大腸桿菌基因型及遺傳符號說明系列一
實驗室的一般大腸桿菌擁有4288條基因,每條基因的長度約為950bp,基因間的平均間隔為118bp(基因Ⅷ)。E.coli基因組中還包含有許多插入序列,如λ-噬菌體片段和一些其他特殊組份的片段,這些插入的片段都是由基因的水平轉移和基因重組而形成的,由此表明了基因組具有它的可塑造性。利用大腸桿菌基因組的這種特性對其進行改造,使其中的某些基因發生突變或缺失,從而給大腸桿菌帶來可以觀察到的變化,這種能觀察到的特征叫做大腸桿菌的表現型 (Phenotype),把引起這種變化的基因構成叫做大腸桿菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表現出不同的特性。分子克隆中常用的大腸桿菌及其遺傳標記按Demerec等1966年提出的命名原則,采用的菌株所有的基因都假定處于野生型狀態,除非在基因型上另外注明。大腸桿菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966)一、一般規則:1、根據基因產物或其作用產物的英文名稱的第一個字母......閱讀全文
大腸桿菌生長曲線測定實驗
一定量的微生物,接種在適合的新鮮液體培養基中,在適宜的溫度下培養,以菌數的對數作縱坐標,生長時間作橫坐標,做出的曲線叫生長曲線。一般可分為延遲期、對數期、穩定期和衰亡期四個時期。不同的微生物有不同的生長曲線,同一種微生物在不同的培養條件下,其生長曲線也不一樣。實驗方法原理測定微生物生長曲線的方法很多
關于大腸桿菌的分類介紹
1、按致病作用 目前國際公認的分類,主要有六個種類的大腸桿菌,即能夠致使胃腸道感染的腸道致病性的大腸桿菌(EPEC)、腸道產毒素性的大腸桿菌(ETEC)、腸道侵襲性的大腸桿菌(EIEC)、腸道出血性的大腸桿菌(EHEC)、腸集聚性的大腸桿菌(EAEC)以及近年來發現的腸產志賀樣毒素同時具有一定
大腸桿菌檢測的新方法
1 氣相色譜(GC)和高效液相色譜法(HPLC) 氣相色譜法主要是將大腸桿菌經過一系列衍生化的前處理后,為接下來的分析研究提供盡可能多的化學組分。大腸桿菌的污染程度可以用頂空氣相色譜法來分析,其原理是利用食品密封系統頂部的微生物代謝產物CO2對微生物進行分析。這種方法對食品質量安全檢測有重
關于大腸桿菌表達系統的介紹
在各種表達系統中,最早被采用進行研究的是大腸桿菌表達系統,也是掌握最為成熟的表達系統,大腸桿菌表達系統以其細胞繁殖快速產量高、IPTG誘導表達相對簡便等優點成為生產重組蛋白的最常用的系統。 對于表達不同的蛋白,需要采用不同的載體。已知的大腸桿菌的表達載體可分為非融合型表達載體和融合型表達載體兩
大腸桿菌的生長周期是多少
一般大腸桿菌每20分鐘繁殖一代,這就意味著,它的生活周期才20分鐘。培養周期得看的目的,種子一般過夜培養,發酵過程應該以菌種消亡時刻為終點,或者以產量最高時刻為放罐時刻。大腸桿菌的血清型能夠引起人體或動物胃腸道感染,主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的,除胃腸道感染以外,還會引起尿道感染、
小兒大腸桿菌腸炎的病理病因
細菌感染(20%): 細菌性腸炎的致病菌以痢疾桿菌最常見,其次為空腸彎曲菌和沙門氏菌。 病毒感染(20%): 在病毒性胃腸炎中,輪狀病毒是嬰幼兒腹瀉的主要病因,而諾瓦克病毒是成人和大齡兒童流行性病毒性胃腸炎的主要病因。 寄生蟲感染(15%): 寄生蟲引起的腸炎以溶組織內阿米巴較為常見。
小兒大腸桿菌腸炎的檢查介紹
內窺鏡檢查 臨床上多數病變在直腸和乙狀結腸,采用乙狀結腸鏡檢查很有價值,對于慢性或疑為全結腸患者,宜行纖維結腸鏡檢查。 放射學鋇劑檢查 急性期一般不宜作鋇劑檢查。而特別注意的是重度潰瘍性結腸炎在作鋇灌腸時,有誘發腸擴張與穿孔的可能性。
中德合作鎖定大腸桿菌疫情元兇
這張來自德國餐館的照片幫助科學家確定了最終的罪魁禍首。 5月中旬,一場突如其來的疫情襲擊德國。5月22日,德國首次通告世界衛生組織,本國感染腸出血性大腸桿菌的患者人數激增;5月25日,來自德國漢堡-埃普多夫大學醫學中心臨床部的裝有純化病菌DNA的小試管被運抵中國深圳華大基因
關于大腸桿菌的濾膜法簡介
該方法主要過程:加入 10 mL 左右的無菌水于濾器中,然后摻入一些無菌水進行清潔濾器的內壁,再進行過濾,將濾膜放在 M-FC 培養基中,兩者之間不能夠有氣泡,然后進行密封,存放溫度為 44.5℃,存放時間約 24 h,直到大腸桿菌的菌群變成藍色或藍綠色。然后記錄數據,估算每一單位的水溶液菌群數
關于大腸桿菌感染-的病原介紹
大腸桿菌 為革蘭陰性短桿菌,因可分解乳糖而產酸,菌落在SS、中國藍及伊紅美藍平板上分別呈紅色、藍色及紫黑色,借此可與沙門菌及志賀菌相鑒別,但應注意少數菌株分解乳糖緩慢。本菌屬能分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇,產酸、產氣,不分解蔗糖。靛基質 (吲哚)、甲基紅、VP及枸椽酸鹽(IMVC)試驗分別呈
大腸桿菌的生長曲線測定實驗
細菌的生長曲線測定實驗對于(1)細胞生長過程監控(2)細胞生長時態的觀察等都有重要意義實驗方法原理將一定數量的細菌,接種于適宜的液體培養基中,在適溫下培養,定時取樣測數,以菌數的對數為縱坐標,生長時間為橫坐標,作出的曲線稱為生長曲線。該曲線表明細菌在一定的環境條件下群體生長與繁殖的規律。一般分為延緩
突變讓大腸桿菌與宿主互惠
本報訊 《自然—微生物學》8月4日發表的一篇論文指出,珀椿象與一個大腸桿菌實驗菌株之間的互惠(或共生)作用能通過大腸桿菌的一個單一突變進行快速改造。研究結果或幫助科學家理解有益微生物如何與它們的宿主共同生長,以及驅動這種關系的分子機制。微生物通常與宿主是共生的關系,這意味著雙方都能從這種關系中受益。
人造大腸桿菌可實現病毒抵抗
大腸桿菌作為一種重要的模式工業微生物,在醫藥、化工、農業等方面具有廣泛的應用。近30年來,多種代謝工程改造的新策略和新技術,被用于設計、構建和優化大腸桿菌細胞工廠,極大地提高了生物法合成化學品的生產速率和產量。 不過,此前對于大腸桿菌的利用,僅局限在自然界中存在的物質上,無法滿足人們對于化工生
質粒DNA高頻轉化大腸桿菌實驗
實驗材料?感受態細胞試劑、試劑盒?質粒DNA抗生素儀器、耗材?Ep管水浴鍋LB平板實驗步驟 1、取新制備的一管感受態細胞。?2、取0.03 ml感受態細胞轉和4 ng質粒DNA混勻,置冰浴30min?3、將 Ep管置于42 ℃水浴中熱沖擊2分鐘,立即置于冰上1分鐘。?4、在 Ep管中加70 ul L
小兒大腸桿菌腸炎的癥狀體征
產毒性大腸桿菌腸炎 潛伏期為1~2天,起病較急。臨床表現類似霍亂,一般不發熱或發低熱,腹瀉多為水樣便,量多,有腥臭味,在顯微鏡下檢查無白細胞和紅細胞,常有中、重度等滲或低滲性脫水。為自限性疾病,病程4~7天。 侵襲性大腸桿菌腸炎 潛伏期18-24小時,起病急,腹瀉頻繁,大便呈粘凍狀,帶膿血
新技術可快速檢測大腸桿菌
華威大學生命科學學院的研究人員發現了一種新技術,可以在幾分鐘內檢測細菌的存在。在這項研究中,華威大學的科學家發現健康細菌和受到抗生素或紫外線殺傷的細菌表現出完全不同的電反應。這些發現發表在《PNAS》雜志上。 目前測試臨床樣品或商業產品中的細菌污染情況通常需要數天的時間。在此期間,如果不能通過
小兒大腸桿菌腸炎的癥狀體征
產毒性大腸桿菌腸炎 潛伏期為1~2天,起病較急。臨床表現類似霍亂,一般不發熱或發低熱,腹瀉多為水樣便,量多,有腥臭味,在顯微鏡下檢查無白細胞和紅細胞,常有中、重度等滲或低滲性脫水。為自限性疾病,病程4~7天。 侵襲性大腸桿菌腸炎 潛伏期18-24小時,起病急,腹瀉頻繁,大便呈粘凍狀,帶膿血
小兒大腸桿菌腸炎的鑒別診斷
慢性腸炎泛指腸道的慢性炎癥性疾病,其病因可為細菌、霉菌、病毒、原蟲等微生物感染,亦可為過敏、變態反應等原因所致。臨床表現為長期慢性、或反復發作的腹痛、腹瀉及消化不良等癥,重者可有粘液便或水樣便。
侵入性大腸桿菌如何引起疾病?
侵入宿主細胞:EIEC具有侵入宿主細胞的能力,能夠穿透腸道上皮細胞,進入宿主體內。這種侵入性是EIEC引起疾病的關鍵因素。 產生毒素:雖然EIEC不產生與食物中毒相關的毒素,但它能夠產生類似志賀氏菌毒素(Shiga toxin)的毒素,這種毒素對宿主細胞具有毒性作用,導致細胞損傷和炎癥反應。
致病性大腸桿菌的種類
埃希菌屬桿菌為腸道正常菌群之重要成分,大腸桿菌為主要代表菌種。大多數大腸桿菌為條件致病菌,能產生和攜帶腸毒素(LT、ST、SLT)、定居因子(CFA-ⅠCFA-Ⅱ)、K抗原或類似物質以及帶有性菌毛和分泌內毒素者,為致病性大腸桿菌,主要有: (1)腸產毒性大腸桿菌(ETEC) ETEC是5歲以上嬰
大腸桿菌的呼吸酶和底物
大腸桿菌的呼吸酶和底物呼吸酶氧化還原對中點電位(伏)甲酸脫氫酶碳酸氫鹽/甲酸鹽?0.43氫化酶質子/氫?0.42NADH脫氫酶NAD/NADH?0.32甘油-3-磷酸脫氫酶DHAP/Gly-3-P?0.19丙酮酸氧化酶醋酸鹽+二氧化碳/丙酮酸鹽?乳酸脫氫酶丙酮酸鹽/乳酸鹽?0.19D-氨基酸脫氫酶2
小兒大腸桿菌腸炎的鑒別診斷
慢性腸炎泛指腸道的慢性炎癥性疾病,其病因可為細菌、霉菌、病毒、原蟲等微生物感染,亦可為過敏、變態反應等原因所致。臨床表現為長期慢性、或反復發作的腹痛、腹瀉及消化不良等癥,重者可有粘液便或水樣便。
外源質粒DNA轉化大腸桿菌
摘要: 轉化是將外源DNA分子通過物理或化學的方法導入基因工程細菌中的過程,是基因工程等研究領域的基本實驗技術之一. 外源質粒 DNA 轉化 大腸桿菌 1 實驗簡介 轉化是將外源DNA分子通過物理或化學的方法導入基因工程
大腸桿菌雜交及基因定位實驗
一、原理大腸桿菌染色體呈環狀。高頻重組菌株(Hfr)的染色體上整合有F因子,當Hfr細菌與F-細菌細胞發生接合(即雜交)時Hfr細胞(供體菌)的染色體從Hfr細胞向F-細胞內轉移。由于染色體的轉移具有一定的方向性,并且可以隨時中斷,因此根據結合后F-細菌(以重組子形式選出)中Hfr細菌染色體基因出現
大腸桿菌轉化實驗——熱擊法
大腸桿菌轉化可以:(1)將重組DNA分子導入大腸桿菌受體細胞進行復制,增殖和表達,以獲得目的基因;(2)驗證大腸桿菌感受態細胞效果;(3)用于分子生物學其他研究。實驗方法原理質粒DNA或重組DNA粘附在細菌細胞表面,經過42攝氏度短時間的熱擊處理,促進吸收DNA.然后在非選擇培養基中培養一代,待質粒
大腸桿菌的轉化原理及方法
大腸桿菌的轉化原理及方法大腸桿菌轉化可以:(1)將重組DNA分子導入大腸桿菌受體細胞進行復制,增殖和表達,以獲得目的基因;(2)驗證大腸桿菌感受態細胞效果;(3)用于分子生物學其他研究。實驗方法原理:質粒DNA或重組DNA粘附在細菌細胞表面,經過42°C短時間的熱擊處理,促進吸收DNA.然后在非選擇
大腸桿菌的生長周期是多少
一般大腸桿菌每20分鐘繁殖一代,這就意味著,它的生活周期才20分鐘。培養周期得看的目的,種子一般過夜培養,發酵過程應該以菌種消亡時刻為終點,或者以產量最高時刻為放罐時刻。大腸桿菌的血清型能夠引起人體或動物胃腸道感染,主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的,除胃腸道感染以外,還會引起尿道感染、
關于大腸桿菌的檢測方法介紹
食品中的大腸桿菌進行快速準確的檢測已成為了人們經常關注的問題。下面闡述食品中的大腸桿菌檢測的方法及分析 [2] 。 發酵法 這種方法主要是在44.5℃下的培養基上進行大腸桿菌的培養,該培養基含有熒光底物,需要培養24h。然后對熒光底物進行釋放,需要采用葡萄糖醛酸進行,讓培養基能夠在紫
食品中大腸桿菌檢測方法研究
摘要:近年來,食品安全問題越來越受到人們的重視,在頻頻發生的食品安全事故中,大腸桿菌是主要的影響因素,是食品污染程度的重要參數指標,如何采用快速、可靠的方法來準確的檢測出食品是否被大腸桿菌所污染是至關重要的。本文提出了大腸桿菌的傳統檢測技術以及最新發明的生物化學檢測方法,以期為大腸桿菌檢測技術的
腸出血性大腸桿菌(EHEC)
腸出血性大腸桿菌(EHEC)大腸桿菌(E.coli)是一種在人和溫血動物腸道內常見的細菌。大多數大腸桿菌菌株無害。然而,一些菌株,例如腸出血性大腸桿菌(EHEC)可引起嚴重的食源性疾病。它主要通過食用被污染的食物傳染給人類,這些食物如生的或烹調不徹底的絞碎肉制品和原料奶。它作為一個公共衛生問題的重要