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一、準備工作1、實驗器具與材料：（1）移液槍：10ul（2）吸頭：20ul（3）吸頭臺：放置200ul和20ul的吸頭一個（4）三角燒瓶：50ml一個（5）瓊脂糖2、實驗器具的處理與準備（1） 塑料制品：（包括吸頭等）送至高壓3次，試驗前將槍頭放入吸頭臺。（2）電泳板及電泳槽：用自來水沖洗干凈備用3、試劑配制和準備：（1） 電泳緩沖液（TAE）：先配制0.5mol/L，PH8.0的EDTA溶液：將37.2g EDTA-Na加入160ml蒸餾水中，在攪拌器上劇烈攪拌。在用NaOH調節溶液PH值至8.0（約需4gNaOH）。用蒸餾水定容至200ml。后送至高壓滅菌。室溫保存。再配制50×TAE溶液：在400ml蒸餾水中溶解121g Tris堿，加入28.55ml冰乙酸和50ml 0.5ml/L EDTA溶液，再加蒸餾水定容至500ml，室溫保存。（2）瓊脂糖溶液（1.0%）：50×TAE溶液取10ml，稀釋成500ml，取50ml溶......閱讀全文
PCR反應體系與反應條件 標準的PCR反應體系： 10×擴增緩沖液 10ul 4種dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～1
PCR反應體系與反應條件 標準的PCR反應體系： 10×擴增緩沖液 10ul 4種dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板
PCR反應五要素：參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引
一、基于分子雜交的分子診斷技術 上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年，由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增，人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現，為基于分子雜交的體外診斷方法進行了
差異顯示聚合酶鏈反應（PCR) 可促進在諸多物種中與污染暴露相關的新分子標志物的鑒定。至今，已有多種差異顯示方法被詳細描述。這里，我們描述了一種改良的RNA 隨機引物觸發的 PCR 方 法（RNAarbitrarily primed PCR， RAP-PCR) , 主要涉及通過 羅 丹 明（rhod
PCR反應體系與反應條件-------------------------------------------------------------------------------- 標準的PCR反應體系：10×擴增緩沖液 10ul4種dNTP混合物 各200umol/L引物 各10
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
PCR技術概論PCR技術簡史PCR技術的基本原理PCR反應體系與反應條件PCR反應特點PCR擴增產物的分析 聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。 它具有特異、敏感、產率高、 快速、 簡便、重復性好、易自
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一
常見問題PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚至消失。假陰性，不出現擴增條帶。PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及， ④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。模板：①模板中含有雜蛋白質，②模板中
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料，用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常，從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常，以確定受檢者有無基因水平的異常變化，對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗
內容：一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來，植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的，當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時，表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀，如
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合
致病微生物系列致瀉大腸埃希氏菌鑒定劑盒（PCR法）產品說明致瀉大腸埃希氏菌鑒定劑盒參照《GB4789.6—2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗》進行設計，可針對食品樣品中的致瀉大腸埃希氏菌特異核酸片段進行擴增，通過電泳判斷樣品的鑒定結果。該產品檢出限為10^3 cfu/
PCR擴增產物分析 PCR產物是否為特異性擴增，其結果是否準確可靠，必須對其進行嚴格的分析與鑒定，才能得出正確的結論。PCR產物的分析，可依據研究對象和目的不同而采用不同的分析方法。凝膠電泳分析：PCR產物電泳，EB溴乙錠染色紫外儀下觀察，初步判斷產物
一、目的基因的獲得 目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
標準的PCR反應體系： 10×擴增緩沖液 10ul 4種dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L
實驗步驟 ##一、 從組織和培養細胞中分離RNA1.TRIzol試 劑（Invitrogen)。該試劑含有苯酚和硫氰酸鹽化合物，操作時應穿實驗服，戴手套，存放于 4°C 。2.氯仿。3.異丙醇。4.乙醇。5.焦炭酸二乙酯（DEPC) 處理的水
SSCP原理：sscp稱為單鏈構象多態性，它是基于DNA構象來檢測PCR產物單鏈堿基微小差異的方法，因其檢測敏感，快速和所需裝置簡便而在分子生物學各個領域廣泛應用。但該方法的試驗結果受多種因素的影響，如：PCR產物，溫度，電壓，PAGE膠的濃度和交聯度等，因而重復性比較差。因此在做SSCP時要注意各
SSCP原理：sscp稱為單鏈構象多態性，它是基于DNA構象來檢測PCR產物單鏈堿基微小差異的方法，因其檢測敏感，快速和所需裝置簡便而在分子生物學各個領域廣泛應用。但該方法的試驗結果受多種因素的影響，如：PCR產物，溫度，電壓，PAGE膠的濃度和交聯度等，因而重復性比較差。因此在做SSCP時要注意各
產品說明病菌檢測系列可針對食品、飼料等樣品中的致病微生物的特異核酸片段進行擴增，儀器實時監測擴增過程中的熒光信號變化，自動判讀結果。本產品用于致瀉大腸埃希氏菌的檢測。檢出限為103 CFU/ml。 產品組成（96測試）試劑含量作用孔1反應液-uidA23μl/孔12孔/排8排（本
mRNA差別顯示技術也稱為差示反轉錄PCR（Differential Display of reverse Transcriptional PCR）簡稱為ddRT-PCR。它是將mRNA反轉錄技術與PCR技術二者相互結合發展起來的一種RNA指紋圖譜技術。目前已廣泛應用于分離鑒定組織特異性表達的基因。
【摘要】 目的建立抗草甘膦轉基因大豆的快速檢測方法。方法：針對轉基因大豆基因組中被導入的35S啟動子、NOS終止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因，自行設計了兩對引物，采用雙重PCR同時擴增上述基因，用8g/L羥丙基甲基纖維素為篩分介質，在50cm×100μm i．d．涂壁毛細管中，于一1
前言 一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Po
PCR技術簡介 前言 一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reacti
DNA測序可用于：（1）測定未知序列；（2）確定重組DNA的方向與結構；（3）對突變進行定位和鑒定比較研究。實驗方法原理ABI PRISM 310型基因分析儀(即DNA測序儀)，采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳，應用該公司專利的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法)，
實驗概要本實驗將釀酒酵母作為胞內晶體蛋白的攜帶和表達宿主，同時，作為可能的營養體喂養海洋線蟲P. redivivus將所表達的目的蛋白導入線蟲機體，觀察線蟲的生長、發育、繁殖或是死亡情況，探討胞內晶體蛋白對昆蟲病原線蟲以外的線蟲是否具有營養作用。為此，首先構建一種重組大腸桿菌，其所攜帶的重組質粒能夠
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因，檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學，醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點，它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 ＼意義，分子生物學技術的發展，尤其是PCR技術的出
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因，檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學，醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點，它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 ＼意義，分子生物學技術的發展，尤其