免疫組化染色步驟
石蠟切片免疫組化染色步驟1、載玻片的處理: 抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine 等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1 APES:現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50 比例丙酮稀釋的APES 中,停留20~30 秒鐘,取出稍停片刻,再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES,置通風櫥中晾干即可。用此載玻片撈片時應注意組織要一步到位,并盡量減少氣泡的存在,以免影響染色結果。1.2 HistogripTM:將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的Histogrip液中,停留1~2 分鐘,然后用雙蒸水快速清洗三次,室溫干燥或60oC 烤箱烘烤一小時,裝盒備用。1.3 Poly-L-Lysine......閱讀全文
免疫組化染色步驟
石蠟切片免疫組化染色步驟1、載玻片的處理:??? 抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine 等幾種試劑,對已清洗的載玻
石蠟切片免疫組化染色步驟
1、載玻片的處理:抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1
免疫組化染色具體操作步驟
?? 免疫組化染色具體操作步驟介紹??? (以美國ZYMED公司SP試劑盒為例)??? 1、石蠟切片脫蠟至水。??? 2、3%H2O2室溫孵育5~10分鐘,以消除內源性過氧化物酶的活性。??? 4、蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘,(如需采用抗原修復,可在此步后進行)。??? 5、 5~10%正常山羊血
石蠟切片(paraffin-sections)免疫組化染色步驟
1、載玻片的處理:抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。這里選用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:(1)APES:現用現配。將洗凈的玻片
免疫組化染色具體操作步驟
免疫組化染色具體操作步驟介紹 (以美國ZYMED公司SP試劑盒為例) 1、石蠟切片脫蠟至水。 2、3%H2O2室溫孵育5~10分鐘,以消除內源性過氧化物酶的活性。 4、蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘,(如需采用抗原修復,可在此步后進行)。 5、 5~10%正
免疫組化步驟
1。4%多聚甲醛常規灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中過夜。蠟塊制作。切片,貼片。0.01MKPBS清洗5min×3后;?2。加入配好的0.3%的過氧化氫甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%過氧化氫)30min,以消除內源性過氧化物酶的影響,0.01MPBS清洗5m
免疫組化步驟設計
你的一抗的生產商應該提供有實驗方法,按照他們優化過的步驟來做最為明智。也可以網上搜索到標準的免疫組化步驟,但是所用抗體及封閉等試劑的濃度,孵育時間長度等還是要靠自己摸索,麻煩多多。如果樣品是胰臟一般很容易得到陽性結果。
免疫組化主要步驟
免疫組化主要步驟1.? ? ? ? 洗載玻片:將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中,目的是為了是載玻片上的硅膠等除去,同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整,便于組織吸附,然后置于清水中清洗,除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4(大約沖一個小時左右),再將載玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上
石蠟切片免疫組化染色
實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理,常用酶消化,抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES:現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中,停留20~30秒鐘,取出稍停片刻,再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES,置通風櫥
什么是免疫組化染色
是病理學診斷方法,尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:(1)惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷;(2)確定轉移性惡性腫瘤的原發部位;(3)對某類腫瘤進行進一步的病理分型;(4)軟組織腫瘤的治療一般需根據正確的組織學分類,因其種類多、組織形態
什么是免疫組化染色
是病理學診斷方法,尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:(1)惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷;(2)確定轉移性惡性腫瘤的原發部位;(3)對某類腫瘤進行進一步的病理分型;(4)軟組織腫瘤的治療一般需根據正確的組織學分類,因其種類多、組織形態
什么是免疫組化染色?
免疫組化染色是一種利用抗原-抗體反應和組織化學方法來檢測和定位特定蛋白質在組織細胞中的表達情況的技術。 具體來說,免疫組化染色的步驟包括: 制備組織切片:將組織樣本切成薄片,放置在載玻片上。 阻斷內源性過氧化物酶:為了減少非特異性染色,需要用含有過氧化物酶阻斷劑的溶液處理組織切片。 抗原
石蠟切片免疫組化染色
實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理,常用酶消化,抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES:現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中,停留20~30秒鐘,取出稍停片刻,再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES,置通風櫥
常用免疫組化染色方法
常用免疫組化染色方法,真空負壓免疫熒光染色法染細胞培養片。1. 將細胞爬于載玻片或蓋玻片的片子用生理鹽水浸洗數次,徹底洗去蛋白液。2.純丙酮固定5-10分鐘。3.PBS浸洗3次,每次1分鐘。4.加入選用的第一抗體孵育真空負壓處理15分鐘。5.PBS洗3次,每次2分鐘。6.加入熒光抗體孵育真空負壓處理
石蠟切片免疫組化染色方法
1、載玻片的處理:抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1
免疫組化染色方法大匯總
免疫組化的方法很多,新方法層出不窮,如二步法,要不斷更新,與時俱進。雖然這些方法各有其特色,但總的來說,只要應用恰當均可獲得較為滿意的結果。方法的選擇并不是影響免疫組化結果的主要因素。問題在于一個單位應常規地、固定地使用一種方法,不宜交替使用不同的方法或經常更換方法。一旦選定一種方法,應務必使其標準
免疫組化染色有哪些應用?
病理學診斷:免疫組化染色可以用于檢測組織中的特定蛋白質,幫助醫生確定病變的性質和類型。例如,在癌癥診斷中,可以通過檢測腫瘤細胞中的某些蛋白質來確定腫瘤的類型和分級。 神經科學研究:免疫組化染色可以用于研究神經系統中的蛋白質表達情況。例如,在研究阿爾茨海默病時,可以通過檢測大腦組織中β-淀粉樣蛋
免疫組化的操作步驟
一 免疫組化(SP法)操作步驟 1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行 2.緩沖液洗 3min/2 次。 3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。 4. 緩沖液洗 5min/
免疫組化的操作步驟
1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,
免疫組化的操作步驟
一 免疫組化(SP法)操作步驟1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫組化SP法步驟
SP(streptavidin-perosidase)法,即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法。按標記物質的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、酶標法和免疫金銀法等。按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二
免疫組化的操作步驟
一 免疫組化(SP法)操作步驟1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫組化ABC法步驟
1、4%多聚甲醛常規灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中過夜。蠟塊制作。切片,貼片。0.01MKPBS清洗5min×3后;2、加入配好的0.3%的過氧化氫甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%過氧化氫)30min,以消除內源性過氧化物酶的影響,0.01MPBS清洗5mi
免疫組化SP法步驟
SP(streptavidin-perosidase)法,即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法.按標記物質的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、酶標法和免疫金銀法等。按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二
石蠟切片免疫組化步驟
實驗概要石蠟切片免疫組織化學染色主要試劑染色缸;染色架;保濕盒;晾片盤;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘;2.?????脫蠟和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95
免疫組化的操作步驟
1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,
HE-染色和免疫組化染色可以同時做嗎
免疫組化是利用抗原與抗體間的特異結合原理和特殊的標記技術,對組織和細胞內的特定抗原、抗體進行定位、定性、定量的一們技術。我們都是先進行免疫組化,在DAB染色后進行HE染色。既能看到免疫組化的結果,又能看到細胞的形態,CD34+免疫組化染色后是棕色的顆粒,效果很好。 1)做免疫組化的片子最好不要同時做
石材染色步驟
染色原理:因石材具有天然縫隙、毛孔,微小孔洞,很容易吸收外界的侵蝕。故此,利用這一原理,將滲透劑加所需的顏色配置,調制成與石材產品顏色一致染色劑,進行石材表面染色處理。染色方法:將需染色的石材逐一排列在地板上,將表面臟物、污漬、雜質等清除干凈,然后用吹風機將石材的水分吹干,最好的辦法是將石材放在太陽
間接染色步驟(細胞表面染色)
實驗概要間接標記需要兩個孵育步驟,先與一抗再與合適的第二抗體孵育,二抗(不是一抗)結合了熒光染料(FITC、PE、Cy5 等)。請注意這是一個普遍的程序,您可以根據自己的使用情況進行調整。實驗步驟1.?收集并洗滌細胞,然后確定細胞總數。細胞通常在聚苯乙烯的圓底 12 x 75 mm2 Falcon
免疫組化實驗中常用染色方法
根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。