免疫學檢驗中的酶免疫技術
目前,免疫學檢驗中的標記技術主要包括酶免疫技術、熒光免疫技術、放射免疫技術、金免疫技術、化學發光免疫技術等。其中酶免疫技術是以酶標記的抗體(抗原)作為主要試劑,將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的高效性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術。作為經典的三大標記技術之一,酶免疫技術在檢驗醫學中得到廣泛應用并不斷得到更新。 一、常用的酶及顯色底物 在酶免疫技術中用于標記的酶應具有催化活性高、催化專一性強;與抗原抗體偶聯后不影響抗原抗體的免疫反應性和酶活性;催化的底物易于配制、保存且催化底物產生的信號產物易于觀察和檢測;對人無害且價廉、易得等特點,目前常用的酶及底物見表1。 表1 常用酶及底物 常用酶 底物 加終止液前顏色 加終止液后顏色 辣根過氧化物酶(HRP) 鄰苯二胺(OPD) 橙黃色 棕黃色 ......閱讀全文
關于酶免疫技術的簡介
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展,應用不同標記物,根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮,而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型,對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技
免疫酶技術的操作步驟
(1) 用微量移液器分別加待檢血清、陽性對照、陰性對照各100μl于1、2、3孔中,370C水浴箱溫育30min。(2) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干。(3) 每孔加入酶結合物2滴,370C水浴箱溫育30min。(4) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干(5) 每孔分別加入顯色A液、B
免疫酶標的必要的試劑
(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent); (2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結合物"(conjugate); (3)酶反應的底物。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
酶免疫電泳技術
一,酶免疫電泳技術的原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時,在堿性緩沖液的條件下,抗原帶負電,向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原,在相同條件下,移動距離不等。這些在不同部位的抗原,再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合
免疫酶技術的技術原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗(ELISA),它是使抗
免疫酶技術的技術原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗(ELISA),它是使抗
均相酶免疫測定
1.酶增強免疫測定技術(EMIT):EMIT的基本原理是半抗原與酶結合成酶標半抗原,保留半抗原和酶的活性。當酶標半抗原與抗體結合后,所標的酶與抗體密切接觸,使酶的活性中心受到影響而活性被抑制。反應后酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例,從酶活力的測定結果就可推算出標本中半抗原的量。2.克隆酶供體
酶免疫測定的應用
酶免疫測定具有高度的敏感性和特異性,幾乎所有的可溶性抗原抗體系統均可用以檢測。它的最小可測值達ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比,酶免疫測定的優點是標記試劑比較穩定,且無放射性危害。因此,酶免疫測定的應用日新月異,酶免疫測定的新方法、新技術不斷發展。但酶免疫測定在醫學檢驗中的普及應歸功于商品試
發光酶免疫分析法
從標記免疫分析角度, 化學發光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發光劑,操作步驟與酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶標記生物活性物質(如酶標記的抗原或抗體) 進行免疫反應
豬酶聯免疫分析(ELISA)
? 豬酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關液體樣本中胰島素(Insulin)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬胰島素(Insulin)水平。用純化的豬胰島素(Insulin)抗體包被微孔板,制成固
酶免疫測定的應用
幾乎所有的可溶性抗原抗體系統均可用酶免疫測定檢測。 均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質的檢測。 非均相免疫測定中的ELISA在多種物質的檢測中被廣泛的使用。
鴨(T)酶聯免疫分析
鴨(T)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定鴨血清,糞便及相關液體樣本中**(T)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中鴨**(T)水平。用純化的鴨**(T)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入**(T),再與HR
免疫酶技術的應用介紹
免疫酶技術是指在一定的生物反應器內,利用酶的催化作用,進行物質轉化的技術.其應用范圍已遍及工業、醫藥、農業、化學分析、環境保護、能源開發和生命科學理論研究等各個方面。
免疫酶技術的應用介紹
免疫酶技術是指在一定的生物反應器內,利用酶的催化作用,進行物質轉化的技術.其應用范圍已遍及工業、醫藥、農業、化學分析、環境保護、能源開發和生命科學理論研究等各個方面。
酶免疫測定的應用
幾乎所有的可溶性抗原抗體系統均可用酶免疫測定檢測。均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質的檢測。非均相免疫測定中的ELISA在多種物質的檢測中被廣泛的使用。
人(DHT)酶聯免疫分析
人(DHT)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中雙氫睪酮(DHT)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人雙氫睪酮(DHT)水平。用純化的人雙氫睪酮(DHT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加
關于免疫酶技術的簡介
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定,是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法,其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本,通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在,以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿
人酶聯免疫分析(ELISA)
人酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中鄰氨基苯甲酸合成酶(ASA)的含量。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人鄰氨基苯甲酸合成酶(ASA)水平。用純化的人鄰氨基苯甲酸合成酶(ASA)抗體包被微孔板,
酶聯免疫法的原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
酶免疫測定的應用
酶免疫測定具有高度的敏感性和特異性,幾乎所有的可溶性抗原抗體系統均可用以檢測。它的最小可測值達ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比,酶免疫測定的優點是標記試劑比較穩定,且無放射性危害。因此,酶免疫測定的應用日新月異,酶免疫測定的新方法、新技術不斷發展。但酶免疫測定在醫學檢驗中的普及應歸功于商品試
免疫酶測定法簡介
免疫酶測定法是一種用酶標記一抗或二抗檢測特異性抗原或抗體的方法。本法將抗原抗體反應的高度特異性與酶對底物高效催化作用結合起來,根據酶作用底物后顯色,以顏色變化判斷實驗結果。目前常用的方法有酶免疫組化技術和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。前者測定細胞表面抗原和組織內的抗原,后者主要測定可溶性抗原或抗體
免疫酶技術的技術原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗(ELISA),它是使抗
免疫多聚酶鏈反應
實驗概要免疫多聚酶鏈反應(PCR)是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。由于PCR具有強大的擴增能力,因而比常規的免疫學檢測法,如ELISA和放射免疫測定(RIA)的敏感性提高好幾個數量級。實驗原理免疫PC
免疫酶標的相關類型介紹
(1)雙抗體夾心法 為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯制成的小管、小盤或小孔)上,然后加被測溶液,倘樣品中有相應抗原,則與抗體在載體表面形成復合物。洗滌后加入酶標記的特異性抗體,后者通過抗原也結合到載體的表面。洗去過剩的標記抗體,加入酶的底物,在一定時間內經酶催化產生
免疫多聚酶鏈反應
實驗概要免疫多聚酶鏈反應(PCR)是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。由于PCR具有強大的擴增能力,因而比常規的免疫學檢測法,如ELISA和放射免疫測定(RIA)的敏感性提高好幾個數量級。實驗原理免疫PC
什么叫-酶免疫測定
酶免法是酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA),它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然后通過顯色來檢測。用酶與指示劑的反應來放大信號便于檢測。 就是用酶標記抗原或抗體,抗原抗體反應后加入酶的指示劑(酶的底物反應后會顯色),顏色的
酶免疫測定的概述
酶免疫測定(enzyme immunoassay,EIA),是將酶催化作用的高效性與抗原抗體反應的特異性相結合的一種微量分析技術。酶標記抗原抗體后形成的酶標記物,既保留抗原或抗體的免疫活性,又保留酶的催化活性。當酶標記物與待測樣品中相應的抗原或抗體相互作用時,可形成酶標記抗原抗體復合物。利用復合
酶聯免疫法的原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原
酶聯免疫法的原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原