細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。國內資深的細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。下面紀寧技術員就為您分享細胞株培養技術的幾大要點,趕緊拿起小本本記好了!一、取材細胞株培養的材料主要來源于外科手術或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位,瘤性轉移淋巴結或胸腹水是較好的培養材料。取材后盡快培養,因故不能立即培養者,可凍存。細胞株的培養方法及凍存方法同前述正常組織。二、成纖維細胞排除在細胞株培養中常混雜有一些成纖維細胞,培養時能與瘤細胞同時生長,并常壓過癌細胞,導致癌細胞生長受阻以至消失,應仔細排除。排除方法常有:機械刮除法、反復貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。三、提高細胞培養存活率和生長率根據實驗經驗,細胞株要經過對新環境的適應才能生長,因此不能局限于一般培養法,須采......閱讀全文
一、細胞株細胞株(Cell Strain):也就是說,細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經首次傳代成功后即為細胞系(cell line), 由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代
哺乳動物細胞培養過程 & 培養條件導語:哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取,原代培養,傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。哺乳動物細胞培養過程哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取,原代培養,傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。
細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。然而,細胞株在體外培養的過程中會出現一些問題,比如:細胞株無法在培養皿上貼壁生長,細胞株生長緩慢,細胞株死亡等。那么該如何解決呢?一、細胞株無法在培養器皿上貼壁生長細胞株胰酶消化過度
人教版(2002年審定通過的全一冊)高中生物教材中細胞株和細胞系的概念內涵與浙科版的概念內涵不同甚至完全相反。人教版2004年審定通過的《現代生物技術專題》高中教材就沒有出現這二個概念。據資料記載是因為這二個概念一度混用,導致概念不清。 人教版高中生物細胞株概念強調結束原代培養并可以進行傳
1)細胞株的培養和傳代 培養: 用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養細胞因子依賴細胞株還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,3~4天傳代一次。 懸浮生長細胞的傳代: 直接吸去或離心后吸去培養上清液,用新鮮培養
1、細胞株的培養和傳代培養:用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養細胞因子依賴細胞株還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,3~4天傳代一次。懸浮生長細胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養上清液,用新鮮培養液懸浮細胞,1:3或
原代細胞(primary cell)是指從機體的組織中經蛋白酶或其它的方法獲得、并在體外進行培養的細胞,稱為原代細胞。一般認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。 細胞系(cell strain):原代培養物經首次傳代成功后即為細胞系,由原先存
哺乳動物細胞培養過程哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取,原代培養,傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。如下對各個過程進行簡述:原代培養:從動物機體取出組織后切碎,經過各種酶(常用胰蛋白酶),螯合劑(常用EDTA)結合機械方法(吸液管反復吸吹)處理,分散成單細胞,置于
6 細胞培養基的選擇 6.1根據細胞特點、蛋白表達及病毒特點和培養方式選擇細胞培養基 商售工業用細胞培養基主要是干粉培養基,常用的培養基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等系列,根據細胞的特性及工業化的生產需求,開發或生產的同一系列的細胞培養基在成份上也有
細胞培養技術細胞周期的測定一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。 單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。 測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法
一、原代細胞培養 (一)原理:細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件,將細胞從機體中取出,在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來,廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域,發展成一種重要生物技術
實驗方法原理 將人胰腺癌細胞株8988 接種于裸鼠腋窩處皮下,每周測量腫瘤大小,第42d 處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查,放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養,HE 染色。實驗材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌細胞株8988試劑、試劑盒 RPMI-1640 完全
實驗概要初步掌握哺乳動物細胞的原代培養與傳代培養的基本操作過程,為生物工程在醫學上的應用打下基礎。實驗原理1. 細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件,將細胞從機體中取出,在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研
據韓聯社4月12日報道,韓國綠十字制藥公司聲稱,為迅速應對流感蔓延,該公司已采用細胞培養方式成功培植出了細胞株,現已著手開發下一代流感疫苗。 綠十字公司將投入50余名研究人員和500億韓元從事這項研究。研究負責人、綠十字綜合研究組的安東浩(音譯)理事表示:“細胞株培養是該項技術的核心所在,
人胰腺癌裸小鼠模型的建立用于:(1)胰腺癌的診斷;(2)胰腺癌治療的研究;(3)觀察胰腺癌細胞株在移植前后形態學是否發生變化。實驗方法原理將人胰腺癌細胞株8988 接種于裸鼠腋窩處皮下,每周測量腫瘤大小,第42d 處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查,放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞
一、概念1、細胞系(Cell Line):原代培養舞經首次傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質或標志
3. 底物熒光素(Luciferin)是如何進入小鼠體內的?需要多少? 熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進入小鼠體內的,約一分鐘就可以擴散到小鼠全身。 大部分發表的文章中,熒光素的濃度是150mg/kg (見下圖)。20克的小鼠需要3毫克的熒光素,價錢約兩到三美元。常用方法是腹腔注射,擴散較慢
原代細胞(primary cell) 是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。一般認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代,
1、RPMI-1640 Medium RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養,是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以
1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養,是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等
原代細胞(primary cell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。一般認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代,進
細胞培養常用培養基及基本特性1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養,是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細
1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養,是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等
細胞的傳代培養實驗可以用于:(1)擴增細胞數量;(2)擴大細胞培養。內容來源:中國醫科大學實驗指導手冊。實驗方法原理體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭
實驗方法原理 體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間
實驗方法原理 體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間
細胞株的培養、凍存和復蘇1)細胞株的培養和傳代培養:用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養細胞因子依賴細胞株還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,3~4天傳代一次。 懸浮生長細胞的傳代:直接直接吸
組織細胞用于遺傳學分析最常見的是體外培養的細胞株,多為惡性腫瘤細胞株,且呈貼壁生長,僅小數細胞株為懸浮生長。培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和染色體標本制出清晰度高等優點。組織細胞染色體制備的關鍵是掌握好體外細胞的生長動態,只有處在對數生長期的細胞才能出現較高的分裂相,所以積水仙素處理的時機及量是染
小牛血清和胎牛血清有何區別?應用注意事項? 來源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。 組份與比例不同:兩者所含的促細
細胞培養基的種類與應用! 經典的培養基有很多種,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用最廣泛的培養基。其他如M199 、 IMDM 、 L15培養基等也用于某些細胞的培養。其具體的特征及應用如下: 1、BME細胞培養基 基礎Eagl