葡聚糖凝膠層析（分子排阻層析或凝膠過濾）
【實驗目的】1.掌握葡聚糖凝膠的特性及凝膠層析的原理。2．學習葡聚糖凝膠層析的基本操作技術。 【實驗原理】 凝膠層析又稱分子排阻層析或凝膠過濾，是以被分離物質的分子量差異為基礎的一種層析分離技術，這一技術為純化蛋白質等生物大分子提供了一種非常溫和的分離方法。層析的固定相載體是凝膠顆粒，目前應用較廣的是：具有各種孔徑范圍的葡聚糖凝膠（Sephadex）和瓊脂糖凝膠（Sepharose）。 葡聚糖凝膠是由直鏈的葡聚糖分子和交聯劑3—氯1，2—環氧丙烷交聯而成的具有多孔網狀結構的高分子化合物。凝膠顆粒中網孔的大小可通過調節葡聚糖和交聯劑的比例來控制，交聯度越大，網孔結構越緊密；交聯度越小，網孔結構就越疏松，網孔的大小決定了被分離物質能夠自由出入凝膠內部的分子量范圍。可分離的分子量范圍從幾百到幾十萬不等。 葡聚糖凝膠層析，是使待分離物質通過葡聚糖凝膠層析柱，各個組分由于分子量不相同，在凝膠柱上受到的阻滯作用不同，而在層析......閱讀全文
葡聚糖凝膠層析（分子排阻層析或凝膠過濾）
【實驗目的】1.掌握葡聚糖凝膠的特性及凝膠層析的原理。2．學習葡聚糖凝膠層析的基本操作技術。 【實驗原理】 凝膠層析又稱分子排阻層析或凝膠過濾，是以被分離物質的分子量差異為基礎的一種層析分離技術，這一技術為純化蛋白質等生物大分子提供了一種非常溫和的分離方法。層析的固定相載體是凝膠顆粒，目前應
葡聚糖凝膠層析脫鹽(Desalination)(1)
一. 目的學習凝膠層析的工作原理和操作方法掌握利用葡聚糖凝膠層析進行蛋白質脫鹽的技術二. 原理凝膠層析又稱凝膠過濾或排阻層析。凝膠過濾的主要裝置是填充有層析介質的層析柱。1. 層析介質的特點（1）遇水為不溶解的固相； （2）是化學惰性物質；（3）離子基團含量少； （4）顆粒大小和網眼均勻；（5）機械
葡聚糖凝膠層析脫鹽(Desalination)(2)
五. 操作步驟層析柱的準備(1) 清洗：每組取一支層析柱，用清水沖洗干凈。（若玻璃柱較臟，應卸去塑料裝置，先入洗液中浸泡2小時。）(2) 安裝與檢查：檢查出口裝置中尼龍綢或燒結濾板是否完好干凈。安裝層析柱，讓其垂直固定于滴定臺架上。對準出口處，放一只250mL燒杯。向層析柱內灌洗脫劑，打開出口螺旋夾
葡聚糖凝膠色譜層析柱圖結果怎么分析
1.凝膠的預處理交聯葡聚糖凝膠的市售商品多為干燥顆粒，使用前必須充分溶脹。方法是將欲使用的干凝膠緩慢地傾倒入5～10倍的去離子水中，參照相關資料中凝膠溶脹所需時間，進行充分浸泡，然后用傾倒法除去表面懸浮的小顆粒，并減壓抽氣排除凝膠懸液中的氣泡，準備裝柱。在許多情況下，也可采用加熱煮沸方法進行凝膠溶脹
葡聚糖凝膠色譜層析柱圖結果怎么分析
1.凝膠的預處理交聯葡聚糖凝膠的市售商品多為干燥顆粒，使用前必須充分溶脹。方法是將欲使用的干凝膠緩慢地傾倒入5～10倍的去離子水中，參照相關資料中凝膠溶脹所需時間，進行充分浸泡，然后用傾倒法除去表面懸浮的小顆粒，并減壓抽氣排除凝膠懸液中的氣泡，準備裝柱。在許多情況下，也可采用加熱煮沸方法進行凝膠溶脹
葡聚糖凝膠色譜層析柱圖結果怎么分析
1.凝膠的預處理交聯葡聚糖凝膠的市售商品多為干燥顆粒，使用前必須充分溶脹。方法是將欲使用的干凝膠緩慢地傾倒入5～10倍的去離子水中，參照相關資料中凝膠溶脹所需時間，進行充分浸泡，然后用傾倒法除去表面懸浮的小顆粒，并減壓抽氣排除凝膠懸液中的氣泡，準備裝柱。在許多情況下，也可采用加熱煮沸方法進行凝膠溶脹
葡聚糖凝膠的用途
利用分子篩作用，進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定。 交聯葡聚糖的商品名為Sephndex，不同規格型號的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。
什么是葡聚糖凝膠
葡聚糖凝膠指的是由一定平均相對分子質量的葡聚糖(dextran) 和甘油基以醚橋形式相互交聯而成，具有立體網狀結構，應用面廣的一類凝膠，國外商品名為Sephadex。交聯度的大小，可通過控制交聯劑(一般為環氧氯丙烷) 和葡聚糖的配比以及反應條件來控制。
葡聚糖凝膠柱使用
做葡聚糖凝膠層析分離蛋白肽過程中，填充一般柱子需要2/3以上,灌時先加2-3毫升相應的緩沖液,然后,用玻棒輕輕絞勻再灌,不能產生氣泡,也不能使它干掉,以免產生龜裂影響實驗結果.
葡聚糖凝膠的簡介
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質溶液中溶脹。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯度，因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。 葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要極高分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗
葡聚糖凝膠的簡介
葡聚糖凝膠指的是由一定平均相對分子質量的葡聚糖(dextran) 和甘油基以醚橋形式相互交聯而成，具有立體網狀結構，應用面廣的一類凝膠，國外商品名為Sephadex。交聯度的大小，可通過控制交聯劑(一般為環氧氯丙烷) 和葡聚糖的配比以及反應條件來控制。
凝膠層析
凝膠層析?凝膠層析又稱為分子篩層析或凝膠過濾。具有分子篩作用的物質很多，如浮石、瓊脂、瓊脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝膠等。以葡聚糖凝膠應用最廣，商品名是sephadex型號很多，從G10到G200，它的主要應用范圍是：①分級分離各種抗原與抗體；②去掉復合物中的小分子物質。如除鹽、熒光素和游離
凝膠過濾層析的凝膠層析的應用
⑴脫鹽：高分子（如蛋白質、核酸、多糖等）溶液中的低分子量雜質，可以用凝膠層析法除去，這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便、快速、蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易變性。適用的凝膠為SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱長與直徑之比為5-15，樣品體積可達柱床體積的25%-
葡聚糖凝膠的方法分類
1.乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干； 2.無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的完全溶脹，然后； 3.鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗至
葡聚糖凝膠的儲運特性
1、未使用，室溫保存即可。 2、使用后保存方法如下：凝膠層析的載體不會與被分離的物質發生任何作用，因此凝膠柱在層析分離后稍加平衡即可進行下一次的分離操作。但使用多次后，由于床體積變小，流動速率降低或雜質污染等原因，使分離效果受到影響。此時對凝膠柱需進行再生處理，其方法是:先用水反復進行逆向沖洗
葡聚糖凝膠的儲運特性
1、未使用，室溫保存即可。 2、使用后保存方法如下：凝膠層析的載體不會與被分離的物質發生任何作用，因此凝膠柱在層析分離后稍加平衡即可進行下一次的分離操作。但使用多次后，由于床體積變小，流動速率降低或雜質污染等原因，使分離效果受到影響。此時對凝膠柱需進行再生處理，其方法是:先用水反復進行逆向沖洗
DEAE葡聚糖凝膠的概念
中文名稱DEAE-葡聚糖凝膠英文名稱diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定 義親水性交聯葡聚糖離子交換劑。是以交聯葡聚糖G25或G50為基質，通過化學方法引入電荷基團二乙氨乙基，制成外形呈珠狀的弱堿型陰離子交換劑，此類交換劑對核酸和蛋白質有較
葡聚糖凝膠的產品用途介紹
產品用途 利用分子篩作用，進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定。 交聯葡聚糖的商品名為Sephndex，不同規格型號的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。 簡介 葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質溶液中溶脹。G型的葡聚糖凝
簡述交聯葡聚糖凝膠的制備過程
葡聚糖凝膠微珠表面形態存在粒子凝集和表面粗糙兩種不良情況。粒子凝集的原因是分散劑聚醋酸乙烯酯(PVAc)在堿性條件下水解導致親水性增強，以及交聯反應的中間產物具有絮凝作用。另外，交聯后粒子粘度增大也可導致凝集。葡聚糖微珠表面粗糙是由于后處理時PVAc的微小附著物沒有從微珠表面完全除去而造成的。作
葡聚糖凝膠G系列使用說明
葡聚糖凝膠G系列使用說明1 化學和物理性質葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質溶液中溶脹。親水基質使其非特異性吸附最小化，并在生物分子分離期間得到較高的回收率。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯度，因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗
關于葡聚糖凝膠的方法分類介紹
1、乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干； 2、無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的完全溶脹，然后； 3、鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗至
葡聚糖凝膠的理化性質介紹
化學穩定性 葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑（除非它被化學降解）。它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩定的，在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑將破壞凝膠，因而應避免使用。 物理穩定性 葡聚糖凝膠并不熔融，可以在濕態、中性PH進行滅菌或在高壓滅菌器120℃、30分鐘而不影響它
葡聚糖凝膠G系列使用說明
葡聚糖凝膠G系列使用說明 1 化學和物理性質 葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質溶液中溶脹。親水基質使其非特異性吸附最小化，并在生物分子分離期間得到較高的回收率。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯度，因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶
關于交聯葡聚糖凝膠的基本介紹
SephadexG交聯葡聚糖的商品名為Sephadex，不同規格型號的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。例如，G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克，同樣G-200為每克干膠吸水20克。交聯葡聚糖凝膠的種類有G-10、G-15、G-25、G-50、G-75、G-100、
凝膠過濾層析實驗
凝膠過濾層析（gel filtration chromatography）法又稱排阻層析或分子篩方法，主要是根據蛋白質的大小和形狀，即蛋白質的質量進行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網狀結構物質，多是交聯的聚糖類物質，使蛋白質混合物中的物質按分子大小的不同進行分離。實驗方法蛋白質的凝膠過濾
凝膠過濾層析實驗
凝膠過濾層析（gel filtration chromatography）法又稱排阻層析或分子篩方法，主要是根據蛋白質的大小和形狀，即蛋白質的質量進行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網狀結構物質，多是交聯的聚糖類物質，使蛋白質混合物中的物質按分子大小的不同進行分離。實驗方法蛋白質的
凝膠過濾層析實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 凝膠過濾緩沖液儀器、耗材 布氏漏斗凝膠過濾層析柱分光光度計實驗步驟 1. ?如果凝膠過濾的介質是干粉，則需在凝膠過濾緩沖液中完全溶脹。2. ?在遠離過往通道及直接光照的恒溫環境，將層折柱垂直安裝在穩固的實驗室支架上。3. ?用一注射器將凝膠過濾緩沖液從柱子的輸出管注入柱
凝膠過濾層析實驗
蛋白質的凝膠過濾分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
凝膠層析的分類
葡聚糖凝膠是指由天然高分子－葡聚糖與其它交聯劑交聯而成的凝膠。葡聚糖凝膠主要由Pharmacia Biotech 生產。常見的有兩大類，商品名分別為Sephadex 和Sephacryl。 葡聚糖凝膠中最常見的是Sephadex 系列，它是葡聚糖與3－氯－1，2環氧丙烷(交聯劑)相互交聯而成，
凝膠層析的概述
凝膠層析是按照蛋白質分子量大小進行分離的技術，又稱之凝膠過濾， 分子篩層析或排阻層析。單個凝膠珠本身象個"篩子"。不同類型凝膠的篩孔的大小不同。如果將這樣的凝膠裝入一個足夠長的柱子中，作成一個凝膠柱。當含有大小不同的蛋白質樣品加到凝膠柱上時，比凝膠珠平均孔徑小的蛋白質就要連續不斷地穿入珠子的內部