分子生物學產品常見問題分析
分子生物學產品常見問題分析問題原因解決辦法DNA完全沒有被內切酶切割1) 內切酶失活標準底物檢測酶活性2) DNA不純,含有SDS,酚,EDTA等內切酶抑制因子將DNA過柱純化,乙醇沉淀DNA3) 條件不適(試劑、溫度)檢查反應系統是否最佳4) DNA酶切位點上的堿基被甲基化換用對DNA甲基化不敏感的同裂酶酶解,重新將質粒DNA轉化至dcm-,dam-基因型的細菌菌株5) DNA酶切位點上沒有甲基化(如Dpn I)換用不同切割非甲基化位點的同裂酶消化DNA(如San3A I代替Dpn I),重新將質粒轉至dcm+ dam+菌株中擴增6) DNA位點上存在其它修飾將DNA底物與λDAN混勻進行切割驗證7) DNA不存在該酶識別順序換用其它的酶切割DNA或過量酶消化進行驗證DNA切割不完全1) 內切酶活性下降用5-10倍量過量消化2) 內切酶稀釋不正確用酶貯藏液或反應緩沖液稀釋酶3) DNA不純,反應條件不佳同上4) 內切酶識別的D......閱讀全文
分子生物學產品常見問題分析
分子生物學產品常見問題分析問題原因解決辦法DNA完全沒有被內切酶切割1) 內切酶失活標準底物檢測酶活性2) DNA不純,含有SDS,酚,EDTA等內切酶抑制因子將DNA過柱純化,乙醇沉淀DNA3) 條件不適(試劑、溫度)檢查反應系統是否最佳4) DNA酶切位點上的堿基被甲基化換用對DNA甲基化不敏感
石油產品餾程測定常見問題及原因分析
1.測定汽油餾程時,用棉花墊塞住量簡口的目的?????是為了防止冷凝管上凝結的水分落人量簡內和減少餾出物的揮發。2.造成餾出液體積過多或過少的原因? ?(1)造成蒸餾出液體積過多的原因有:? ? ①量取試油時液面高于lOOmL的標線,也就是油量多了;? ? ②zui取試油時,試油溫度比室溫低;? ?
石油產品餾程測定常見問題釋疑
1.測定汽油餾程時,用棉花墊塞住量簡口的目的??????是為了防止冷凝管上凝結的水分落人量簡內和減少餾出物的揮發。2.造成餾出液體積過多或過少的原因? ?(1)造成蒸餾出液體積過多的原因有:? ? ①量取試油時液面高于lOOmL的標線,也就是油量多了;? ? ②zui取試油時,試油溫度比室溫低;?
石油產品餾程測定中常見問題釋疑
石油產品餾程測定中常見問題釋疑??? 1.測定汽油餾程時,用棉花墊塞住量筒口的目的?????是為了防止冷凝管上凝結的水分落入量筒內和減少餾出物的揮發。??? 2.造成餾出液體積過多或過少的原因? ?(1)造成蒸餾出液體積過多的原因有:? ? ①量取試油時液面高于lOOmL的標線,也就是油量多了;?
水質分析常見問題
24、測定cod用密封管消解行不行? 答:可以的,但是建議使用敞口管消解。密封消解時如果密封蓋沒有擰緊,在顛倒搖勻的時候,可能會讓溶液灑出,導致測值結果不準,甚至可能會造成人身傷害;部分水樣在消解時會釋放大量的氣體,此種水樣不可密封消解,如水里的次氯酸根太高,消解時會釋放出大量氯氣,密封消解會導
水質分析常見問題
21、BOD緩沖劑液化還能用嗎?答:BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象,這是正常情況,不影響使用。22、儀器測總氮時空白和標液正常,測水樣顯示(9999)什么原因?答:儀器測標樣沒問題,儀器一般不會有問題,可能是水樣濃度太高需要稀釋,總氮直測范圍0.05-10mg/L,275nm波長下的吸光度盡
水質分析常見問題
26、配總磷過硫酸鉀,由于不好溶,加塞子水浴加熱到了10秒左右,塞子不是很緊,過硫酸鉀還能使用嗎?答:如果進水不建議使用,可以做標準溶液試一試。過硫酸鉀不好溶可以多攪拌或超聲,不建議加熱,控制不好溫度過高后會導致過硫酸鉀失效。另過硫酸鉀最佳保存溫度25-30℃,冷藏容易結晶。27、用3B做甲醛之前做
水質分析常見問題
13、請問做氨氮實驗時,為什么加入N3試劑出現大量白色渾濁,加入N2試劑后下層紅色上層青色不斷有小氣泡上升?答:鈣鎂離子高,應做絮凝沉淀預處理。水樣帶色或渾濁以及含其他一些干擾物質,影響氨氮的測定。因此,在分析時需做適當的處理。對較清潔的水,可采用絮凝沉淀發;對污染嚴重的水或工業廢水,則用蒸餾法消除
水質分析常見問題
05、做總磷實驗時,過硫酸鉀結晶了,影響檢測結果嗎,該怎么解決?答:過硫酸鉀配制時較難溶解,使用超聲波幫助其溶解。如果沒有超聲波,尤其是冬季室溫較低,可以加熱使其溶解(溫度不能超過60℃,否則過硫酸鉀會分解),放冷后會有析出,因為溶液為過飽和,再加熱溶解是可以使用的,不影響總磷的測定。06、請問在做
水質分析常見問題
19、含氯酸鈉廢水COD如何檢測?答:含氯酸鈉廢水的COD檢測水樣的原水COD很高,用戶使用了氯酸鈉來處理,氯酸鈉具有氧化性,能降低COD,但這種廢水,使用正常方法無法檢測,經過查找資料及連華技術人員的建議,我們進行了方法測試,找到解決方案。1)取2.5ml水樣,加入4.8ml的E試劑,注意速度不要
水質分析常見問題
水質分析常見問題水質分析又稱水化學分析。即用化學和物理方法測定水中各種化學成分的含量。水質分析過程中常見的問題有哪些呢?01、BOD緩沖劑液化了還能用嗎?答:BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象,這是正常情況,不影響使用。02、我們測氨氮,是以氮元素計還是以銨根離子計?答:氨氮是指水中以游離氨和銨
水質分析常見問題
11、請問定量器為什么吸不起來?答:定量器內有兩個玻璃柱,吸液時彎頭附近玻璃柱會將底部封死,溶液會吸上來;排液時下面玻璃柱會將底部封死讓溶液從彎頭排出。兩個玻璃柱相當于兩個單向閥。新定量器使用時吸不上來就是彎頭附近玻璃柱底部沒完全密封,可用手指輕彈幾下或用洗耳球將溶液吸到彎頭玻璃柱處就可以了。12、
水質分析常見問題
24、測定cod用密封管消解行不行?答:可以的,但是建議使用敞口管消解。密封消解時如果密封蓋沒有擰緊,在顛倒搖勻的時候,可能會讓溶液灑出,導致測值結果不準,甚至可能會造成人身傷害;部分水樣在消解時會釋放大量的氣體,此種水樣不可密封消解,如水里的次氯酸根太高,消解時會釋放出大量氯氣,密封消解會導致消解
水質分析常見問題
15、測總磷,洗衣液稀釋100倍,加熱后水樣變黃色,對測量結果有沒有影響?答:消解后如果水樣沒有顏色,則不干擾實驗結果。水中有顏色的物質會在消解時被消解成無色的,不影響測量結果。16、連華5B-3F水質測定儀如何恢復出廠設置?答:儀器在關閉的狀態,一手按住“校正”鍵,一手打開開關,待屏幕上顯示“99
芯片常見問題分析
1 芯片實驗和定量PCR的優劣比較? 基因表達譜芯片實驗可以對大量基因一次性進行定量研究,定量PCR則對大量基因需逐一進行定量研究。 2 在芯片制作過程中的PCR原液是否可以為客戶保存? 可以抽干冷凍保存一年。 3 可否用DNA和芯片雜交? 不可以,因為芯片上的樣品是cDNA而真核基因D
水質分析常見問題
08、請問BOD營養鹽有黃色不溶物正常嗎?答:正常,營養鹽配好是淡黃色不完全溶解的溶液,用前需搖勻。09、請問N2試劑前一天配出來沒什么問題,為什么放一天后變棕黃色變渾?答:N2試劑配好后應轉移到聚乙烯瓶中密封、避光、低溫儲存。如果放到礦泉水瓶內,時間稍長會出現變質。如果未密封保存,空氣中的有機氣體
eds分析常見問題
Q1:能譜的縮寫是EDS還是EDX? 開始的時候能譜的縮寫有很多,比如EDS,EDX,EDAX等。ED就是Energy Dispersive,后面因為X-ray Analysis和Spectrum這幾個詞的不同用法,導致了縮寫的不同。而且相應的漢譯也有很多,比如能量色散譜,能量散射譜等等。不過
PH計常見問題分析
常見問題及解決方案1.同一樣品,兩次測量的 pH值不一樣?溫度變化或樣品本身發生了化學反應,都會引起 pH值的變化。所以,應盡量保持溫度一致,并且避免化學反應。2.同一樣品,同時在兩臺 pH計上測量,讀數不一致?由于兩臺 pH計的校正條件不一樣(如,不同時間做的校正),造成測量值有差異。所以要用同一
PCR克隆常見問題分析
??? 1、克隆PCR產物的最優條件是什么???? 最佳插入片段:載體比需實驗確定。1:1(插入片段:載體)常為最佳比,摩爾數比1:8或8:1也行。應測定比值范圍。連接用5ul 2X連接液, 50ng質粒DNA,1Weiss單位的T4連接酶,插入片段共10ul。室溫保溫1小時,或4℃過夜。在
QPCR常見問題及其分析
一般來講,進行real-time qPCR?MasterMix都是2×的濃縮液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高,所以每個樣品至少要做3個平行孔,以防在后面的數據分析中,由于Ct相差較多或者SD太大,無法進行統計分析。通常來講,反應體系的引物終濃度為100-400
測序常見問題及其分析
1、PCR 產物測序時出現重疊峰 問題圖1(模板中有堿基缺失,往往是單一位點(1-1)或兩個位點(1-2)堿基缺失導致測序 結果移碼) 解決方法:將PCR 產物克隆到質粒(如T 載體)中挑單克隆測序,或將PCR 產物進行PAGE 純化(至少瓊脂糖充分電泳后切膠純化)后再進
測序常見問題及其分析
1、PCR 產物測序時出現重疊峰 問題圖1(模板中有堿基缺失,往往是單一位點(1-1)或兩個位點(1-2)堿基缺失導致測序 結果移碼) 解決方法:將PCR 產物克隆到質粒(如T 載體)中挑單克隆測序,或將PCR 產物進行PAGE 純化(至少瓊脂糖充分電泳后切膠純化)后再進
TA克隆常見問題分析
現象可能原因解決方案 轉化后無菌落生長 感受態細胞已經失效用pUC18質粒進行轉化,確認細胞的感受態效率。1ng pUC18質粒至少應得到1000個以上的轉化子。如有問題,重新制備感受態細胞。 平板所用抗性不對pBS-T載體為amp抗性,工作濃度 100 ug/ml 連接中使用了不恰當的vector
QPCR常見問題及其分析
一般來講,進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高,所以每個樣品至少要做3個平行孔,以防在后面的數據分析中,由于Ct相差較多或者SD太大,無法進行統計分析。通常來講,反應體系的引物終濃度為10
QPCR常見問題及其分析
一般來講,進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高,所以每個樣品至少要做3個平行孔,以防在后面的數據分析中,由于Ct相差較多或者SD太大,無法進行統計分析。通常來講,反應體系的引物終濃
QPCR常見問題及其分析
一般來講,進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高,所以每個樣品至少要做3個平行孔,以防在后面的數據分析中,由于Ct相差較多或者SD太大,無法進行統計分析。通常來講,反應體系的引物終濃度為100-400
測序常見問題及其分析
1、PCR 產物測序時出現重疊峰問題圖1(模板中有堿基缺失,往往是單一位點(1-1)或兩個位點(1-2)堿基缺失導致測序結果移碼)解決方法:將PCR 產物克隆到質粒(如T 載體)中挑單克隆測序,或將PCR 產物進行PAGE純化(至少瓊脂糖充分電泳后切膠純化)后再進行測序。問題圖2(PCR 產物不純,
石油產品分析
教材共分七章,包括課程引導知識、汽油質量檢驗、柴油質量檢驗、噴氣燃料質量檢驗、潤滑油質量檢驗、其他油品質量檢驗和生物燃料質量檢驗。各章前后分別設有學習指南(知識目標、能力目標)和本章小結、閱讀材料與習題;書內附有20個油品質量檢驗記錄(報告)單和操作規程評分標準。各油品測定試驗方法,均采用國家或行
細胞培養常見問題分析
細胞常見問題分析1、冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放放37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可以超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。另外凍管由液氨桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂。2、可否使用與原先培養條件不同之培養基?不能。每一細胞株均有其特定使
PCR常見問題分析與對策
1.PCR產物的電泳檢測時間 一般為48h以內,有些最好于當日電泳檢測,大于48h后帶型不規則甚致消失。?2.假陰性,不出現擴增條帶 PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及, ④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。 模板:①模板中含有雜蛋白