免疫學檢驗中的酶免疫技術
目前，免疫學檢驗中的標記技術主要包括酶免疫技術、熒光免疫技術、放射免疫技術、金免疫技術、化學發光免疫技術等。其中酶免疫技術是以酶標記的抗體（抗原）作為主要試劑，將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的高效性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術。作為經典的三大標記技術之一，酶免疫技術在檢驗醫學中得到廣泛應用并不斷得到更新。 一、常用的酶及顯色底物 在酶免疫技術中用于標記的酶應具有催化活性高、催化專一性強；與抗原抗體偶聯后不影響抗原抗體的免疫反應性和酶活性；催化的底物易于配制、保存且催化底物產生的信號產物易于觀察和檢測；對人無害且價廉、易得等特點，目前常用的酶及底物見表1。 表1 常用酶及底物 常用酶 底物 加終止液前顏色 加終止液后顏色 辣根過氧化物酶（HRP） 鄰苯二胺（OPD） 橙黃色 棕黃色 ......閱讀全文
異相酶免疫試驗和均相酶免疫試驗
Ag為待測抗原，AgAb-E為結合標記物，Ab-E為游離標記物。若抗原-抗體反應影響標記物中酶的活性,如酶活性消失，即結合標記物(AgAb-E)無酶活性，游離標記物(Ab-E)有酶活性； (1) 檢測時不需分離結合標記物(AgAb-E)和游離標記物(Ab-E),檢測體系中標記物酶活性(Ab-E
免疫酶染色試驗_細胞免疫酶染色法
細胞免疫酶染色法（以檢測血清中 EB 病毒 IgA 抗體為例說明） 實驗方法原理 免疫酶染色試驗 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）標記已知抗體或抗原，與相應抗原或抗體結合，形成酶標記抗體－抗原復
免疫酶染色試驗_細胞免疫酶染色法
細胞免疫酶染色法（以檢測血清中 EB 病毒 IgA 抗體為例說明） 實驗方法原理 免疫酶染色試驗 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）標記已知抗體或抗原，與相應抗原或抗體結合，形成酶標記抗體－抗原復
免疫酶染色試驗——斑點免疫酶染色法
斑點免疫酶染色法 (dot-ELISA)實驗 （以檢測輪狀病毒抗原為例說明）實驗方法原理該技術是進行 ELISA 測定時，借用了免疫印跡技術的某些原理和方法，利用硝酸纖維素膜為固相載體，使抗原抗體反應在膜上進行，結合在硝酸纖維素膜上的酶抗體結合物通過將底物分解成不溶性的產物而沉積，在硝酸纖維素膜上形
酶免疫技術酶與底物
酶結合物是酶與抗原或者抗體、半抗原在交聯劑作用下聯結的產物,是 ELISA 成敗的關鍵試劑。它不僅具有抗原抗體的特異性反應,還具有酶促反應的特性,最終產生生物放大的特性。酶免疫反應中,最常用的酶是辣根過氧化物酶,HRP的催化反應需要底物過氧化氫(H2O2)和供氫體(DH2)。供氫體多為無色的還原型染
酶免疫技術中酶和酶作用底物
酶和酶作用底物（一）酶的要求：?一個酶蛋白分子每分鐘可催化10 3 ～10 4 個底物分子轉變成有色產物。用于標記的酶應符合：1.酶的活性要強，催化反應的轉化率高，純度高。2.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量，方法簡單易行、敏感和重復性好。3.作用專一性強 ，酶活性不受樣品中其他成分的影響，受檢
酶免疫電鏡試劑
1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。 2．DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基聯苯胺)加入10mlTris－HCl緩沖液(0.05mMol/L pH 7.6)，加1%H2O20.5ml～1ml。配制時，避光
酶免疫電鏡試劑
1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。 2．DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基聯苯胺)加入10mlTris－HCl緩沖液(0.05mMol/L pH 7.6)，加1%H2O20.5ml～1ml。配制時，避光進行
免疫酶染色試驗
實驗方法原理 免疫酶染色試驗 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）標記已知抗體或抗原，與相應抗原或抗體結合，形成酶標記抗體－抗原復合物，復合物中的酶在遇到相應的底物時，能催化底物產生顏色反應，根據有色產物的有無及其濃
免疫酶技術介紹
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定，是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷