP)。由(脫氧)胸苷與兩個磷酸基團連接而成的化合物。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
表皮干細胞形態及動力學特征
顯微鏡下表皮干細胞形態較為原始,體積小,核大,核漿比例大,流式細胞儀分析表皮干細胞多數處于靜止期、DNA合成前期,其分裂增殖活動相對靜止(在活體內注射3H標記的脫氧胸苷或溴化脫氧尿苷(BrdU,可標記細胞的DNA)后其標記可在表皮干細胞中長期保持不變,而其他如短暫增殖細胞等隨著細胞的不斷分裂增殖
表皮干細胞形態及動力學特征
顯微鏡下表皮干細胞形態較為原始,體積小,核大,核漿比例大,流式細胞儀分析表皮干細胞多數處于靜止期、DNA合成前期,其分裂增殖活動相對靜止(在活體內注射3H標記的脫氧胸苷或溴化脫氧尿苷(BrdU,可標記細胞的DNA)后其標記可在表皮干細胞中長期保持不變,而其他如短暫增殖細胞等隨著細胞的不斷分裂增殖其標
細胞化學詞匯-脫氧鳥苷酸
中文名稱:脫氧鳥苷酸英文名稱:deoxyguanylic acid定 義:脫氧鳥苷的磷酸酯。視連接部位不同,有脫氧鳥苷3′-磷酸(3′-脫氧鳥苷酸)和脫氧鳥苷5′-磷酸(5′-脫氧鳥苷酸)兩種。體內通常是5′-磷酸酯。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞化學詞匯脫氧鳥苷酸
中文名稱:脫氧鳥苷酸英文名稱:deoxyguanylic acid定 義:脫氧鳥苷的磷酸酯。視連接部位不同,有脫氧鳥苷3′-磷酸(3′-脫氧鳥苷酸)和脫氧鳥苷5′-磷酸(5′-脫氧鳥苷酸)兩種。體內通常是5′-磷酸酯。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞化學詞匯脫氧胞苷一磷酸
中文名稱:脫氧胞苷一磷酸英文名稱:deoxycytidine monophosphate;dCMP定 義:由脫氧胞苷與一個磷酸基團連接而成的化合物。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞化學詞匯脫氧鳥苷一磷酸
中文名稱:脫氧鳥苷一磷酸英文名稱:deoxyguanosine monophosphate;dGMP定 義:由脫氧鳥苷和一個磷酸基團連接而成的化合物。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶-poly(-A)+RNA
大多數哺乳動物的信使 RNA( mRNA) 都帶冇 poly( A)+ 尾 ,使用本方案可以將帶Poly ( A) +的 RNA 從總 RNA 中分離出來。試劑、試劑盒NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素DEPC 處理的水1X 加樣緩沖液洗脫緩沖液NaAc(pH5.2)乙醇TE
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶-poly(-A)+RNA
試劑、試劑盒 NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素DEPC 處理的水1X 加樣緩沖液洗脫緩沖液 NaAc(pH5.2)乙醇 TE 緩沖液。。實驗步驟 一 材料與設備1 ) 5 mol/L NaOH2 ) 寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素3) DEPC 處理的水4)
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶-poly(-A)+RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素 DEPC 處理的水 1X 加樣緩沖液 洗脫緩沖液 NaAc(pH5.2)
細胞化學詞匯脫氧鳥苷三磷酸
(GTP)即是鳥嘌呤-5'-三磷酸。在生物化學的全名為9-β-D-呋喃核糖鳥嘌呤-5'-三磷酸,或者是9-β-D-呋喃核糖-2-氨基-6-氧-嘌呤-5'-三磷酸。GTP是DNA復制時的引物(Primer,其實是RNA)和轉錄(即是mRNA的生物合成)時的鳥嘌呤核苷酸的提供者。
細胞化學詞匯-脫氧鳥苷二磷酸
中文名稱:脫氧鳥苷二磷酸英文名稱:deoxyguanosine diphosphate;dGDP定 義:由脫氧鳥苷和兩個磷酸基團連接而成的化合物。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞化學詞匯脫氧鳥苷二磷酸
中文名稱:脫氧鳥苷二磷酸英文名稱:deoxyguanosine diphosphate;dGDP定 義:由脫氧鳥苷和兩個磷酸基團連接而成的化合物。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
細胞增殖檢測:3H同位素滲入實例
一、原理?淋巴細胞在有絲分裂原PHA、ConA 等的刺激下,產生增殖反應,DNA和RNA合成明顯增加,如在培養液中加入3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),則可被轉化中的細胞攝入。測定標記淋巴細胞的放射強度可反映淋巴細胞增殖的程度。?二、儀器和材料?RPMI-1640 細胞培養液、小牛血清、2-巰
細胞生長檢測——直接計數細胞
1、如果靶細胞是帖壁細胞,在細胞因子作用適當時間后,用生理鹽水洗去死亡細胞,用0.25%胰蛋白酶液消化細胞。加適量生理鹽水吹打,使細胞分散成單個細胞。直接在血細胞計數板上計數細胞。2、如果靶細胞是懸浮細胞,則需要用染色劑區分死細胞和活細胞然后再計數。通常用臺盼藍染色細胞,活細胞可以排除進入細胞的臺盼
染料染色法測定細胞數
結晶紫檢測法: 1、在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2~3小時,讓細胞帖壁。 2、用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標準品,根據需要3
細胞增殖檢測:3H同位素滲入法實例
樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源的、具有遷移能力的免疫細胞,是目前發現的功能最強大的抗原遞呈細胞(APC)。 DC 是機體適應性 T 細胞免疫應答的始動者,主要在(1)腫瘤免疫反應(2)在疫苗生產過程中分別起著至關重要的作用。實驗方法原理樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來
細胞生長檢測10:直接計數細胞
直接計數細胞1.如果靶細胞是帖壁細胞,在細胞因子作用適當時間后,用生理鹽水洗去死亡細胞,用0.25%胰蛋白酶液消化細胞。加適量生理鹽水吹打,使細胞分散成單個細胞。直接在血細胞計數板上計數細胞。2.如果靶細胞是懸浮細胞,則需要用染色劑區分死細胞和活細胞然后再計數。通常用臺盼藍染色細胞,活細胞可以排除進
免疫印跡法測定乳腺腫瘤患者胸苷激酶
【摘要】 目的 探討用免疫印跡發光法,檢測乳腺腫瘤患者血清細胞質胸苷激酶(TK1)的研究及臨床應用。方法 利用抗胸苷激酶單克隆抗體(anti-TK1mAb)建立點免疫印跡發光法,分析乳腺腫瘤患者、非腫瘤患者和體檢健康者血清TK1的水平。結果 術前的乳腺癌患者、乳腺良性腫瘤患者、非腫瘤患者和體檢健康者
胸苷的用途
用作醫藥中間體,用于合成抗病毒和抗HIV藥