細胞株的概念
通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株(Cell Strain)。......閱讀全文
細胞株的概念
通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株(Cell Strain)。
細胞株的概念
細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經首次傳代成功后即為細胞系(cell line), 由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限, 可稱為有限細胞系(finite cel
細胞株的概念和特性
通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株(Cell Strain)。
細胞株、細胞系、原代細胞的概念
細胞株(cell strain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養細胞中獲得具有特殊性質或標志物的細胞稱為細胞株。一般認為,細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。細胞系(cell line)是原代細胞經首次傳代成功后即為
細胞株的保存
1.?紫外消毒30min后關閉紫外燈,開啟超凈臺正常工作狀態,用酒精消毒操作者的雙手。2.?將所需的培養基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內,點燃酒精燈,將培養基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側。特別是將培養基瓶放
細胞株的保存方法
1. 紫外消毒30min后關閉紫外燈,開啟超凈臺正常工作狀態,用酒精消毒操作者的雙手。2.?將所需的培養基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內,點燃酒精燈,將培養基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側。特別是將培養基瓶放
如何保存細胞株?
?1. 紫外消毒30min后關閉紫外燈,開啟超凈臺正常工作狀態,用酒精消毒操作者的雙手。? ? 2. 將所需的培養基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內,點燃酒精燈,將培養基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側。
穩定細胞株構建
穩轉細胞系(穩定表達細胞株)指在細胞中持續穩定表達特定基因或干擾特定基因表達。穩轉細胞株的目的基因質粒DNA整合到細胞染色體上,使細胞長期穩定表達該基因。穩轉細胞株包括多克隆穩轉細胞株和單克隆穩轉細胞株。慢病毒感染目的細胞后,通過抗性基因篩選得到的細胞株是多個細胞克隆的組合。單克隆細胞株是從多克隆細
細胞株的基本信息
細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經首次傳代成功后即為細胞系(cell line),由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限,可稱為有限細胞系(finite cell li
穩定表達細胞株的建立
1、將轉染后的細胞按照一定的比例接種到6孔板中(一般選用1:10和1:100兩個梯度),分別采用1200mg/ml,1000mg/ml和800mg/ml的G418進行篩選;以轉染攜帶EGFP質粒載體的細胞作為陽性對照,以未轉染質粒載體的細胞作為陰性對照;2、每3~4天換液一次;3、篩選20~30天,
穩定轉染細胞株的構建
1. 2?穩定轉染細胞株的構建原理:穩定轉染,就是轉染的質粒DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因及蛋白。需要在瞬時轉染基礎上對靶細胞進行篩選或者應用高轉染效率的病毒,根據不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物進行細胞傳代,從而得到可穩定表達目的基因的細胞系。應用:????
細胞株的保存方法介紹
1. 紫外消毒30min后關閉紫外燈,開啟超凈臺正常工作狀態,用酒精消毒操作者的雙手。2. 將所需的培養基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內,點燃酒精燈,將培養基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側。特別是將培養基
細胞株的傳代與培養
培養細胞株傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長細胞如COS-7、CHO等用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞如PC12用直接吹打即可傳代。 一、用品 (1) ?0.25%胰蛋白酶,全培養液 (2) ?滴管,離心管,培養瓶(皿),培養瓶蓋,注射器,計數6 二、步驟 (1) 貼壁細胞的消化法
細胞株是如何構建的?
1,什么是瞬時轉染和穩定轉染?瞬時轉染:外源片段的表達時間短暫。這主要是因為外源導入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低,所以以染色體外(episomal)形式存在,不能隨細胞分裂而一同復制導致后拷貝數被稀釋導致的。而且考慮到細胞分裂會稀釋質粒的量,所以起初轉染的質粒拷貝數極高。這就導致瞬時轉染呈現
如何構建耐藥細胞株?
腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥性是腫瘤治療失敗的重要因素之一,成為目前阻礙腫瘤治療的絆腳石。因此,探索腫瘤細胞產生耐藥的原因以及如何改善腫瘤細胞對化療藥物耐藥仍是目前研究的熱點和難點。腫瘤細胞耐藥的產生是一個復雜的過程,它的機制廣泛牽涉到藥物代謝學、病理學、生理學等多個學科,這就決定了腫瘤細胞對化療藥物
體內耐藥細胞株的建立實驗
體內耐藥細胞株的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身生物化學過程的改變,細胞膜上出現Pgp(或P-170)糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受。實驗方法原理細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身藥物化學過程的改變,細胞膜上出現Pgp糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受,隨著藥物濃度的遞增,其耐受
快速構建細胞株的使用策略
細胞株構建是廣大做細胞研究科研工作者及生物技術員常用的一種技術,目的就是通過構建一個高產感興趣蛋白的細胞,而細胞株構建就是實現這個目的的過程。這是一個簡單的操作,卻也是一個復雜的操作。簡單在于,從表面上看,并不需要很高超的操作技巧;復雜在于,這是一個時間周期長、操作步驟多、易污染、易混亂的重復勞動工
體內耐藥細胞株的建立實驗
實驗方法原理 細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身藥物化學過程的改變,細胞膜上出現Pgp糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受,隨著藥物濃度的遞增,其耐受程度逐漸加強。實驗材料 小鼠瘤株試劑、試劑盒 肝素生理鹽水儀器、耗材 離心機實驗步驟 一、材料準備1. ?動物選擇:根據欲建立的耐藥細胞株,選擇合適的動
原代細胞與細胞株的區別
原代細胞培養最大優點是:細胞直接來源于機體組織,生物性狀尚未發生大的變化,在一定程度上能夠反映體內的狀態。細胞株和原代細胞不是完全一樣。并非每一種組織源性細胞都有相應的細胞株,有些細胞必須養原代,細胞株是來源于原代細胞,原代細胞導入了病毒增殖基因并轉變為細胞株,細胞株帶有癌變細胞的特點。細胞株的遺傳
分析細胞株培養技術重點
細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。國內資深的細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。下面紀寧技術員就為您分享細胞株培養技術的幾大要點,趕緊拿起小本本記好了!一、取材細胞
細胞系或細胞株的建立
一、概念1、細胞系(Cell Line):原代培養舞經首次傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質或標志必須
細胞株的污染鑒定、預防和處理
普通微生物污染:培養基渾濁,高倍鏡觀察有微生物污染;按規定棄用并全面嚴格滅菌。支原體污染:顯微鏡無法觀察,依經驗表現為細胞生長緩慢,有細胞漂浮等等,應通過PCR?等方法鑒定,如發現支原體污染,應按規定棄用,實驗室要及時全面消毒滅菌,防止蔓延。(有些常規性細胞學實驗不受支原體污染影響,可以繼續使用細胞
細胞株和細胞系的差別
原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長就會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去,這些存活的細胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細胞叫做細胞株。細胞株的遺傳物質沒有發生改變。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”,不能再傳下去。但是有部分
細胞株的培養、凍存和復蘇
細胞株的培養、凍存和復蘇1)細胞株的培養和傳代培養:用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養細胞因子依賴細胞株還有加入適量細胞因子。在37℃?5%?CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,3~4天傳代一次。?懸浮生長細胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養上清液,用新
細胞系或細胞株的建立
一、概念1、細胞系(Cell Line):原代培養舞經首次傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質或標志必須
細胞系或細胞株的建立
?1、細胞系(Cell Line):原代培養舞經*傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。??? 2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質或標志必須
細胞株和細胞系的區別
細胞系原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長就會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去,這些存活的細胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細胞叫做細胞系。細胞株細胞株的遺傳物質沒有發生改變。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”,不能再傳下去
影響細胞株生長的因素有哪些?
細胞株在體外進行培養,失去了機體的調節和控制,因此,除滿足營養的要求外,還必須使細胞生存環境晝接近活體的環境。外環境的培養條件如溫度、滲透壓、酸堿度等均能影響細胞的生長。?一、溫度:一般哺乳類及禽類細胞體外培養的適宜溫度是37~38℃。溫度過高或過低都會影響到細胞的生長。細胞耐受低溫的能力比抗熱的能
細胞株的保存與操作方法
1.紫外消毒30min后封閉紫外燈,敞開超凈臺正常作業狀況,用酒精消毒操作者的雙手。2.將所需的培育基,胰酶確保瓶身潔凈后放于作業臺面內,點燃酒精燈,將培育基和胰酶瓶口用酒精棉球擦洗后,再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩端。特別是將培育基瓶放于斜
細胞株和細胞系的區別
人教版(2002年審定通過的全一冊)高中生物教材中細胞株和細胞系的概念內涵與浙科版的概念內涵不同甚至完全相反。人教版2004年審定通過的《現代生物技術專題》高中教材就沒有出現這二個概念。據資料記載是因為這二個概念一度混用,導致概念不清。?人教版高中生物細胞株概念強調結束原代培養并可以進行傳代培養的細