高效液相色譜法的主要類型和分離原理
根據分離機制的不同，高效液相色譜法可分為下述幾種主要類型： 1 .液—液分配色譜法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶(極性不同，避免固定液流失)，有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱，溶質在兩相間進行分配。達到平衡時，服從于下式： 式中，cs—溶質在固定相中濃度;cm--溶質在流動相中的濃度; Vs—固定相的體積;Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K，K大的組分保留值大;但也有不同之處，GPC中，流動相對K影響不大，LLPC流動相對K影響較大。 a.正相液—液分配色譜法(Normal Phase liquid Chromatography):流動相的極性小于固定液......閱讀全文
尺寸排阻色譜法
一. 分離原理 尺寸排阻色譜法：是按分子尺寸的差異進行分離的一種液相色譜方法，也稱凝膠色譜法。 排阻色譜的固定相多為凝膠。凝膠是一種由有機分子制成的分子篩 , 其表面惰性 , 含有許多不同大小孔穴或立體網狀結構。凝膠的孔穴大小與被分離組分大小相當 , 對不同大小的組分分子則可分別
尺寸排阻色譜法是依據什么來是實現分離的
是利用樣品分子大小尺寸來進行分離的。色譜柱里面有許多帶有孔洞的球型顆粒，小分子的物質分子會進入這些孔洞再出來，所以會增加停留時間，而大分子進不去這些孔洞，就在球型顆粒之間的縫隙直接通過。所以大分子先出色譜柱，先出峰，小分子后出色譜柱，后出峰。
離子交換色譜法的分離原理
離子交換色譜（ion exchange chromatography，IEC）以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。陽離子交換:陰離子交換:
離子交換色譜法的分離原理
(Ion-exchange Chromatography)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子進行可逆交換，依據這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例，其交換過程可表示如下：X-（溶劑中） (樹脂-R4N C
離子交換色譜法的分離原理
離子交換色譜（ion exchange chromatography，IEC）以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。陽離子交換:陰離子交換:
離子交換色譜法的分離原理
離子交換色譜（ion exchange chromatography，IEC）以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。陽離子交換:陰離子交換:
常用液相色譜柱按照分離模式
色譜柱常用液相色譜柱按照分離模式大致可以分為吸附、分配、鍵合相、離子交換、疏水作用、體積排阻（凝膠）、親和及手性等類型，表給出了不同類型色譜柱的分離原理及應用情況。
選擇合適尺寸排阻色譜法分離蛋白質—選擇流動相
選擇色譜柱之后，下一個最重要的決定就是準確選擇將進入流動相的物質。如上所述，SEC分離的基本原則之一是應選擇條件，以使保留（化學意義上）最小。如果實現了此方法，則可確保洗脫體積是分子大小的指標。乍一看，這似乎應該很簡單-我們應該選擇一種固定相，該固定相不會通過與分析物的特定類型的相互作用而強烈地
高效液相色譜儀離子交換色譜法和分子排阻色譜法
固定相是離子交換樹脂。樹脂上可電離離子與流動相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進行交換，根據各離子與離子交換基團具有不同的電荷吸引力而分離。 分子排阻色譜法又稱凝膠色譜法，它是按照分子尺寸大小順序進行分離的一種色譜方法。分子排阻色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料，有一定的形狀和穩定性
離子排阻色譜儀分類
離子排阻色譜儀分類有多種。 1、按分離目的可分：實驗室離子排阻色譜儀和工業離子排阻色譜儀。 2、按結構可分：臺式離子排阻色譜儀和落地式離子排阻色譜儀。 3、按分離規模可分：小型離子排阻色譜儀和大型離子排阻色譜儀。 4、按功能可分：離子排阻分析色譜儀和離子排阻制備色譜儀。 5、按用途可分：
Zenix－體積排阻色譜柱特點
Zenix 體積排阻色譜柱特點：● 3 μm粒徑● 100、150、300 ?的孔徑選擇● 極高的分離效率和分辨率● 高容量● 在低和高鹽濃度下有高穩定性● 批間重復性● 高的蛋白回收率而不破壞生物活性● 可忽略的非特異性反應● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒類生物分子能實現理想的分析和分離● 自
離子排阻色譜儀概述
離子排阻色譜儀是利用溶質和固定相之間的Donnan排斥、吸附和空間排阻作用而達到分離。一、分離模式：1、Donnan排斥：帶負電荷的Donnan膜允許未離解的化合物通過，而不允許完全離解的化合物通過。2、吸附：保留時間與有機酸的烷基鍵的長度有關。通常烷基鍵越長，保留時間越長。3、空間排阻：有機酸的分
關于分子排阻色譜的介紹
SEC 是利用多肽分子大小、形狀差異來分離純化多肽物質，特別對一些較大的聚集態的分子更為方便，如人重組生長激素（hgH）的分離，不同結構、構型的GH 在SEC 柱上分離行為完全不同，從而可分離不同構型或在氨基酸序列上有微小差異的變異體，利用SEC 研究修飾化的PEG 的分離方法，此PEC 具有半
什么是排阻色譜法？
排阻色譜法（size exclusion chromatography，SEC）是一種根據試樣分子的尺寸進行分離的色譜技術。又稱為凝膠色譜法、分子排阻色譜法、尺寸排阻色譜法等，是液相色譜的一種。
離子排阻色譜法（ICE）
這種分離模式包括Donnan排斥、空間排斥和吸附過程。固定相通常是由總體磺化的聚乙烯/二乙烯基苯共聚物形成的高容量陽離子交換樹脂。ICE可以用于從完全離解的強酸中分離有機弱酸和硼酸鹽的測定。在上面的保留模式中，帶有負電荷的Donnan膜允許未解離的化合物通過而不允許完全解離的酸如鹽酸通過，因為氯離子
分子排阻色譜法介紹
分子排阻色譜法是根據分子大小進行分離的一種液相色譜技術。分子排阻色譜法的分離原理為凝膠色譜柱的分子篩機制。色譜柱多以親水硅膠、凝膠或經修飾凝膠如葡聚糖凝膠Sephadex和聚丙烯酰胺凝膠Sepherose等為填充劑，這些填充劑表面分布著不同尺寸的孔徑，藥物分子進入色譜柱后，它們中的不同組分按其大小進
離子排阻色譜儀概述
離子排阻色譜儀是利用溶質和固定相之間的 Donnan 排斥、吸附和空間排阻作用而達到分離。一、分離模式：1、Donnan 排斥：帶負電荷的 Donnan 膜允許未離解的化合物通過，而不允許完全離解的化合物通過。2、吸附：保留時間與有機酸的烷基鍵的長度有關。通常烷基鍵越長，保留時間越長。3、空間排阻：
實驗室分析儀器液相色譜柱的色譜柱的分類
基于不同原理和角度，高效液相色譜柱和固定相可以有不同的分類方式。液固色譜固定相按基質材料可分為無機氧化物、聚合物等主要類型；按結構和形狀分為薄殼型和全孔型，無定形和球形，整體柱等；按固定相表面改性與否分為吸附型和化學鍵合型；按照分離模式可以分為正相、反相、離子交換、疏水作用、體積排阻、親和、手性等類
選擇高效液相色譜分析法的概述
要正確地選擇色譜分離方法，首先必須盡可能多的 了解樣品的有關性質，其次必須熟悉各種色譜方法的主要特點及其應用范圍。選擇色譜分離方法的主要根據是樣品的相對分子質量的大小，在水中和有機溶劑中的溶解度，極性和穩定程度以及化學結構等物理、化學性質。 相對分子質量 對于相對分子質量較低（一般在200以
正確地選擇色譜分離方法的條件介紹
要正確地選擇色譜分離方法，首先必須盡可能多的 了解樣品的有關性質，其次必須熟悉各種色譜方法的主要特點及其應用范圍。選擇色譜分離方法的主要根據是樣品的相對分子質量的大小，在水中和有機溶劑中的溶解度，極性和穩定程度以及化學結構等物理、化學性質。 1、相對分子質量 對于相對分子質量較低（一般在20
色譜分離方法的選擇
要正確地選擇色譜分離方法，首先必須盡可能多的了解樣品的有關性質，其次必須熟悉各種色譜方法的主要特點及其應用范圍。 選擇色譜分離方法的主要根據是試樣的相對分子質量的大小、在水中和有機溶劑中的溶解度、極性和穩定程度以及化學結構等物理性質和化學性質。 一、相對分子質量 對于相對分子質量較低（一般在20
液相色譜的類型及分離原理
1 液固吸附色譜固定相為硅膠，氧化鋁，極性組份滯留作用大。出峰順序：飽和烴，烯，芳烴，醚，醛酮，酸。2 液液分配色譜1）正相色譜：用弱極性溶劑作流動相（己烷），分析極性物質。常用氨基或氰基鍵合固定相。2）反相色譜：用極性溶劑作流動相（水，甲醇），分析弱極性物質。常用十八烷基鍵合固定相。3 離
常見高效液相色譜的分離類型
??? 常見高效液相色譜法按其分離原理可以分為液-固吸附色譜法、正相液-液分配色譜法、反相液-液分配色譜法、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。以下對這幾種高效液相色譜法進行簡介：? 1.高效液相色譜法：在液固吸附色譜法中，流動相為液體，并使用固體吸附劑，被分離組分在色譜柱上分離原理是根
氣相色譜法有幾種
色譜法有多種類型，從不同角度出發，有各種分類法。(1)按流動相的物態,色譜法可分為氣相色譜法(流動相為氣體)、液相色譜法(流動相為液體)和超臨界流體色譜法(流動相為超臨界流體);再按固定相的物態，又可分為氣一固色譜法(固定相為固體吸附劑)、氣液色譜法(固定相為涂在固體擔體上或毛細管壁上的液體)、液固
尺寸排阻色譜法的定義
基于分子尺寸不同的分析物在化學惰性的多孔固定相的孔隙中保留作用的差異實現分離的一種色譜技術。
分子排阻高效液相層析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
尺寸排阻分析色譜儀分類
尺寸排阻分析色譜儀分類有多種。1、按分離目的可分：化驗室尺寸排阻分析色譜儀和工業尺寸排阻分析色譜儀。2、按作用可分：尺寸排阻定量分析色譜儀和尺寸排阻定性分析色譜儀。3、按進樣自動性可分：自動進樣尺寸排阻分析色譜儀和手動進樣尺寸排阻分析色譜儀。4、按色譜柱容量可分：微量尺寸排阻分析色譜儀和大容量尺寸排
分子排阻高效液相層析實驗
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SE緩沖液儀器、耗材層析柱實驗步驟1. ?用已脫氣HPLC級水洗去SE柱的貯存溶劑，流速1 ml/min。在室溫以已脫氣的SE緩沖液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基線穩定。2. ?注射100 μl ?緩沖液進行一次空白樣品的假層析，檢測器設定在210
全新Phenomenex－Yarra體積排阻色譜柱
2012年6月5日，全球色譜科技領域的領導者----Phenomenex公司發布了一新產品Yarra?-----用于分析生物樣品的體積排阻法色譜柱(SEC)，Yarra對生物樣品的分離較其他同類色譜柱相比提高了70%的柱效。Yarra色譜柱有三種3μm粒徑的固定相可供選擇，不但非常適合用于分解各
分子排阻色譜法的介紹
分子排阻色譜法又稱空間排阻色譜法（SEC）是利用多孔凝膠固定相的獨特性產生的一種，主要根據凝膠孔隙的孔徑大小與高分子樣品分子的線團尺寸間的相對關系而對溶質進行分離的分析的方法。分子排阻色譜又叫凝膠色譜法。