NaCl離心法去除質粒DNA制備物中的小片段核酸實驗
實驗方法原理 常規的質粒 DNA 制備物中都會不同程度地污染有來自宿主菌基因組或質粒斷裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。盡管它們的分子質量不大,但數量多,會對制備物中 DNA 片段 3' 和 5' 端的總量產生明顯影響。 試劑、試劑盒 乙醇 NaCl 乙酸鈉 TE 胰 RNase 儀器、耗材 Beckman SW 50.1 轉子 實驗步驟 ......閱讀全文
質粒DNA提取實驗
實驗方法原理?質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子,是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作,進行遺傳工程改良物種等工作時最主要的DNA載體。?提取質粒的基本步驟分為三步:①細菌的培養和質粒的擴增②細菌菌體的裂解③質粒DNA的純化實驗材料?大腸桿菌試劑、試劑盒
質粒DNA的轉化
實驗概要本實驗將人Bcl-2重組質粒轉化DH5α擴增菌,轉化后在含Amp的培養基上進行篩選,生長的菌落即為含重組質粒的工程菌。含人Bcl-2重組質粒的DH5α菌用于質粒DNA的擴增,獲得的質粒將作為限制性內切酶的酶切底物DNA。實驗原理轉化是將外源DNA分子導入到受體細胞,使之獲得新的遺傳特性的一種
質粒DNA提取實驗
堿解法SDS堿裂解法(試劑盒提取)實驗方法原理堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性,再將pH值調至中性使其復性,復性的為質粒DNA,而染色體DNA不會復性,纏結成網狀物質,通過離心除去。實驗材料大腸桿菌 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
質粒DNA的純化
聚乙二醇沉淀法質粒DNA氯化銫-溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA(一)聚乙二醇沉淀法提取質粒DNA1)將核酸溶液所得]轉入15mlCorex 管中,再加3ml 用冰預冷的5mol/L LiCl溶液,充分混勻,用合適轉頭于4℃下以10 000轉/分離心10分鐘。LiCl可沉淀高分子RNA。2)將上
質粒DNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性,再將pH值調至中性使其復性,復性的為質粒DNA,而染色體DNA不會復性,纏結成網狀物質,通過離心除去。
質粒DNA電泳鑒定
1.目的學會常用的DNA瓊脂糖凝膠電泳。2.原理DNA雙螺旋分子骨架兩側帶有含負電荷的磷酸根,在電場中會向正極方向移動。不同長度的DNA由于受到凝膠介質的阻力不同,表現為不同的遷移率而被分開。3.器材電泳儀,水平凝膠電泳槽和梳子及其制膠模塊,250ml三角瓶,微波爐,臺式離心機,旋渦混合器,凝膠成像
質粒DNA提取技術
實驗概要通過本實驗,學習和掌握堿裂解法提取質粒的方法和技術。實驗原理質粒是基因工程中常用的載體之一。質粒是染色體外小型雙鏈環狀的DNA,大小在1~200kb之間。堿裂解法提取質粒是根據共價閉合環狀DNA與線性染色體DNA在拓撲學上的差異來分離它們的。在pH值介于12.0~12.5這個狹窄的范圍內,線
質粒DNA的提取
實驗概要? ? ? ? 通過本實驗學習和掌握堿裂解法提取質粒。實驗原理? ? ? ? ?堿裂解法提取質粒是根據共價閉合環狀質粒DNA與線性染色體DNA在拓撲學上的差異來分離它們。在pH值介于12.0~12.5這個狹窄的范圍內,線性的DNA雙螺旋結構解開而被變性,盡管在這樣的條件下,共價閉環質粒DNA
質粒DNA提取時質粒為何會丟失
中穩定存在,經多次轉接后有可能造成質粒丟失。因此不要頻繁轉接,每次接種時應接種單菌落。另外,檢查篩選 用
質粒DNA大量制備實驗
實驗方法原理?這一方案科能是最常用的質粒制備方法,該法不僅相當決捷可靠,而且可獲得相當純凈的粗制DNA。實驗材料?大腸桿菌試劑、試劑盒?葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS異丙醇乙醇乙酸甲儀器、耗材?離心機漩渦混合器水浴鍋實驗步驟?1.? 往2 ml 燒瓶中加入500 ml ,含有適當抗生素的L