薄層層析操作要點
鋪板鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀:過稠,板容易出現拖動或停頓造成的層紋;過稀,水蒸發后,板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G:水=1:2~3,硅膠G:羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時間,根據經驗來定,與空氣濕度有關,一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷,越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外,也影響板涂層的厚度,進一步影響上樣量。涂層薄,點樣易過載;涂層厚,顯色不那么明顯。通常,板的質量對薄層鑒別的影響不是很大,影響最大的是展開劑的配制和展開系統的飽和。點樣盡量用小的點樣管。如果有足夠的耐性,最好只用1微升的點樣管。這樣,點的斑點較小,展開的色譜圖分離度好,顏色分明。樣品溶液的含水量越小越好,樣品溶液含水量大,點樣斑點擴散大。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。點好樣的薄層板用電吹風的熱風吹干或放入干燥器里晾干。展開劑配制選擇合適的量器把各組成溶劑移入分液漏斗,強烈振搖使混合液充分混勻,放置,如果分層,......閱讀全文
薄層層析的定量測定
薄層層析的定量測定:? ? 1)直接測定法:色譜分離后,直接用肉眼觀察比較或用儀器掃描斑點而測定其含量。? ? a.目測法樣品經色譜分離后,直接觀察所得斑點的大小和顏色的深淺,并與標準品在相同條件下展開所得到的一系列已知不同濃度的標準斑點相比較,而近似地判斷樣品中所測成分的含量。? ? b.測面積法
什么叫薄層層析法
薄層層析又叫薄層色譜,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發性較小或較高溫度
薄層層析的定性檢測
薄層層析的定性檢測:展開完畢后,把薄層從層析缸中取出,用鉛筆劃出或小針刺出展開劑前緣的位置,隨即進行顯色,以確定各個斑點的位置、Rf值和顯色情況,從而判斷試樣中含有哪些組分。有色物質經展開后呈現明顯的色斑,很易判斷。對于無色物質,可根據化合物的性質,用物理檢出法、化學檢出法、酶與生物檢出法和放射性檢
薄層層析(TLC)方法(一)
? 薄層層析是將吸附劑或者支持劑(有時加入固化劑)均勻地鋪在一塊玻璃上,形成薄層。把欲分離的樣品點在薄層上,然后用適宜的溶劑展開,使混合物得以分離的方法。由于層析在薄層上進行故而得名。 薄層層析是一種微量、快速的層析方法。它不僅可以用于純物質的鑒定,也可用于混合物的分離、提純及含量的測定。還可以通
薄層層析,高效液相層析各有什么特點
紙層析:英文為thin layer chromatography 又稱薄層色譜,色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術,屬固—液吸附色譜,兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又
紙層析和柱層析薄層層析高效液相層析各有什么特點
紙層析:英文為thin layer chromatography 又稱薄層色譜,色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術,屬固—液吸附色譜,兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又
什么是薄層層析板,如何利用薄層層析版來鑒定化合物
什么是薄層層析板,如何利用薄層層析版來鑒定化合物活化的目的是除除硅膠中吸附的水分子,增加硅膠板的吸附能力;一般剛打開的塑料封裝的可以不活化,打開放置一段時間后再用是需要活化,105度烘30min即可。化工行業上的名詞“硅膠板”只是一個簡稱,其全稱應該叫薄層層析硅膠板,也叫高抗撕硅膠板它用高純度薄層層
什么是薄層層析板,如何利用薄層層析版來鑒定化合物
什么是薄層層析板,如何利用薄層層析版來鑒定化合物 活化的目的是除除硅膠中吸附的水分子,增加硅膠板的吸附能力;一般剛打開的塑料封裝的可以不活化,打開放置一段時間后再用是需要活化,105度烘30min即可。 化工行業上的名詞“硅膠板”只是一個簡稱,其全稱應該叫薄層層析硅膠板,也叫
薄層色譜操作
薄層色譜操作1、點樣:除另有規定外,用點樣器點樣于薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,點樣直徑為2-4mm,點間距離約為1.5-2.0cm,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。2、 展開:展開室如需預先用展開劑飽和,可在室中加入足夠量的展開劑,并在壁上
概述薄層層析的分析程序
將樣品溶液用毛細管點在薄層板的一端,置密閉槽中,加入適宜溶劑為流動相。由于毛細管原理,溶劑被吸上,沿板移動,并帶動樣品中各組分向前移動,這個過程稱為展開。由于各組分性質不同,移動距離不同,展開一定距離后,即得互相分離的組分斑點。可用適當方法使各組分在板上顯示其位置,如組分本身有顏色,即可直接觀察
薄層層析顯色劑如何選擇
1.如果靈敏度要求不高,可以加熱碳化顯色。 2.必須要告訴你的化合物結構,才可以根據特殊結構選擇顯色劑。如有共軛體系可以照紫外顯色;如含有-NH2可用茚三酮顯色等等。至于其他結構如含有糖類,酚類都有相應的比較適合的顯色劑。
薄層層析的分析程序介紹
將樣品溶液用毛細管點在薄層板的一端,置密閉槽中,加入適宜溶劑為流動相。由于毛細管原理,溶劑被吸上,沿板移動,并帶動樣品中各組分向前移動,這個過程稱為展開。由于各組分性質不同,移動距離不同,展開一定距離后,即得互相分離的組分斑點。可用適當方法使各組分在板上顯示其位置,如組分本身有顏色,即可直接觀察,否
氨基酸的薄層層析
原理 介紹層析的概念 所謂層析,就是利用樣品中各組成成分的理化性質的差異,使各組分以不同程度分布在固定相和流動相兩相中,由于各組分隨流動相前進的速率不同,從而把它們分離開來的技術。這些物理特性包括分子的大小、形狀、所帶電荷、揮發性、溶解性及吸附性質等。層析系統的必要組分有:
薄層層析板常用制備方法
薄層層析板制備方法有很多,有手工的,也有機械的。如果薄層層析板用量較少,可以用手工的,如果用量較大,還是用機械的更加方便快捷!下面先介紹一下配置方法:1. CMC-Na溶液的配置:一般其濃度為0.3~0.5%,根據自己經驗而定(我習慣用0.4%的)。具體方法如下:先將預用的水加熱至60~70℃,然后
薄層層析的應用和發展
廣泛應用于石油、化工、醫藥、生化等方面。樣品用量一般為幾至幾百微克,是一種較實用、有效的微量分離分析方法。此法也可用于分離制備較大量的樣品,即使用較大較厚的薄層板,將樣品溶液在起始點處點成條帶狀,這樣可以分離毫克量樣品。
薄層層析板常用制備方法
薄層層析板制備方法有很多,有手工的,也有機械的。如果薄層層析板用量較少,可以用手工的,如果用量較大,還是用機械的更加方便快捷!下面先介紹一下配置方法:CMC-Na溶液的配置:一般其濃度為0.3~0.5%,根據自己經驗而定(我習慣用0.4%的)。具體方法如下:先將預用的水加熱至60~70℃,然后加入C
糖的聚酰胺薄層層析
一、實驗目的1.熟悉掌握薄層層析的實驗操作。2.了解聚酰胺薄層層析法測定糖的原理和方法。二、實驗原理用于層析的聚酰胺有兩類,一類是錦綸66(尼龍),另一類是錦綸6。在這兩類材質中,都含有大量酰胺基團,故統稱聚酰胺。聚酰胺以其-CO-或-NH-與極性化合物的-OH 或=O 之間形成氫鍵,從而發
薄層層析的原理是什么
1.薄層層析法也叫薄層色譜法,是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術,這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質的特別有效的層析方法。2.基本原理:吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力
常見色層分析薄層層析
薄層層析在玻璃片、金屬箔或塑料片上鋪上一層約1~2毫米的支持物,如纖維素、硅膠、離子交換劑、氧化鋁或聚酰胺等,根據需要做不同類型的層析。聚酰胺薄膜是一種特異的薄層,將尼龍溶解于濃甲酸中,涂在滌綸片基上,當甲酸揮發后,在滌綸片基上形成一層多孔的薄膜,其分辨力超過了用尼龍粉鋪成的薄層。薄層層析較紙層析優
如何自制薄層層析硅膠板
1.取25g 羧甲基纖維素鈉,在攪拌下加入到5000mL 水中,強力搖勻,放置備用。使用時,用300 目絲網過濾,所得濾液即為鋪制薄層板的優質CMC 溶液。(由于CMC 在水中溶解速度很慢,放置兩周或更長的時間,才可以溶解比較完全。可以采用一次性配制較多的溶液,留待以后多次使用。盡管放置較長時間,C
薄層層析的原理是什么
1.薄層層析法也叫薄層色譜法,是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術,這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質的特別有效的層析方法。2.基本原理:吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力
薄層色譜的原理及應用要點
薄層色譜,或稱薄層層析(thin-layer chromatography),是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質的特別有效的層析方法,從50年代發展起來
薄層色譜的原理及應用要點
薄層色譜,或稱薄層層析(thin-layer chromatography),是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質的特別有效的層析方法,從50年代發展起來
薄層色譜的操作
薄層色譜的操作包括:吸附劑的選擇、薄層板的制作、展開劑的選擇、點樣、展開、定位于顯色、薄層層析的定量。
薄層色譜操作技術
發布資訊實驗概要本文介紹了薄層色譜的操作技術。實驗原理1. 原理薄層色譜(Thin Layer ?Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。樣品在薄層板上的吸附劑(固定相)和溶劑(移動相)之間進行分離。由于各種化合物的吸附能力各不相同,在展開劑上移時,它們進行不
旋轉薄層層析的概念和原理
中文名稱旋轉薄層層析英文名稱rotating thin-layer chromatography定 義用硅膠板等薄層析材料代替濾紙,在圓形層析材料距圓心適當距離位置處點樣后置于離心軸上,在離心力作用下,溶劑借離心力向外周移動,能加快層析速度的層析技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法
旋轉薄層層析的基本概念
中文名稱旋轉薄層層析英文名稱rotating thin-layer chromatography定 義用硅膠板等薄層析材料代替濾紙,在圓形層析材料距圓心適當距離位置處點樣后置于離心軸上,在離心力作用下,溶劑借離心力向外周移動,能加快層析速度的層析技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法
關于薄層層析法的應用介紹
廣泛應用于石油、化工、醫藥、生化等方面。樣品用量一般為幾至幾百微克,是一種較實用、有效的微量分離分析方法。此法也可用于分離制備較大量的樣品,即使用較大較厚的薄層板,將樣品溶液在起始點處點成條帶狀,這樣可以分離毫克量樣品。
薄層層析法可以鑒別哪些物質
很多,比如說中藥方面,有效成分:生物堿類物質,黃酮類物質,醌類物質等;特性的薄層還可以鑒別蛋白質等物質。
薄層層析分離中的點樣
薄層層析分離中的點樣是將經離心機處理后的樣品點在薄層的特定部位,點樣的好壞直接影響分離效果。點樣可用玻璃毛細管或微量移液管等。一、點樣位置:1、上行展開法點樣一般在距薄層下端4~125px處。2、下行展開法點樣一般在距薄層上端6~200px處。3、雙向展開法點樣處應位于距薄層右側邊125px與距底邊