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  • 染色體的提取方法

    1)取30ml藍藻溶液于10000rpm離心15分鐘,將沉淀小心轉至1.5mlEppendorf管中;2)用1 mlTE(PH8.0)洗沉淀,12000rpm離心10分鐘,棄上清;加240μL BufferA和60μL的5M NaCl,每管加Sarkosyl(原濃度是10%)至終濃度為0.1%。3)于4℃保溫1小時;12000rpm離心2分鐘,取沉淀。以500μL溶液(由49.99ml BufferA和10μL 1mM Nacl組成)洗2次,重懸細胞于250μL溶液(BufferA+25%蔗糖),室溫放置1小時;5)加50mg/ml溶菌酶至其終濃度為10~20mg/ml。于30℃放置15~30分鐘;加500μL BufferB(由10mMTriscl和50mM Na2EDTA組成),37℃,放置30分鐘;6)加10%的SDS至終濃度為1%,小心混勻,37℃放置1小時;7)加20mg/ml的蛋白酶K至終濃度為100μL/ml.于3......閱讀全文

    染色體分選的方法特點

    染色體分選(chromosome sorting),用流式細胞計分選特定的染色體,基本過程與細胞分選相似。不同的是,要用帶有熒光標記的DNA探針同特異染色體結合,使待分選的染色體帶上標記。

    酶輔助提取法提取葉黃素的方法介紹

    酶輔助提取法是指應用纖維素酶對動植物的細胞壁進行處理、破壁,使提取時細胞內的物質易暴露,油的滲透性提高,有利于之后的提取,葉黃素異構化不會由酶法降解萬壽菊而引起,全反式葉黃素在經過酶處理的萬壽菊粉中,含量達到最高? 。

    絨毛染色體制備方法

    絨毛來源于胚胎的中胚層,最早的初級干絨毛出現于孕三周初,孕8周左右是絨毛發育最旺盛時期。目前國內外絨毛取材多選于8-9周。研究資料表明,絨毛取樣不影響胚胎的發育及胎盤的功能。但取樣的失敗可導致胚胎丟失而終止妊娠。絨毛取樣前者首先要檢查陰道分泌物以判別陰道的潔凈度,防止取樣導致宮內感染。其次需做B超檢

    染色體核型分析方法

      鏡下選擇染色體分散適度(不過于分散和相互重疊),染色體長短合適,染色清晰的分裂相,在油鏡下觀察。  1.計數  將一個細胞中的全部染色體按其自然位置劃成幾個小區,為了防止重數或漏數,可按其鏡下形態畫出簡圖然后計數,確定有無數目異常。人類正常體細胞2n=46,其中常染色體22對,性染色體1對,正常

    核酸提取分離方法

    核酸提取分離方法核酸提取分為傳統方法和商業化試劑抽提。傳統的方法一般會采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀來提取核酸。商業化試劑盒方法提取核酸,比較經典的是采用離心柱法,將硅膠膜固定在離心管中,通過離心力或者負壓讓液體通過硅膠膜,核酸就留在膜上。在經過洗滌、洗脫的步驟得到核酸。商業化試劑盒的應用還能避免試劑污

    李子提取多糖方法

    溶劑提取法、酶提取法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法、高壓脈沖提取法、超臨界流體萃取法。具體操作步驟如下:1、溶劑提取法:(1)水提法:以水為溶劑,可采用熱水浸提或冷水浸提(植物多糖多采用熱水浸提,可直接或離心去除雜質),由于多糖不溶于乙醇,可通過沉淀將多糖提純出來。水提法的確缺點在于溫度高、耗時

    TRIzol-RNA提取方法

    研究基因的表達和調控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。TRIzol RNA提取方法:(1)操作簡單的,提取方便,回收率高; (2)提取的RNA的質量高,對cDNA庫,RT-PCR和Northern?Blot等分子生物學實驗起著很重要的影響。實驗方法原理Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采

    組織mRNA提取方法

    (一)總RNA提取-Trizol法Trizol法適用于人類、動物、植物、微生物的組織或培養細菌,樣品量從幾十毫克至幾克。用Trizol法提取的總RNA絕無蛋白和DNA污染。RNA可直接用于Northern斑點分析,斑點雜交, Poly(A)+分離,體外翻譯,RNase封阻分析和分子克隆。1、將組織在

    幾種核酸提取方法

    幾種核酸提取方法(1)濃鹽法?利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1M?Nacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL3相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA?鈉鹽沉淀

    DNA提取方法介紹

    DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、堿裂解法。生物方式:酶法。根據核酸分離純化方式的不同有硅質材料、陰離子交換樹脂等。

    TRIzol-RNA提取方法

    (一)試劑準備1.TRIzol試劑。2.氯仿3.異丙醇4.75%乙醇(DEPC H2O配制)5.DEPC H2O(二)操作步驟1. 樣品處理:(1)培養細胞:收獲細胞1-5×107,移入1.5ml離心管中,加入1ml Trizol,混勻,室溫靜置5min。(2)組織:取50-100mg組織(新鮮或-

    提取病毒RNA方法

    一、用異硫氰酸胍提取提禽流感病毒的詳細步驟,可參考(我提過N次做定量PCR都沒問題):1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,

    提取植物rna方法

      提到RNA的提取,是不是充滿了心酸和無奈呀,抽提過程中已十分小心謹慎了,但是有時候還是會出現RNA污染、降解的悲劇。別怕,今天小編給您介紹一種新的RNA提取方法,比以前的方法更快、更有效和更可靠,讓您從此不用再擔心的RNA的抽提了。  眾所周知:獲得純凈、完整的RNA樣品,是對一種植物的活性基因

    核酸提取方法大全

    核酸是生物體內的高分子化合物。它包括脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)和核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)兩大類。DNA和RNA都是由一個一個核苷酸(nucleotide)頭尾相連而形成的。RNA平均長度大約為2000個核苷酸,而人的DNA卻是很長的,約

    膜蛋白提取方法

    膜蛋白具有許多重要的細胞功能,對生物體存在至關重要。他們具有超過 60% 的藥物靶點,占細胞總蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋白。膜蛋白或者附著在脂質雙分子層上或者通過疏水,離子或其他非共價與膜周邊的完整蛋白結合。使用表面活性劑進行質膜蛋白分離提取效率不高,還有可能

    TRIzol-RNA提取方法

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質,并使蛋白質二級結構消失,細胞結構

    中藥提取分離方法

    為提高中藥質量、改變傳統中藥劑型“大、黑、粗”的狀態、讓中藥步入國際市場,一些現代高新工程技術正在不斷地被借鑒到中藥生產中來,一方面使中藥生產加符合傳統的中醫藥理論,確保用藥的質量要求,另一方面也提高了現有中草藥資源的利用率。筆者擬對幾種研究和應用較多且發展前景廣闊的中藥提取分離技術作一綜述。1 中

    幾種核酸提取方法

    ?(1)濃鹽法?利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1M?Nacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL3相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA?鈉鹽沉淀出來.?也可用

    中藥提取方法詳解

      中藥的化學成所含成份十分復雜,既有含有多種有效成份,又有無效成份,也包含有毒成份。提取其有效成分并進一步加以分離、純化,得到有效單體是中藥研究領域中的一項重要內容。中藥提取就是利用一些技術最大限度提取其中有效成份,使得中藥制劑的內在質量和臨床治療效果提高,使中藥的效果得以最大限度的發揮。   中

    膜蛋白提取方法

    ?? 膜蛋白具有許多重要的細胞功能,對生物體存在至關重要。他們具有超過 60% 的藥物靶點,占細胞總蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋白。??? 膜蛋白或者附著在脂質雙分子層上或者通過疏水,離子或其他非共價與膜周邊的完整蛋白結合。??? 使用表面活性劑進行質膜蛋白分離

    染色體工程的操作方法

    植物染色體工程的基本程序是人工雜交,細胞學鑒定,在雜種或雜種后代中篩選所需要的材料。以普通小麥為例,常用的材料如下:單體與缺體系統;三體系統;異附加系;異代換系;易位系。

    酵母人工染色體的標記方法

    YAC 載體的選擇標記主要采用營養缺陷型基因,如色氨酸、亮氨酸和組氨酸合成缺陷型基因 trp 1、 leu 2和 his 3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等,以及赭石突變抑制基因 sup4 。與 YAC 載體配套工作的宿主酵母菌(如AB1380)的胸腺嘧啶合成基因帶有一個赭石突變ade 2-1。

    染色體步移的方法介紹

    染色體步移(Chromosome walking)是用于鑒定已經克隆的特定DNA片段側翼順序的方法。從第一個重組克隆插入片段的一端分離出一個片段作為探針從文庫中篩選第二個重組克隆,該克隆插入片段含有與探針重疊順序和染色體的其他順序。從第二個重組克隆的插入片段再分離出末端小片段篩選第三個重組克隆,如此

    種子DNA提取儀是種子DNA提取的好方法

    ??? 隨著社會和科技的發展,在種子研究等領域,快速而經濟的從種子樣品中提取高產量、高純度的基因組DNA已經成為植物分子生物學研究的首要問題,過去傳統的種子DNA提取方法非常復雜,需要用到大量的試劑,容器等,提取所需要花費的時間也非常長,因此是明顯不符合現代科學研究的發展需要的,而種子DNA提取

    葡糖胺的提取方法

    提取方法:葡糖胺在自然界存在于甲殼類動物種,人體可在日常食用蝦、蟹中攝取,但消化吸收時會大量損耗。僅日本有提煉葡糖胺,并合成健康食品的技術,且多配合輔酶Q10及膠原蛋白,用以保養肌膚、抗衰老。

    柚苷的提取方法介紹

    柚苷易溶于酒精和堿液,也能溶于熱水,根據這一特性,通常采用堿法和熱水法提取。其生產工藝流程如下:柚皮→粉碎→浸石灰水或熱水浸提→過濾→冷卻沉淀→分離→干燥和粉碎→成品。熱水法熱水法提取過程如下:柚皮粉碎后,加3~4倍的水,加熱煮沸30min,壓榨得濾液。此步驟可重復2~3次。將濾液濃縮3~5倍后,靜

    食品中PAH的提取方法

    食品的成分一般包括水、脂肪類化合物、芳香烴和有機酸等,其中含有的PAH物質是非極性物質,可以使用多種有機溶劑如氯仿、石油醚、醇類、丙酮、苯等多種物質進行提取。目前提取PAH物質的主要方法有固相萃取、超臨界流體萃取、超聲波提取和索式提取等幾種。通過有機溶劑提取到的PAH物質中可能還含有一定量的非芳烴雜

    多糖的提取有哪些方法

    植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常采用酶解、微波、超聲波,膜處理和CO超臨界萃取等方法進行輔助提取或精制.最常用的還是水提醇沉法.

    蔗糖酶的提取方法介紹

    酵母提純酵母離心(8 000 r/min)15 min后收集菌體。將收集到的菌體用蒸餾水洗滌,離心,再洗滌,重復數次,直到菌體呈白色,傾出上清液,將不含雜質的干凈的酵母保存待用。粗酶液的制備準確稱取離心分離后的酵母10 g,加入60 mL 0.5 mmol/L的SDS溶液溶解,在pH值為5.5、50

    氧化鏑的提取純化方法

    一種氧化鏑的提取純化方法,包括如下步驟:1、待提純液配置:配置待提純氧化鏑混合溶液;2、中間劑配置:配置延緩劑和淋洗劑,延緩劑為Cu(NO3)2·3H2O、水和硝酸配置而成,淋洗劑為固體EDTA酸、水和氨水配置而成;3、分離柱準備:分離柱作為離子交換的載體;4、淋洗柱Chemicalbook轉型:對

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