1)取30ml藍藻溶液于10000rpm離心15分鐘,將沉淀小心轉至1.5mlEppendorf管中;2)用1 mlTE(PH8.0)洗沉淀,12000rpm離心10分鐘,棄上清;加240μL BufferA和60μL的5M NaCl,每管加Sarkosyl(原濃度是10%)至終濃度為0.1%。3)于4℃保溫1小時;12000rpm離心2分鐘,取沉淀。以500μL溶液(由49.99ml BufferA和10μL 1mM Nacl組成)洗2次,重懸細胞于250μL溶液(BufferA+25%蔗糖),室溫放置1小時;5)加50mg/ml溶菌酶至其終濃度為10~20mg/ml。于30℃放置15~30分鐘;加500μL BufferB(由10mMTriscl和50mM Na2EDTA組成),37℃,放置30分鐘;6)加10%的SDS至終濃度為1%,小心混勻,37℃放置1小時;7)加20mg/ml的蛋白酶K至終濃度為100μL/ml.于3......閱讀全文
DNA的不同提取方法及比較傳統的DNA提取方法傳統的DNA 提取與純化,如 CTAB 法、SDS 法是在裂解細胞的基礎上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA 酶除去核酸中的RNA; 然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70
質粒是存在于細菌染色體外的一個或多個能獨立復制并穩定遺傳的小型環狀雙鏈DNA分子,其分子量一般在0.2-10KD范圍內。由于質粒分子小,便于分離和提取,可以攜帶目的基因進入細菌、動物細胞或植物體內進行擴增與表達。 質粒提取方法即去除 RNA,將質粒與細菌基因組 DNA分開,去除蛋白質及其它雜質
7月17日在Nature上發表的一份研究報告表明,插入一個基因片段可以讓導致唐氏綜合癥的額外21號染色體副本“沉默”。該方法可幫助研究人員識別疾病癥狀背后的細胞通路,并設計針對性的治療方法。 “這種策略可以通過多種方式被使用,而且我認為它現在就可以發揮作用,” 伍斯特馬薩諸塞醫學院的細胞生
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突變和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表達和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
【摘要】近年微陣列一比較基因組雜交(microarraycomparativegenomichybirdization,microarray.CGH)技術被應用到臨床細胞遺傳學領域。該技術是選擇DNA特殊片段作為靶,固化在載體上,形成密集、有序的分子微陣列。然后,從測試標本中提取DNA,將測試DNA
結核桿菌可以導致全身性疾病,特別是在發展中國家,其發病率較高,危害性極大.近幾年結核桿菌的變異性較大,對抗癆藥物的耐藥性增加,從而使結核病的發病大幅度增高.雖然傳統的涂片抗酸染色、細菌培養以及胸片檢查對大部分結核能作出正確的診斷,但對某些病人亦可造成誤診或漏診;動物接種雖特異性較高,但因時間較長
現在較常用的質粒提取方法有三種:堿裂解法、煮沸法和去污劑裂解法,前兩種方法較為劇烈,適用于較小的質粒(<15Kb),而去污劑裂解法則比較溫合,一般用于分子量較大的質粒(>15Kb)。 堿裂解法是一種廣泛使用的制備質粒DNA的方法。其原理為:染色體DNA遠遠大于質粒DNA,染色體DNA為線狀
實驗概要本實驗介紹了人癌細胞染色體制備的基本原理及操作步驟。有助于學習人類染色體制備的常規方法,了解人癌細胞染色體及其變異。實驗原理目前大多數癌癥都建立了相應的細胞株或細胞系,體外培養的癌細胞多屬于連續的周期細胞,可以用來制備染色體。國內外制備動物和人類染色體的常規方法是空氣干燥法,該方法的關鍵包括
一、實驗目的學習人類染色體制備的常規方法,了解人癌細胞染色體及其變異。二、實驗原理目前大多數癌癥都建立了相應的細胞株或細胞系,體外培養的癌細胞多屬于連續的周期細胞,可以用來制備染色體。國內外制備動物和人類染色體的常規方法是空氣干燥法,該方法的關鍵包括:1.秋水仙素的預處理:秋水仙素又叫秋水仙堿,它是
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
實驗材料:小麥 試劑、試劑盒:β-巰基乙醇 &nb
在司法鑒定、分子生物學、生物制藥等領域,離心機幾乎是實驗室中出鏡率最高的儀器了,而離心溫度控制一直是最關鍵卻容易被忽視的一點。今天就讓小編帶你走近離心機的世界一探究竟吧!相信看過美劇《CSI》(犯罪現場調查)的朋友們一定對劇中諸如指紋數據庫、從帶血棉簽中五分鐘內驗出DNA等等炫酷的證據檢測橋段并不陌
當一顆精子鉆入卵細胞后,一個生命的冒險之旅就啟動了。經過有絲分裂、減數分裂,攜帶父母親遺傳密碼的受精卵逐漸發育成胚胎。然而,并不是所有遺傳指令都能被正確傳達,突發的錯誤將讓小小生命體遭受巨大的劫難——或過早夭折,或帶著不可治愈的缺陷降生。 對于奉行物競天擇法則的動物世界來說
離心機的世界也可以很有趣——你所不知道的“溫度控制”相信看過美劇《CSI》(犯罪現場調查)的朋友們一定對劇中諸如指紋數據庫、從帶血棉簽中五分鐘內驗出DNA等等炫酷的證據檢測橋段并不陌生,雖然是源于想象的虛構,但卻自然而逼真。其實,縱觀司法科學鑒定技術的發展長河,《CSI》里面的許多高科技手法在現實中
實驗方法原理比較基因組雜交(CGH)是一種能夠在一步全基因組篩查程序,描述G帶不能發現的細胞遺傳物質增加或減少的分子細胞遺傳學技術。CGH優于進行全染色體涂染(wcp)的常規熒光原位雜交(FISH)和多色FISH之處,是它不僅能夠識別增加的未知片段的染色體來源,而且還可將該片段定位于特定的染色體區帶
一、基因檢測公司梳理 目前全國涉及基因檢測概念的公司有200余家,按照業務范圍劃分,這些公司可以分為:①最上游的基因檢測儀器開發企業(測序儀、芯片掃描儀、PCR設備),②提供樣本處理試劑和耗材的中上游企業(建庫試劑盒、檢測試劑盒、工具酶、基因芯片),③提供第三方基因檢測服務的中游企業
相信看過美劇《CSI》(犯罪現場調查)的朋友們一定對劇中諸如指紋數據庫、從帶血棉簽中五分鐘內驗出DNA等等炫酷的證據檢測橋段并不陌生,雖然是源于想象的虛構,但卻自然而逼真。其實,縱觀司法科學鑒定技術的發展長河,《CSI》里面的許多高科技手法在現實中已被廣泛應用,特別是DNA技術的應用無疑是個歷史性的
細菌質粒的發現是微生物學對現代分子生物學發展的重要貢獻之一。特別是自 70 年代末以來,根據質粒分子生物學特性而構建的一系列克隆和表達載體更是現代分子生物學發展、改良生物品種和獲得基因工程產品不可缺少的分子載體,發展十分迅速,而質粒的分離和提取則是最常用和最基本的實驗技術,其方法很多。僅大腸桿菌質粒
關于《胎兒染色體非整倍體(T21、T18、T13)檢測試劑盒(高通量測序法)指導原則》(征求意見稿)公開征求意見的通知 各有關單位: 根據我中心2016年度醫療器械技術審查指導原則編寫的任務安排,我中心組織編寫了《胎兒染色體非整倍體(T21、T18、T13)檢測試劑盒(高通量測序法)指導原則》(
據報道,全世界每年出生的各種缺陷兒約790萬,70%的出生缺陷系遺傳因素所致,而染色體異常是最常見的遺傳因素,其中21三體發病率最高,其發生機制為生殖細胞在進行減數分裂時21號染色體不分離,造成21號染色體拷貝增加。迄今為止,唐氏綜合征沒有有效的治療方法,只能通過產前篩查與早期診斷才能減少或避免
據報道,全世界每年出生的各種缺陷兒約790萬,70%的出生缺陷系遺傳因素所致,而染色體異常是最常見的遺傳因素,其中21三體發病率最高,其發生機制為生殖細胞在進行減數分裂時21號染色體不分離,造成21號染色體拷貝增加。迄今為止,唐氏綜合征沒有有效的治療方法,只能通過產前篩查與早期診斷才能減少或避免
實驗目的 1、掌握最常用的提取質粒DNA的方法和檢測方法; 2、了解制備原理及各種試劑的作用。 實驗原理 堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA
實驗目的1、掌握最常用的提取質粒DNA的方法和檢測方法;2、了解制備原理及各種試劑的作用。實驗原理堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性,再將pH值調至中性使其復性,復性的為質粒DNA,而染色體DNA不會復性,纏結成網狀物質,通過離心除去。細菌質粒是一類雙鏈、閉環
染色體 CGH 的獨特優點在于它的全基因篩查功能,與檢測單一靶 DNA 劑量改變的低通量方法,如 Southern 分析、PCR 和熒光原位雜交(FISH) 相比,速度顯著提高且省力。目前染色體 CGH 是一種比較完善的分子細胞遺傳學方法,但是它的兩個缺陷限制其作為一種綜合性篩查工具的應用。來源:《
據國外媒體報道,今年十月,英國政府要求生育管理機構對一項來自中國的新研究進行調查。該研究采用了一種微創形式的試管嬰兒技術,能降低新生兒出生缺陷的風險。 近日,英國人類受精和胚胎管理局(HFEA)發布了關于這項研究的報告,稱其中采用的技術“很有前景”,而且與現有技術相比“可能具有潛在優
血液是唯一與所有器官都有接觸的組織,攜帶著有關機體的大量寶貴信息。在理論上,檢測血液攜帶的 DNA、RNA、囊泡和細胞殘骸可以幫助人們診斷和監控各種疾病。 產前基因篩查是血液檢測的一個重要應用,通過分析孕婦血液中的胎兒DNA來鑒定染色體異常(比如唐氏綜合癥)。此外,越來越多的研究者開始關注血液
實驗原理染色體顯帶(Banding)技術是一種用染料對染色體進行分化染色的方法。就是將染色體經酸、堿、溫度等處理后,再以染料染色,或單用某些熒光染料就可以染出深淺不同或明暗各異的帶紋的縱向結構。此項技術發明于本上世紀六十年代末、七十年代初,發展至今已是非常成熟。1971年在巴黎召開第四次國際人類遺傳
實驗概要1、了解染色體顯帶技術的基本知識; 2、學習小白鼠骨髓細胞染色體顯帶(C帶)技術。實驗原理染色體顯帶(Banding)技術是一種用染料對染色體進行分化染色的方法。就是將染色體經酸、堿、溫度等處理后,再以染料染色,或單用某些熒光染料就可以染出深淺不同或明暗各異的帶紋的縱向結構。此項技
實驗原理染色體顯帶(Banding)技術是一種用染料對染色體進行分化染色的方法。就是將染色體經酸、堿、溫度等處理后,再以染料染色,或單用某些熒光染料就可以染出深淺不同或明暗各異的帶紋的縱向結構。此項技術發明于本上世紀六十年代末、七十年代初,發展至今已是非常成熟。1971年在巴黎召開第四次國際人類遺傳
質粒DNA的提取與純化質粒是一類雙鏈、閉環的DNA,大小范圍從1 kb至200 kb以上不等。通常情況下,質粒可持續穩定地處于染色體外的游離狀態,具有自主復制功能;但在一定條件下也會可逆地整合到宿主染色體上,隨著染色體的復制而復制,并通過細胞分裂傳遞到后代。 質粒已成為核酸克隆和測序最常用