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    細胞生物基本方法:神經組織細胞培養

    神經組織細胞培養1.獲取腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,腦組織比較柔軟,反復吹打即可制成細胞懸液。2.為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5~10分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等雜物易漂浮于懸液表層,吸除上清,如此反復二三次可獲得較多的細胞成分。3.向末次沉淀物中加入適量營養液,通過紗網或紗布濾過,計數細胞并調整好細胞密度,接種入培養瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養。4.細胞生長匯合后,可用0.25%胰蛋白酶消化法做傳代處理,加消化液的量以能覆蓋細胞層即可,待細胞開始從瓶壁脫離(平均5~10分鐘),加入含有血清培養液,吹打制成細胞懸液。......閱讀全文

    細胞生物基本方法:神經組織細胞培養

    神經組織細胞培養1.獲取腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,腦組織比較柔軟,反復吹打即可制成細胞懸液。2.為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5~10分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等雜物易漂浮于懸液表

    細胞生物基本方法:肌組織細胞培養

    肌組織細胞培養1)骨骼肌細胞培養1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養基加10%小牛血清培養,為促進分化可加1%的胎汁。3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化

    細胞生物基本方法:結締組織類細胞培養

    結締組織類細胞培養 1)成纖維細胞培養 用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養;如為人胚,可取皮膚培養。幼兒包皮是培養成纖維細胞的很好對象。 ? 2)??巨噬細胞培養 1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內)

    細胞生物基本方法:腫瘤細胞培養

    腫瘤細胞培養特殊之處在于成纖維細胞的排除(成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長,致難以純化腫瘤組織)。有以下一些方法:1.機械刮除法2.反復帖壁法3.消化排除法4.膠原酶消化法?1)??機械刮除法1.標記:鏡下觀察,用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位。2.刮除:棄掉培養液,把無菌膠刮伸入

    肌組織細胞培養實驗——神經組織細胞培養實驗

    實驗方法原理神經組織主要由兩種神經細胞(神經元)和神經膠質細胞組成。神經元為高度分化的細胞,在組織發生晚期已失掉增殖能力,對生存條件要求高,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或在加入神經生長因子(NGF)和膠質細胞因子時,才能生存,并可能出現一定程度的分化現象,如長出突起等,但卻難使之增殖;即使

    細胞生物基本方法:上皮細胞培養

    上皮細胞培養1)表皮細胞培養1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。5.

    神經膠質細胞培養方法

    神經細胞(神經元)不易培養,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或加入神經生長因子和膠質細胞因子時,可出現一定程度的分化,長出突起等現象,但很難使之增殖。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養,不僅能獲得生長的膠質細胞,也可形成能傳代的二倍體細胞系。一

    神經膠質細胞培養方法

    神經細胞(神經元)不易培養,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或加入神經生長因子和膠質細胞因子時,可出現一定程度的分化,長出突起等現象,但很難使之增殖。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養,不僅能獲得生長的膠質細胞,也可形成能傳代的二倍體細胞系。一

    細胞生物基本方法:常規組織培養法

    常規組織培養法1)初代消化培養法1.??????準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.??????布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。3.??????處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染

    細胞培養基本方法

    = 細胞培養基本方法 =?(一)準備和安裝過濾器 (二)合成培養基的配制 (三)小牛血清的處理 (四)生長培養基的配制(五)凍存細胞的復蘇  (六)傳代       (七)凍存      (八)注意事項 (一)準備和安裝過濾器   清洗好過濾器,干燥,放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜,用布包裝好,

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