Western雜交
Western雜交l 組織印跡的Western雜交在硝酸纖維素膜上制備組織印跡1.在塑料板上放置兩層Whatman 1號濾紙,在濾紙上方放上一張普通紙,然后鋪上一層硝酸纖維素膜。2.用雙面刀片從植物組織如大豆的莖上切取一塊切片(厚度約為1mm)。如果組織表面是濕的,則在Kimwipes紙上輕輕吸干或用蒸餾水洗滌幾秒鐘然后再用Kimwipes紙吸干。用鑷子將組織切片轉移到硝酸纖維素膜上,注意一旦將切片放置在膜上以后就不得再移動切片。在切片上放置4層Kimwipes紙,用手指輕輕壓15到20秒,用鑷子小心拿開紙和組織切片。組織切片經甲苯酸藍染色后觀察其解剖結構。3.將留有組織印跡的硝酸纖維素膜在空氣中晾干。4.將留有印跡的膜面向下,放入載玻片上的一滴甲苯酸藍溶液中,對組織切片進行染色。2~3分鐘后,吸干多余的染料,用間接照明立刻照相。將載玻片翻轉,透過玻璃拍攝染色......閱讀全文
Western雜交
Western雜交l??????組織印跡的Western雜交在硝酸纖維素膜上制備組織印跡1.在塑料板上放置兩層Whatman 1號濾紙,在濾紙上方放上一張普通紙,然后鋪上一層硝酸纖維素膜。2.用雙面刀片從植物組織如大豆的莖上切取一塊切片(厚度約為1mm)。如果組織表面是濕的,則在Kimwipes紙上
Western-雜交
Western?雜交(主要內容如下)Preparing of Protein LysatesWestern BlottingFar Western BlottingSemi Dry BlottingStripping MembranesTrouble Shooting and OthersPrepa
Western雜交
實驗概要本實驗介紹了Western雜交的基本流程。主要試劑液氮,提取緩沖液(1 x PBS,10ug/mL ?Leupeptin,1 mM PMSF,5 mMBenzamidine. 2mM EDTA),轉移緩沖液(39mM Glycine,48mM ?Tris,0.037% SDS,20%甲醇),
Western雜交
實驗概要本實驗介紹了Western雜交的基本流程。主要試劑液氮,提取緩沖液(1 x PBS,10ug/mL ?Leupeptin,1 mM PMSF,5 mMBenzamidine. 2mM EDTA),轉移緩沖液(39mM Glycine,48mM ?Tris,0.037% SDS,20%甲醇),
組織印跡的Western雜交
組織印跡的Western雜交 在硝酸纖維素膜上制備組織印跡 1.在塑料板上放置兩層Whatman 1號濾紙,在濾紙上方放上一張普通紙,然后鋪上一層硝酸纖維素膜。 2.用雙面刀片從植物組織如大豆的莖上切取一塊切片(厚度約為 1mm)。如果組織表面是濕的,則在Kimwipes紙上輕輕吸干
Northern雜交、Southern雜交和Western雜交有什么區別
區別:研究的對象不同。southern主要的對象是DNA,northern研究的對象是RNA,而western研究的對象為蛋白質。1、Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段
Northern雜交、Southern雜交和Western雜交有什么區別
區別:研究的對象不同。southern主要的對象是DNA,northern研究的對象是RNA,而western研究的對象為蛋白質。1、Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段
Northern雜交、Southern雜交和Western雜交有什么區別
區別:研究的對象不同。southern主要的對象是DNA,northern研究的對象是RNA,而western研究的對象為蛋白質。1、Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段
Western的雜交有哪些過程
Western雜交的總體過程也與Southern雜交相似,印跡轉移的是蛋白質,這種將蛋白質樣品從SDS-PAGE凝膠通過電轉移方式轉移到濾膜的方法,稱為Western:blotting。其雜交過程不是真實意義的分子雜交,而是通過抗體以免疫反應形式檢測濾膜上是否存在被抗體識別的蛋白質,并判斷其分子量。
northern,southern,western雜交的具體步驟
所用于分析的對象不同。 Northern雜交用于分析RNA; Southern雜交用于分析DNA; Western雜交用于分析蛋白質。大致過程如下: (1) 酶切DNA, 凝膠電泳分離各酶
Western-Blotting
實驗概要Western Blot (AP)主要試劑1. Membrane Blocking buffer:5% Milk ? 0.05% of Tween 20 PBS2. antibody dilution buffer: PBS 0.05% of Tween20 1.0% Milk(or BSA
Western-Blotting
1. Optional: "Renature" gel- this is thought to permit some refolding of proteins and may be important in finding epitope recognition of monoclonal an
Western實驗步驟
一、樣品制備?對于Western Blotting實驗而言,樣品處理是關鍵步驟之一,獲得的蛋白樣品必須均質、可溶,并解離成單個多肽亞基,且盡量減少相互間的聚集,使其最終僅依賴本身的分子量大小進行分離。當目標蛋白的含量很低時,需要選取目標蛋白含量較高的組織或細胞器(如核抽提物),或者通過免疫沉淀等方式
Western-Blotting-Protocol
實驗概要The western blot ?(sometimes called the protein immunoblot) is a widely used analytical ?technique used to detect specific proteins in the given s
Western-Blot-(AP)
主要試劑1. Membrane Blocking buffer:5% Milk ? 0.05% of Tween 20 PBS2. antibody dilution buffer: PBS 0.05% of Tween20 1.0% Milk(or BSA)?3. washing buffer:?
Smolke:Protocols/Western
OverviewBlotting for large V5-tagged proteins in?S. cerevisiaeMaterialsY-PER (Pierce)Halt EDTA-free Protease Inhibitor (Pierce)NuPAGE Novex Bis-Tris 4
Immunoblotting-(Western-Blotting)
實驗概要We provide a protocol for SDS-PAGE, Protein Blotting, Immuno-Detection.主要試劑1.?0.3 M TRIZMA? base (Product No. T1503), 20% methanol.2.?0.025 M TRIZ
Silver:-Lysate-for-Western
Grow cellsHarvestSpin downWash with PBSSpin down enough cells to collect a 50-100 μL cell pellet in a FastPrep tubePrepare lysis buffer (beforehand) a
Stripping-Western-Blots
1) After ECL development, wash membrane once for 10min with PBST.2) Incubate the membrane in stripping buffer (see below) in a heat-sealed plastic bag
Western-Blotting-Protocols
back to topProtocolStandard vs. Rapid Immunodetection ProceduresThere are two types of protocols for immunodetection: Standard and rapid.Standard vs.
Western印跡法
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體,并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體,它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器:高壓鍋、玻璃勻漿
Western-bloting-技術
一、實驗目的與原理Western bloting技術是用來檢測蛋白表達的特定的靈敏的方法,由蛋白質的SDS-PAGE、電轉及雜交幾部分組成。雜交技術主要有NC膜封閉,靶蛋白與第一抗體的反應,結合靶蛋白的一抗和二抗的反應,顯色等組成。將凝膠上的蛋白質轉移到NC膜上,用其他蛋白作為封閉液,將膜上余下的其
Western-bloting-綜述
摘要:本文主要是針對Western bloting的原理及操作進行了簡單的闡述,Western印跡法是利用抗原抗體的免疫反應,先將蛋白通過SDS-PAGE電泳分離開來,然后再利用電場力的作用將膠上的蛋白轉移到固相載體(NC膜)上,然后再加抗體形成抗原抗體復合物,利用發光或顯色原理將結果顯示到膜或底片
Western-Blot-Protocol
一、提取抗原蛋白將提取RNA途中留存的樣品,加入150μl 100%酒精充分混勻,靜置5min(RT), 2000×g , 4℃離心5min,?吸取上清至新管中,?加入750μl異丙醇,?混勻,?靜置10min(RT), 12000×g, 4℃離心10min,?棄上清,?加入1ml 0.3mol/L
western-是什么
向西的;自西的;西洋的;北美及南美的;西部的人;西歐人;西部片;西方的
western-blot原理
Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,經過聚丙烯酰胺凝膠電泳分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體上,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢
Western-Blot詳解
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類
分子雜交箱五大分類及功能
一、分子雜交箱五大分類:根據實驗的需求,可以將分子雜交箱分為5大類。 1、是用于大容量的分子雜交箱; 2、用于Southern 或者 Northern技術點雜交的雜交箱; 3、用于小容量的核酸雜交箱; 4、微孔板原位雜交箱; 5、載玻片原位雜交和平板雜交箱;? ??6、Western 雜交
分子雜交儀產品類型
分子雜交儀 Hybridization Oven根據實驗的需求,可以將分子雜交儀分為5大類。1、是用于大容量的分子雜交儀;2、用于Southern或者Northern技術點雜交的雜交儀;3、用于小容量的核酸雜交儀;4、微孔板原位雜交儀;5、載玻片原位雜交和平板雜交儀;6、Western雜交儀。原位分
產品類型/分子雜交儀
分子雜交儀 Hybridization Oven?根據實驗的需求,可以將分子雜交儀分為5大類。 1、是用于大容量的分子雜交儀; 2、用于Southern?或者?Northern技術點雜交的雜交儀; 3、用于小容量的核酸雜交儀; 4、微孔板原位雜交儀; 5、載玻片原位雜交和平板雜交儀; 6、Weste