怎么選擇流式抗體
我們開始流式實驗時,首先要選擇抗體,必然要涉及到熒光的選擇,盡量使這些熒光的補償值降到zui低。 1,我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施(激光,濾光片) 2,選擇合適的熒光染料,盡量利用到你的儀器上的所有激光,這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選,常用:FITC,PE,APC,Percp-cy5.5。界面有點不同,但基本原理就是設置好你需要集中顏色,用的是哪臺儀器,幾根激光。。。軟件就會自動列出合適的染料。 3,選擇好熒光染料以后,就是將這些染料與你的抗體起來,這就要根據自己實驗的需要了,有些常用的抗體上可能標記有很多種染料,但有些不常用的選擇性就不太多,所以可以先定一些無法選擇的抗體,然后就是根據表達量少的標記熒光信號強的染料,認為重要的抗體標記熒光信號強的,常用熒光的強弱如下:PE>APC>PE-CY7>Percy-cy5.5......閱讀全文
怎么選擇流式抗體?
我們開始流式實驗時,首先要選擇抗體,必然要涉及到熒光的選擇,盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1,我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施(激光,濾光片)??2,選擇合適的熒光染料,盡量利用到你的儀器上的所有激光,這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選,常用:FI
怎么選擇流式抗體
我們開始流式實驗時,首先要選擇抗體,必然要涉及到熒光的選擇,盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1,我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施(激光,濾光片)??2,選擇合適的熒光染料,盡量利用到你的儀器上的所有激光,這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選,常用:FI
怎么選擇流式抗體?
我們開始流式實驗時,首先要選擇抗體,必然要涉及到熒光的選擇,盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1,我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施(激光,濾光片)??2,選擇合適的熒光染料,盡量利用到你的儀器上的所有激光,這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選,常用:FI
流式抗體選擇
很多朋友面對各種各樣顏色的流式抗體,在選擇及搭配上就犯了難,在此我們需要了解下流式細胞儀的各個激發光及各個接收通道是如何工作的、常見的熒光素有哪些、這些熒光的特性是什么樣的。了解了這些,選擇抗體和搭配不同的顏色就變得非常簡單了。我們再回過頭來看看流式細胞儀的原理,熟悉一下流式細胞儀的光路系統。從這張
免疫組化抗體選擇要點及流式抗體選擇常識
一抗的選擇要點1.選擇單克隆還是多克隆抗體?由一種B細胞產生的單一特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就像導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種B細胞產生抗體,形成抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中,一般單克隆
怎么選擇適合的GAPDH內參抗體?
在Western Bloting實驗中,在遇到總蛋白濃度測定不準確時候,或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作存在誤差;這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參,比如內參GAPDH的含量來進行校正。??GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)是參與糖酵解的一種關鍵酶,由4個30-40kD
流式細胞儀分選細胞,怎樣選擇抗體
有這么幾個原則:盡量使用已經用熒光素標記好的單克隆抗體。如果是單色實驗,熒光素的亮度越強越好,比如標記了APC的抗體就要比標記了pacific blue的在相同抗原量,抗體用量相同的情況下,要亮很多如果是多色實驗,除了不要使用光譜重疊度高的熒光素以外,還要搭配染色指數。簡單的說,就是用亮度強的熒光素
流式封閉抗體報告單怎么看
懷孕之后胎兒是屬于外來物質,會受到免疫細胞的攻擊導致孕婦流產,但是有了封閉抗體的存在,母體會自動將胎兒列為自身物質,保證了寶寶的健康成長,如果孕婦該抗體缺乏的話,是要及時檢查治療的,那流式封閉抗體報告單怎么看?流式封閉抗體報告單怎么看 1、封閉抗體的檢測是做兩管,都是染T亞群(CD3、CD4、
如何選擇流式熒光
這個問題有點不好說,每個熒光都有自己在某個波長的最大吸收峰,原則上最大吸收峰差的越遠補償越小,FITC PE APC 最常用的三個熒光,一般一管染三種抗體就選這三個顏色,便宜,而且好染。如果再加的話可以選PE-cy7或APC-cy7,個人覺得可以,一管不宜染太多種抗體,到時候很難分析,補償也大,結果
怎樣選擇流式同型對照?
同型對照(Isotype Control):使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量和相同的免疫球蛋白及亞型的免疫球蛋白,用于消除由于抗體非特異性結合到細胞表面而產生的背景染色。如果一抗是多抗,可以用an normal serum(與一抗相同的正常血清) (must be the same
流式抗體(熒光抗體)細胞染色步驟與注意
染色緩沖液(BSA)的配制:PBS含有1% FBS和0.09% NaN3,置于冰上或4度冰箱備用。準備單細胞懸液:淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。用冰染色緩沖液洗細胞2次,離心細胞,用冰染色緩沖液重懸細胞,使終濃度為2×107細胞/ml。各取50ul(106細胞)細胞懸液到2個圓底的Ep管中。根據
抗體選擇指南
抗體親和層析原理是蛋白 A和蛋白 G對不同來源的IgG的Fc-區具有高度親和性和特異性。這些蛋白被固定在我們的許多填料上,產生了從腹水、細胞培養上清液和血清中分離IgG和IgG亞類的極好方法。關于抗體親和純化的全部產品系列,見下頁抗體親和填料和層析柱選購指南。???? 蛋白A (Protein
流式細胞儀多色染色與同型對照抗體選擇與搭配
一、如何搭配流式抗體熒光標記流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的:流式細胞儀能檢測多少個通道需要同時檢測檢測多少個指標廠家的抗體有多少種熒光標記如果流式細胞儀的通道越多,那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多A 、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體1) BD流式細胞儀(06版目錄第614頁)
電容怎么選擇
需要電容器求購的人該如何的正確的選擇電容器?( 1 )應根據電路要求選擇電容器的類型。對于要求不高的低頻電路和直流電路,一般可選用紙介電容器,也可選用低頻監介電容器。在高頻電路中,當電氣性能要求較高時,可選用云母電容器、高頻瓷介電容器或穿心瓷介電容器。在要求較高的中頻及低頻電路中,可選用塑料薄膜電容
關于抗體的選擇
對于國內的大多數實驗室來講,做western blot實驗選擇抗體是個頭疼的問題。原因很簡單,買進口抗體捉襟見肘,買國產抗體得需要大無畏的勇氣。在我們實驗室western blot實驗歷程里,我們用過進口抗體,進口抗體國內分裝包裝,國產抗體,質量良莠不齊。 進口抗體一般不會出現閃失:Abca
流式抗體染色不避光會怎樣
流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的: 流式細胞儀能檢測多少個通道 需要同時檢測檢測多少個指標 廠家的抗體有多少種熒光標記 如果流式細胞儀的通道越多,那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多 A、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體 1) BD流式細胞儀 BD流式試劑選擇及應用
如何選擇流式細胞儀
自七十年代出現第一代流式細胞儀以來,隨著計算機技術、電子制造技術、激光技術及熒光素合成技術的不斷發展,現代流式細胞儀已今非昔比,制造工藝、功能、精確度有了質的飛躍。流式細胞儀生產廠商推出各種不同型號的流式細胞儀來滿足用戶的不同需要。現生產流式細胞的廠商全球至少有六家,各廠商產品又有不同的系列,各具特
如何選擇流式細胞儀
自七十年代出現第一代流式細胞儀以來,隨著計算機技術、電子制造技術、激光技術及熒光素合成技術的不斷發展,現代流式細胞儀已今非昔比,制造工藝、功能、精確度有了質的飛躍。?copyright labdd.com??? 流式細胞儀生產廠商推出各種不同型號的流式細胞儀來滿足用戶的不同需要。現生產流式細胞的廠商
如何選擇流式細胞儀
按需選擇。首先明確您要流式細胞儀的目的是什么,比如用來做哪些檢測。然后根據這些需求看市場上有多少符合您需求的。您可以查看各項指標、操作界面和數據處理等方面是不是符合您的要求,和現有的條件是否配套。推薦您選擇貝克曼庫爾特公司的流式細胞儀,貝克曼庫爾特自1953年推出世界上第一臺流式細胞分析儀后,對技術
如何選擇流式細胞儀
自七十年代出現第一代流式細胞儀以來,隨著計算機技術、電子制造技術、激光技術及熒光素合成技術的不斷發展,現代流式細胞儀已今非昔比,制造工藝、功能、精確度有了質的飛躍。流式細胞儀生產廠商推出各種不同型號的流式細胞儀來滿足用戶的不同需要。現生產流式細胞的廠商全球至少有六家,各廠商產品又有不同的系列,各具特
甲肝抗體怎么測
一般要檢測甲肝抗體,可以到當地的醫療機構進行檢測,主要是抽血檢查。但是要注意,甲肝抗體又可以分為IgG抗體和IGM抗體。 第一,IgG抗體提示既往感染甲肝病毒或者注射過甲肝疫苗,說明具有針對甲肝病毒的抵抗力,一般不容易感染甲肝病毒,不容易出現甲型肝炎的發病。 第二,IgM抗體陽性,一般提示近
流式細胞圖怎么看
有兩種,一種散點圖,每一個點代表一個細胞,如FSC-SSC散點圖,FSC代表細胞大小,SSC代表細胞顆粒度,根據散點圖,可以對細胞進行分群。另一種為直方圖,與統計學中直方圖相似,x軸表示一個通道的值,如熒光強度,y軸表示細胞數量。
流式細胞術,怎么處理樣本?
流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)能夠快速測定細胞懸液中單個細胞的生物學性質,并可以對特定的細胞進行分選收集。廣泛用于細胞生物學,免疫學,遺傳學,基礎醫學等領域。接下來的 Protocol 中以小鼠的淋巴細胞為例進行細胞表面和胞內染色。一. 試劑準備Wash Buffer:PBS+1
ros的流式圖怎么豎著排
不同樣本不同時間點的流式圖,這是放在正文中的流式圖,排列如下所示:image此圖特點:①所有樣本的中使用的相同marker,都使用一個,放在一個大坐標中,坐標并沒有使用流式細胞儀自帶的軟件或者是Flowjo標記的標簽,圖是經過了AI或PS編輯;②上端是時間標簽;③右端是樣本標簽;④左端與下端是mar
使用eBioscience流式抗體的常見問題
Q. 是否能渦旋震蕩抗體或重組蛋白?我們不推薦震蕩蛋白或抗體溶液,這會改變產品的特性。通常在運輸過程中,液體有可能已經分散在管子中。推薦使用之前,瞬時離心,這樣抗體會沉到管底,以達到標示的體積。Q. 我能渦旋震蕩已經標記了抗體的細胞樣品嗎?可以,短時震蕩能保持細胞的最佳狀態。Q. 標記了tandem
eBioscience流式抗體常見問題與解答
1、eBioscience公司提供了哪些抗體? ?A:物種——人、小鼠、大鼠、非人靈長類、犬類等。檢測指標——包括細胞表面標記(CD分子,膜骨架,趨化因子受體)和胞內指標(細胞因子,核內轉錄因子)。抗體標記——生物素標記抗體,親和純化抗體以及直標熒光素抗體。eB抗體的直標熒光素有(括號內是發射光波長
雙重染色抗體的選擇
用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一,二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
抗體的選擇和保存
當我們要檢測目的蛋白在組織中表達情況的時候,如何選擇適合我們實驗需要的抗體,并恰當保存使用,是每個科研人員需要細心考慮的。抗體種類繁多,品牌眾?多,技術參數不一,價格和質量更是相差甚大,如何購買到高質量價格合適的抗體,并準確地做出我們想要的結果,其中有很多細節需要注意。一、怎樣選擇適合你實驗需要的抗
如何選擇流式細胞儀(2)
⑼、檢測細胞內因子(TH1/TH2細胞檢測)未活化的淋巴細胞所分泌的細胞因子極少,用流式細胞儀很難檢測出來。因此,在檢測前需刺激活化。活化所用的刺激素為PMA佛波酯+Ionomycin。淋巴細胞在刺激素的作用下活化,分泌細胞因子到細胞外。因流式細胞儀只能對細胞表面或內部的抗原進行檢測,如細胞因子分泌
流式細胞術實驗抗凝劑的選擇
抗凝劑的選擇:外周血標本可采用EDTA、ACD或肝素抗凝。如果用同一份血標本做白細胞計數和流式分析,則應用EDTA抗凝;對于血小板分析的實驗,一般不用肝素抗凝。骨髓穿刺液常用肝素或EDTA抗凝。由于相對大量的ACD會通過改變pH而影響骨髓細胞活性問題,通常不推薦用ACD作骨髓穿刺液的抗凝劑。