IgG的分離與提純：硫酸銨沉淀法
以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必須高度純化并具有特異性，不應含有非抗體的血清蛋白。因此，為了濃縮和提高抗體的效價，或為制備免疫球蛋白特異性抗體時，通常也需要分離和純化免疫球蛋白。γ球蛋白（IgG）是血清免疫球蛋白的主要成分，約占全部免疫球蛋白的75%，因此，抗體的分離純化主要是分離純化IgG。純化IgG小量幾十ml的話，用protein A或protein G就可以，疏水柱等也可以純化；大量的話，上百ml，可以使用streamline protein A。之前根據載量估計一下需要的柱子體積。實驗室中常用硫酸銨沉淀后過DEAE 纖維素柱，比較簡便可獲較純的抗體。下面以此方法為例介紹IgG的分離與提純。一、材料與試劑配制1、動物血清2、硫酸銨飽和溶液硫酸銨800g~850gH2O 1 000m......閱讀全文
IgG的分離與提純：硫酸銨沉淀法
實驗概要實驗室中常用硫酸銨沉淀后過DEAE 纖維素柱，比較簡便可獲較純的抗體。下面以此方法為例介紹IgG的分離與提純。實驗原理以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必
IgG的分離與提純：硫酸銨沉淀法
以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必須高度純化并具有特異性，不應含有非抗體的血清蛋白。因此，為了濃縮和提高抗體的效價，或為制備免疫球蛋白特異性抗體時，通常也需要分
IgG的分離與提純：硫酸銨沉淀法
實驗概要實驗室中常用硫酸銨沉淀后過DEAE 纖維素柱，比較簡便可獲較純的抗體。下面以此方法為例介紹IgG的分離與提純。實驗原理以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必
IgG的分離與提純：硫酸銨沉淀法
以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必須高度純化并具有特異性，不應含有非抗體的血清蛋白。因此，為了濃縮和提高抗體的效價，或為制備免疫球蛋白特異性抗體時，通常也需要分
IgG的分離與提純實驗_硫酸銨沉淀法
IgG的分離與提純實驗可以用于：制備酶標抗體或熒光抗體。實驗方法原理硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離，是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質溶液中可與蛋白質競爭水分子，從而破壞蛋白質表面的水化膜，降低其溶解度，使之從溶液中沉淀出
IgG的分離與提純實驗
實驗方法原理 硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離，是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質溶液中可與蛋白質競爭水分子，從而破壞蛋白質表面的水化膜，降低其溶解度，使之從溶液中沉淀出來。各種蛋白質的溶解度不同，因而可利用不同濃度的鹽溶液
辛酸/硫酸銨法提純IgG
一、原理?在酸性條件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短鏈脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要為IgG，再用硫酸銨沉淀上清，即可獲得純度較高的IgG。辛酸/硫酸銨法比硫酸銨法能夠獲得更高純度的IgG。?二、材料與方法?1、材料?（1）動物腹水?（2）辛酸(capr
辛酸/硫酸銨法提純IgG
實驗概要本實驗介紹了辛酸/硫酸銨法提純IgG的原理和主要步驟。實驗原理在酸性條件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短鏈脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要為IgG，再用硫酸銨沉淀上清，即可獲得純度較高的IgG。辛酸/硫酸銨法比硫酸銨法能夠獲得更高純度的IgG。主要
辛酸/硫酸銨法提純IgG
一、原理在酸性條件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短鏈脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要為IgG，再用硫酸銨沉淀上清，即可獲得純度較高的IgG。辛酸/硫酸銨法比硫酸銨法能夠獲得更高純度的IgG。二、材料與方法1、材料（1）動物腹水（2）辛酸(caprylic
辛酸／硫酸銨法提純IgG
實驗概要本實驗介紹了辛酸/硫酸銨法提純IgG的原理和主要步驟。實驗原理在酸性條件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短鏈脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要為IgG，再用硫酸銨沉淀上清，即可獲得純度較高的IgG。辛酸/硫酸銨法比硫酸銨法能夠獲得更高純度的IgG。主要
免疫球蛋白提取技術：IgG的分離與提純1
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表著機體體液免疫的水平，并進一步代表著B細胞的功能，因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數
免疫球蛋白提取技術：IgG的分離與提純2
⑴ 區帶電泳：玻片瓊脂或醋酸纖維膜電泳均可。加樣電泳后，只在γ—球蛋白的遷移部位出現一條帶。操作時，同時可用全血清樣品，不同濃度 (NH4)2SO4鹽析樣品進行電泳，以資比較。⑵ 瓊脂雙相雙擴散鑒定：預先準備該IgG免疫異種動物所獲的抗IgG血清。將IgG與抗 IgG血清進行雙相雙擴散，如IgG提純
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗——硫酸銨沉淀法
實驗方法原理當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、溶
實驗室分離與提純的原則
1、引入的試劑一般只跟雜質反應； 2、后續的試劑應除去過量的前加的試劑； 3、不能引進新物質； 4、雜質與試劑反應生成的物質易與被提純物質分離； 5、過程簡單，現象明顯，純度要高； 6、盡可能將雜質轉化為所需物質； 7、除去多種雜質時要考慮加入試劑的合理順序； 8、如遇到極易溶于水
實驗室常用的提純與分離方法
提純是指將混合物凈化除去其雜質，得到混合物中的主體物質，提純后的雜質不必考慮其化學成分和物理狀態。混合物的分離方法有許多種，但根據其分離本質可分為兩大類： 1、化學分離法 2、物理分離法 下面就混合物化學分離及提純方法歸納如下：分離與提純的原則 1.引入的試劑一般只跟雜質反應;
分離提純的方法分類
分離提純的方法不拘泥于物理變化還是化學變化。在可能的條件下使樣品中的雜質或使樣品中各種成分分離開來的變化都可以使用。常用的分離提純的方法有以下幾種：1.分級結晶法。這種方法常用加熱蒸發溶液，控制溶液的密度，使其中一部分溶質結晶析出。經反復的操作可以達到分離提純的目的。2.分步沉淀法。這種方法常選用適
物質分離提純的原則
物質分離提純的原則在進行物質的分離提純時，選擇試劑和實驗措施應遵循以下四個原則：1、不增（不能引入新雜質）。2、不減（不減少被提純試劑)。3、易分離。4、易復原。
化學分離與提純的常用方法都有哪些
分離提純的原則 1.引入的試劑一般只跟雜質反應； 2.后續的試劑應除去過量的前加的試劑； 3.不能引進新物質； 4.雜質與試劑反應生成的物質易與被提純物質分離； 5.過程簡單，現象明顯，純度要高； 6.盡可能將雜質轉化為所需物質； 7.除去多種雜質時要考
分離提純的概念和應用
分離提純是指將混合物中的雜質分離出來以此提高其純度。分離提純作為一種重要的化學方法，不僅在化學研究中具有重要作用，在化工生產中也同樣具有十分重要的作用。不少重要的化學研究與化工生產，都是以分離提純為主體的。如石油工業等。
分離提純的方法分類介紹
分離提純的方法不拘泥于物理變化還是化學變化。在可能的條件下使樣品中的雜質或使樣品中各種成分分離開來的變化都可以使用。常用的分離提純的方法有以下幾種： 1.分級結晶法。這種方法常用加熱蒸發溶液，控制溶液的密度，使其中一部分溶質結晶析出。經反復的操作可以達到分離提純的目的。 2.分步沉淀法。這種
常見物質分離提純的方法
1、固—固混合分離型：灼燒、熱分解、升華、結晶（或重結晶）。2、固—液混合分離型：過濾、鹽析、蒸發。3、液—液混合分離型：萃取、分液、蒸餾、滲析。4、氣—氣混合分離型：洗氣。
辛酸硫酸銨法從人血清中純化IgG
一、實驗目的1、初步掌握從血清中提取純化IgG的方法步驟。2、了解辛酸-硫酸銨法純化IgG 的原理。二、實驗原理辛酸-硫酸銨法分兩步進行。第一步用辛酸沉淀雜蛋白，辛酸為短鏈脂肪酸，在酸性條件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白質；第二步利用硫酸銨鹽析將Ig沉淀下來，操作步驟如圖3-10所示。
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
硫酸銨沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、
物質分離提純的常見方法
1.結晶和重結晶：利用物質在溶液中溶解度隨溫度變化較大，如NaCl，KNO3。2.蒸餾冷卻法：在沸點上差值大。乙醇中(水)：加入新制的CaO吸收大部分水再蒸餾。3.過濾法：溶與不溶。4.升華法：SiO2(I2)。5.萃取法：如用CCl4來萃取I2水中的I2。6.溶解法：Fe粉(Al粉)：溶解在過量的
化學分離和提純的區別
化學分離和提純（chemical separation and purification）是指試樣在進行測定（或檢出）以前，常常需要使待測（或檢出）物質與干擾物質彼此分離。樣品中待測物質的含量極少，以致其在試液中的濃度僅接近或甚至低于分析方法的測定（檢出）下限，此時就需要進行富集。富集可認為是提高濃
免疫球蛋白的分離提純
免疫球蛋白的分離提純： Δ 目的 有利標記；減少非特異反應；有利Ig定量 Δ 分離提純方法（原理）：一般選用2~3種，或同一方法反復進行2~3次 鹽析法：在不同濃度的中性鹽中蛋白質會脫水，降低帶電電勢，親水性變為疏水性，分子間相互凝聚而沉淀（鹽析作用）。不同蛋白質鹽析所需中性鹽的濃度不同
化學分離和提純的概念
化學分離和提純（chemical separation and purification）是指試樣在進行測定（或檢出）以前，常常需要使待測（或檢出）物質與干擾物質彼此分離。樣品中待測物質的含量極少，以致其在試液中的濃度僅接近或甚至低于分析方法的測定（檢出）下限，此時就需要進行富集。富集可認為是提高濃
免疫球蛋白的分離提純
免疫球蛋白的分離提純： Δ 目的 有利標記；減少非特異反應；有利Ig定量 Δ 分離提純方法（原理）：一般選用2~3種，或同一方法反復進行2~3次 鹽析法：在不同濃度的中性鹽中蛋白質會脫水，降低帶電電勢，親水性變為疏水性，分子間相互凝聚而沉淀（鹽析作用）。不同蛋白質鹽析所需中性鹽的濃度不同
分離和提純常用的化學方法
1、加熱法 當混合物中混有熱穩定性差的物質時，可直接加熱，使熱穩定性差的物質分解而分離出去。如，NaCl中混有NH4Cl，Na2CO3中混有NaHCO3等均可直接加熱除去雜質。 2、沉淀法 在混合物中加入某種試劑，使其中一種以沉淀的形式分離出去的方法。使用該方法一定要注意不能引入新的雜質。