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  • 層析技術

    層析技術概述引言層析法又稱色層分析法或色譜法(Chromatography),它是在1903~1906年由俄國植物學家M. Tswett首先提出來的。他將葉綠素的石油醚溶液通過CaCO3管柱,并繼續以石油醚淋洗,由于CaCO3對葉綠素中各種色素的吸附能力不同,色素被逐漸分離,在管柱中出現了不同顏色的譜帶或稱色譜圖(Chromatogram)。當時這種方法并沒引起人們的足夠注意,直到1931年將該方法應用到分離復雜的有機混合物,人們才發現了它的廣泛用途。隨著科學技術的發展以及生產實踐的需要,層析技術也得到了迅速的發展。為此作出重要貢獻的是英國生物學家Martin 和Synge,他們首先提出了色譜塔板理論。這是在色譜柱操作參數基礎上模擬蒸餾理論,以理論塔板來表示分離效率,定量的描述、評價層析分離過程。其次,他們根據液-液逆流萃取的原理,發明了液-液分配色譜。特別是他們提出了遠見卓識的預言:一、流動相可用氣體代替液體,......閱讀全文

    層析的常用層析

    ◆吸附層析吸附劑的吸附力強弱,是由能否有效地接受或供給電子,或提供和接受活潑氫來決定。被吸附物的化學結構如與吸附劑有相似的電子特性,吸附就更牢固。常用吸附劑的吸附力的強弱順序為:活性炭、氧化鋁、硅膠、氧化鎂、碳酸鈣、磷酸鈣、石膏、纖維素、淀粉和糖等。以活性炭的吸附力最強。吸附劑在使用前須先用加熱脫水

    紙層析和柱層析薄層層析高效液相層析各有什么特點

    紙層析:英文為thin layer chromatography 又稱薄層色譜,色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術,屬固—液吸附色譜,兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又

    層析方法:紙層析(paper-chrmatography)

    紙層析是分配層析法的一種,其以濾紙為惰性載體,展層溶劑大多是由水飽和的有機溶劑組成。濾紙纖維的—OH 基的親水基團可吸附有機溶劑中的水作固定相,有機溶劑作流動相,當流動相沿濾紙自下向上展開,稱為上行層析;反之,流動相自上向下移動,為下行層析。紙層析法主要依據混合組分對兩相分配系數的差異而進行分離的,

    熒光層析和離子層析的區別

    離子交換層析是以具有離子交換性能的物質對各種離子的親和力不同來分離混合物中各種離子的層析技術,洗脫液為不同pH的緩沖液,固定相是離子交換樹脂、離子交換纖維素或離子交換葡聚糖,主要用于分離氨基酸、多肽及蛋白質。

    層析技術概念、原理、分類(凝膠層析和離子交換層析)

    一.概念利用混和物中各組分理化性質(吸附力、分子形狀、大小、分子極性、分子親和力以及分配系數)的差異,在物質經過兩相中進行分離的一種技術。本世紀初(1903年),俄國植物學家M.C.Jber發現并使用這一技術證明了植物的葉子中不僅有葉綠素,還含有其他色素,實際上他使用的吸附層析。現在層系法已成為生化

    層析冷柜

    層析冷柜是實驗室專為生化層析實驗而研制的特殊用途低溫柜,也可用于其他需要低溫環境的實驗,或用于物品冷藏。使用原理生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間都能夠專一而可逆的結合,這種結合力就稱為親和力。親和層析就是通過將具有親和力的兩個分子中一個固定在不溶性基質上,利用分子間親和力的特異性和可逆性

    凝膠層析

    凝膠層析?凝膠層析又稱為分子篩層析或凝膠過濾。具有分子篩作用的物質很多,如浮石、瓊脂、瓊脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝膠等。以葡聚糖凝膠應用最廣,商品名是sephadex型號很多,從G10到G200,它的主要應用范圍是:①分級分離各種抗原與抗體;②去掉復合物中的小分子物質。如除鹽、熒光素和游離

    關于層析按層析原理分類介紹

      1.凝膠層析:又稱分子篩過濾或排阻層析等。醫學教育網搜集整理固定相是多孔凝膠,各組分的分子大小不同,因而在凝膠上受阻滯的程度也不同。本法的優點是所用凝膠屬于惰性載體,吸附力弱,操作條件溫和,不需要有機溶劑,對高分子物質有很好的分離效果。常用的凝膠有Sephadex G系列。凝膠層析可用于脫鹽、分

    凝膠過濾層析的凝膠層析的應用

    ⑴脫鹽:高分子(如蛋白質、核酸、多糖等)溶液中的低分子量雜質,可以用凝膠層析法除去,這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便、快速、蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易變性。適用的凝膠為SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱長與直徑之比為5-15,樣品體積可達柱床體積的25%-

    薄層層析和紙層析的異同

    一、性質不同1、紙層析:用紙作為載體的一種色譜法。2、薄層層析:色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術。二、用途不同1、紙層析用途:常用于葉綠素色素、氨基酸的鑒定和測定、桔皮精油成分的測定和一些特定細胞的篩選實驗。2、薄層層析用途:適用于揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用

    薄層層析和紙層析的異同

    一、性質不同1、紙層析:用紙作為載體的一種色譜法。2、薄層層析:色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術。二、用途不同1、紙層析用途:常用于葉綠素色素、氨基酸的鑒定和測定、桔皮精油成分的測定和一些特定細胞的篩選實驗。2、薄層層析用途:適用于揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用

    aktapilot層析系統屬于什么層析方法

    層析柱是凝膠層析技術中的主體,我們研究所用的就是同興玻璃儀器,一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同,從而分離的一種層析法。 層析柱是凝膠層析技術中的主體,一般用玻璃管或有機玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直

    薄層層析

    Reaction volume 100 ul5 ul NADPH (100 mM)x ul cell extract so you get 50 % conversion0.2 uM C14-Testosteroneadd Tris-Citrate Buffer pH 6 to an endvolu

    層析技術

    層析技術概述引言層析法又稱色層分析法或色譜法(Chromatography),它是在1903~1906年由俄國植物學家M. Tswett首先提出來的。他將葉綠素的石油醚溶液通過CaCO3管柱,并繼續以石油醚淋洗,由于CaCO3對葉綠素中各種色素的吸附能力不同,色素被逐漸分離,在管柱中出現了不

    硅膠柱層析

    洗脫劑:極性小的用乙酸乙酯:石油醚系統;極性較大的用甲醇:氯仿系統;極性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系統;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸裝柱:將柱底用棉花塞緊,不必用海沙,加入約1/3體積石油醚(氯仿),裝上蓄液球,打開柱下活塞,將勻漿一次傾入蓄液球內。隨著沉降,會有一些硅膠沾在蓄液球內,用石油醚(氯

    層析的原理

    層析法又稱色層分析法或色譜法,是一種基于被分離物質的物理、化學及生物學特性的不同,使它們在某種基質中移動速度不同而進行分離和分析的方法。例如:我們利用物質在溶解度、吸附能力、立體化學特性及分子的大小、帶電情況及離子交換、親和力的大小及特異的生物學反應等方面的差異,使其在流動相與固定相之間的分配系數(

    什么是層析?

    層析(chromatography)是“色層分析”的簡稱。利用各組分物理性質的不同,將多組分混合物進行分離及測定的方法。有吸附層析、分配層析兩種。一般用于有機化合物、金屬離子、氨基酸等的分析。層析利用物質在固定相與流動相之間不同的分配比例,達到分離目的的技術。層析對生物大分子如蛋白質和核酸等復雜的有

    層析法分類

    1.凝膠層析又稱分子篩過濾或排阻層析等。固定相是多孔凝膠,各組分的分子大小不同,因而在凝膠上受阻滯的程度(移動速度)也不同。優點:所用凝膠屬于惰性載體,吸附力弱,操作條件溫和,不需要有機溶劑,對高分子物質有很好的分離效果。常用的凝膠有Sephadex G(葡聚糖凝膠)系列。凝膠層析可用于脫鹽、分離提

    層析法介紹

    一、紙層析紙層析創立于1944年,和薄層層析一樣,紙層析不僅可以用來分離、檢識、測定中藥中復雜的有效成分,而且可以于少量成分的提取精制。它是一種以濾紙上吸附的水為固定相,濾紙作為支持劑的分配層析法。紙層析應用較廣,其主要用途是為分配薄層及分配柱層析摸索條件。雖然紙層析比較費時,易產生拖尾、不耐腐蝕性

    層析的概念

    小編為廣大考生整理了生物化學名詞解釋,希望對大家考博復習有所幫助,下面是層析(chromatography)相關名詞解釋以及試題范例。層析是什么(概念)(chromatography)層析,即色層分析,利用各組分物理性質的不同,將多組分混合物進行分離及測定的方法,有吸附層析、分配層析兩種,一般用于有

    疏水作用層析

    實驗概要通過實驗了解疏水作用層析的原理與方法。實驗原理疏水作用層析(Hydrophobic ?Interaction ?Chromatography,HIC)是根據分子表面疏水性差別來分離蛋白質和多肽等生物大分子的一種較為常用的方法。蛋白質和多肽等生物大分子的表面常常暴露著一些疏水性基團,我們把這些

    層析法簡介

    層析法又稱色譜法。是一種現代的物理化學分離、分析法。在成品純度檢驗和混合物分離方面應用廣泛。中藥化學有效成分分析中,一些基本母核相同而結構略有不同的化合物的分離、分析中,色譜法優勢明顯。色譜法:用于成品純度檢驗及混合物分離。適于分離結構近似物質。層析法的分類:(1)根據原理分為吸附層析、分配層析、凝

    層析新知:層析技術進步發展期

    上世紀60、70年代是色譜/層析技術快速發展的時代,首先是層析介質有了飛速的發展,各種人工合成的介質出現,如硅膠、聚苯乙烯二乙烯基樹脂、瓊脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等樹脂或凝膠的出現,極大地拓展了層析技術的應用領域和范圍,基于不同介質的層析方法也如雨后春筍般不斷涌現。如Bio-Rad公司于上世紀50

    凝膠層析技術中的主體——層析柱

      凝膠是一類多孔性高分子聚合物,每個顆粒猶如一個篩子。當樣品溶液通過凝膠柱時,相對分子質量較大的物質由于直徑大于凝膠網孔而只能沿著凝膠顆粒間的空隙,隨著溶劑流動,因此流程較短,向前移動速度快而首先流出層析柱;反之,相對分子質量較小的物質由于直徑小于凝膠網孔,可自由地進出凝膠顆粒的網孔,在向下移動過

    薄層層析,高效液相層析各有什么特點

    紙層析:英文為thin layer chromatography 又稱薄層色譜,色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術,屬固—液吸附色譜,兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又

    層析新知:層析技術進步發展期

    上世紀60、70年代是色譜/層析技術快速發展的時代,首先是層析介質有了飛速的發展,各種人工合成的介質出現,如硅膠、聚苯乙烯二乙烯基樹脂、瓊脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等樹脂或凝膠的出現,極大地拓展了層析技術的應用領域和范圍,基于不同介質的層析方法也如雨后春筍般不斷涌現。如Bio-Rad公司于上世紀50年

    薄層層析的薄層層析的分析程序

    將樣品溶液用毛細管點在薄層板的一端,置密閉槽中,加入適宜溶劑為流動相。由于毛細管原理,溶劑被吸上,沿板移動,并帶動樣品中各組分向前移動,這個過程稱為展開。由于各組分性質不同,移動距離不同,展開一定距離后,即得互相分離的組分斑點。可用適當方法使各組分在板上顯示其位置,如組分本身有顏色,即可直接觀察,否

    離子交換柱層析法(層析實驗簡介)概略

    一、??? 原理:有些高分子物質含有一些可以分離的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的離子產生交換反應。如:R-SO3H+M+ ———— R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-? —————? R-NH3CL+OH-這類高分子物質通稱離子交換劑,其中使用最普遍的是離子交換樹脂。由

    葡聚糖凝膠層析(分子排阻層析或凝膠過濾)

    【實驗目的】1.掌握葡聚糖凝膠的特性及凝膠層析的原理。2.學習葡聚糖凝膠層析的基本操作技術。 【實驗原理】 凝膠層析又稱分子排阻層析或凝膠過濾,是以被分離物質的分子量差異為基礎的一種層析分離技術,這一技術為純化蛋白質等生物大分子提供了一種非常溫和的分離方法。層析的固定相載體是凝膠顆粒,目前應

    離子交換層析實驗離子交換層析介質和層析柱的選擇

    實驗步驟1. ?離子交換凝膠的選擇依據:(1)根據蛋白質的pH只穩定范圍。蛋白質在等電點pI以上pH穩定時選擇陰離子交換凝膠介質,在pI以下pH的穩定時,則選用陽離子交換凝膠介質。(2)根據特分離蛋白質的分子大小。分子量在10 000~100 000 0 Da 的蛋白,選用如DEAE-Sephace

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